專利名稱：一種折角凹槽式細(xì)胞爬片的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)耗材制造技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種有效防止細(xì)胞懸液 溢出、便于分辨正反面的折角凹槽式細(xì)胞爬片。
背景技術(shù)：
細(xì)胞培養(yǎng)是現(xiàn)代生物科學(xué)中發(fā)展十分迅速的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)，它為細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、 遺傳學(xué)、病毒學(xué)的研究和應(yīng)用做出了重要貢獻(xiàn)。細(xì)胞培養(yǎng)是指從體內(nèi)組織取出細(xì)胞于離 體條件下模擬體內(nèi)環(huán)境，在無菌、適宜溫度、酸堿度及一定營養(yǎng)物質(zhì)，使其生長繁殖， 并維持其結(jié)構(gòu)和功能的一種培養(yǎng)技術(shù)。利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)開展體外試驗(yàn)，已成為闡釋生 命現(xiàn)象、發(fā)病機(jī)理和篩選藥物的重要手段；利用細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)結(jié)合細(xì)胞融合、細(xì)胞雜交 以及轉(zhuǎn)基因技術(shù)進(jìn)行基因重組、組織構(gòu)建是遺傳和組織工程的重要工具；利用細(xì)胞培養(yǎng) 來生產(chǎn)具有重要醫(yī)用價(jià)值的酶、生長因子、疫苗和單抗等，已成為醫(yī)藥生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的 重要部分。
細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是分子生物學(xué)研究的重要手段，而利用細(xì)胞爬片進(jìn)行免疫組化染色、 蛋白核酸水平的原位檢測則是細(xì)胞學(xué)研究的常用方法。傳統(tǒng)的細(xì)胞爬片制作方法如下 ①準(zhǔn)備24孔或6孔細(xì)胞培養(yǎng)板②預(yù)先用多聚賴氨酸包被(D在培養(yǎng)板每孔中滴入1滴 培養(yǎng)基，然后將玻片置于液滴上，通過液體的表面張力作用將玻片吸附于培養(yǎng)板上，壓 緊④常規(guī)細(xì)胞消化，離心、重懸，將吹打的細(xì)胞懸液分別加到每個(gè)孔蓋玻片上，讓其 貼壁生長⑤待細(xì)胞在爬片上生長后，再小心用鑷子將爬片取出，漂洗、固定，完成相 應(yīng)的染色、封片。在此諸多過程中，存在著以下不易解決的問題
1. 培養(yǎng)板孔中滴加培養(yǎng)基時(shí)爬片容易漂浮，由于接種細(xì)胞受重力作用易沉積于培 養(yǎng)板底部，而落在漂浮的爬片上的細(xì)胞就很少了；如果事先在培養(yǎng)板中滴加培養(yǎng)基則很 可能導(dǎo)致爬片與培養(yǎng)板吸附不易分離，即使分離也往往會(huì)留下印跡使得攝片背景不潔。 此外，細(xì)胞很容易在漂浮的爬片背面(即培養(yǎng)板向上的一面)貼壁生長，即爬片兩面都 有細(xì)胞生長，由于爬片極薄，顯微觀察和照相都容易圖象重疊。要去除這些細(xì)胞操作也 困難，沖洗用力過度有可能使得爬片正面的細(xì)胞脫落，實(shí)際操作過程中難以掌握；
2. 當(dāng)從培養(yǎng)板中取出爬片做免疫學(xué)試驗(yàn)時(shí)，也會(huì)遇到很多困難。目前實(shí)驗(yàn)室采用 的爬片多為正方形蓋玻片，不能分辨正反面，即使在某個(gè)角上以缺口作為記號(hào)也無濟(jì)于 事。免疫學(xué)研究的相關(guān)步驟繁瑣，細(xì)胞爬片的取出與漂洗往往需要十來次，如果沒有標(biāo) 注細(xì)胞爬片的正反面，在夾持中偶爾一次的疏忽導(dǎo)致爬片翻轉(zhuǎn)都可能前功盡棄。基于此，
3有必要針對(duì)現(xiàn)有細(xì)胞爬片進(jìn)行改進(jìn)以彌補(bǔ)試劑容易漂浮外溢、不好分辨正反面等缺陷。 發(fā)明內(nèi)容
本實(shí)用新型的目的在于提供了一種結(jié)構(gòu)簡單、使用方便，能有效標(biāo)記爬片正反面， 減少細(xì)胞懸液溢出的折角凹槽式細(xì)胞爬片。
為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本實(shí)用新型采用以下技術(shù)措施 一種折角凹槽式細(xì)胞爬片，其 特征在于所述爬片為中央呈凹槽式的玻璃片，爬片設(shè)置有折角，折角折起的方向與凹 槽深度方向相反。
所述爬片的長度、寬度均為15.5mm。 所述凹槽為圓形且直徑小于爬片邊長2腿。 所述凹槽深度為0. 3mm。 所述折角呈9(T折起且折角的個(gè)數(shù)為一個(gè)。 本實(shí)用新型與現(xiàn)有技術(shù)相比，具有以下優(yōu)點(diǎn)和效果
1) 爬片中央的凹槽，避免了滴加的細(xì)胞懸液溢出爬片，有效限定了細(xì)胞貼壁生長 的范圍；
2) 中央凹槽可以節(jié)省試劑用量，防止試劑外溢；
3) 90°折角設(shè)計(jì)便于實(shí)驗(yàn)人員準(zhǔn)確夾持，爬片正反面不易混淆， 一目了然，即使 不小心使爬片翻面，由于折角的支撐作用也不會(huì)造成細(xì)胞涂抹受損；
4) 折角還能起到標(biāo)記的作用，協(xié)助實(shí)驗(yàn)人員在顯微鏡下初步定位，避免盲目尋找 目的細(xì)胞，提高了工作效率。


圖1為本實(shí)用新型實(shí)施例的結(jié)構(gòu)示意圖； 圖2為本實(shí)用新型的立體示意圖； 圖中標(biāo)記說明1、折角，2、凹槽，3、爬片。
具體實(shí)施方式
為了更好地理解本實(shí)用新型，
以下結(jié)合附圖和實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型做進(jìn)一步的說 明，參見圖1、圖2:
按本實(shí)用新型實(shí)施的折角凹槽式細(xì)胞爬片采用15.5mmX15.5mm的玻璃片制作，長 度和寬度一般根據(jù)培養(yǎng)板的孔徑而定，細(xì)胞爬片3的中央設(shè)置有圓形凹槽2，凹槽2的 直徑小于爬片邊長2mm，圓形凹槽2的深度約0.3誦，細(xì)胞懸液滴于此凹槽2中，由于 液體的表面張力作用不會(huì)溢出凹槽2，避免了培養(yǎng)液外溢導(dǎo)致細(xì)胞在爬片3的反面貼壁
4生長，以及爬片3與培養(yǎng)板之間的摩擦造成的細(xì)胞損傷。爬片3設(shè)置有折角1，折角1 呈90°折起，折起的方向與凹槽2的深度方向相反，便于夾持時(shí)不會(huì)將試劑滴落，而且 避免操作過程中劃傷細(xì)胞或爬片碎裂，更顯著的優(yōu)點(diǎn)是解決了目前爬片無法辨認(rèn)正反面 的難題，折起的折角1相當(dāng)于一個(gè)鮮明的標(biāo)記能幫助實(shí)驗(yàn)人員定位目的細(xì)胞，操作簡便， 節(jié)省了大量的時(shí)間，提高工作效率。
爬片3的邊長、中央凹槽2的直徑與折角1的度數(shù)的選擇，都是為了便于細(xì)胞的貼 壁生長以及簡化操作，以期用最小量的細(xì)胞懸液獲得最大量的貼壁細(xì)胞，為后續(xù)的免疫 學(xué)試驗(yàn)節(jié)省試劑用量，還可以避免操作過程中劃傷細(xì)胞，輕而易舉的完成繁瑣的實(shí)驗(yàn)步 驟，獲得理想的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
以上所揭露的僅為本實(shí)用新型的較佳實(shí)施例而已，當(dāng)然不能以此來限定本實(shí)用新型 之權(quán)利范圍，因此依本實(shí)用新型申請(qǐng)專利范圍所作的等效變化，仍屬本實(shí)用新型的保護(hù) 范圍。
權(quán)利要求1.一種折角凹槽式細(xì)胞爬片，其特征在于所述爬片為中央呈凹槽式的玻璃片，爬片設(shè)置有折角，折角折起的方向與凹槽深度方向相反。
2. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的折角凹槽式細(xì)胞爬片，其特征在于所述爬片的長度、寬度 均為15. 5mm。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的折角凹槽式細(xì)胞爬片，其特征在于所述凹槽為圓形且直徑小于爬片邊長2誦。
4. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的折角凹槽式細(xì)胞爬片，其特征在于所述凹槽深度為0. 3mra。
5. 根據(jù)權(quán)利要求l所述的折角凹槽式細(xì)胞爬片，其特征在于所述折角呈90°折起且 折角的個(gè)數(shù)為一個(gè)。
專利摘要本實(shí)用新型屬于細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)耗材制造技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種折角凹槽式細(xì)胞爬片，所述爬片為中央呈凹槽式的玻璃片，爬片設(shè)置有折角，折角折起的方向與凹槽深度方向相反。本實(shí)用新型的爬片中央設(shè)置凹槽，避免了滴加的細(xì)胞懸液溢出爬片，有效限定了細(xì)胞貼壁生長的范圍；可以節(jié)省試劑用量，防止試劑外溢；爬片的90°折角設(shè)計(jì)便于實(shí)驗(yàn)人員準(zhǔn)確夾持，爬片正反面不易混淆，一目了然，折角設(shè)計(jì)還可以協(xié)助實(shí)驗(yàn)人員在顯微鏡下初步定位，避免盲目尋找目的細(xì)胞，提高了工作效率。
文檔編號(hào)C12M3/04GK201386105SQ200920084690

公開日2010年1月20日 申請(qǐng)日期2009年4月2日 優(yōu)先權(quán)日2009年4月2日
發(fā)明者楊安懷, 邢怡橋, 瑋 金 申請(qǐng)人:武漢大學(xué)