專利名稱：與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因、其編碼蛋白及其應用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明涉及一種與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因、其編碼蛋白及其應用。
背景技術(shù)：
植物類胡蘿卜素主要分布于植物葉綠體和有色體膜中，包括胡蘿卜素(carotene)和葉黃素(xanthophylls)兩大類。植物類胡蘿卜素是光吸收復合體的重要組分，并且在保護光合器官、防止光氧化損傷等方面起著重要作用。植物類胡蘿卜素也是許多花和果實中的重要色素，賦予植物花、果實等器官絢麗的色彩，用以吸引昆蟲、鳥類或其它動物來進行授粉和傳播種子。植物類胡蘿卜素還是植物激素(如ABA)、防御化合物和風味芳香物(如e-n引哚)
等許多生理活性物質(zhì)生物合成的前體。此外，e-胡蘿卜素和含e-環(huán)的胡蘿卜素是人類及
動物體內(nèi)維生素A (retinol)合成的前體，許多其它非維生素A類胡蘿卜素，如葉黃體素(lutein)、玉米黃質(zhì)(zetxanthin)、番茄紅素(lyc叩ene)在淬滅自由基、增強人體免疫力、預防心血管疾病和防癌抗癌等保護人類健康方面具有更為重要的作用。
在微生物中合成和生產(chǎn)類胡蘿卜素已經(jīng)有很長的歷史和許多成功的例子，但是，從微生物中獲得的類胡蘿卜素往往在化學構(gòu)象、生理活性等方面不同于植物和動物來源的類胡蘿卜素，而且需要復雜昂貴的分離純化過程。而利用植物合成和生產(chǎn)類胡蘿卜素則不需要此過程，可以直接食用。
鹽藻("朋s^eWs)屬于單細胞真核藻類，是目前已知的最耐鹽的真核生物之一，可在接近淡水(NaCl〈50mM)直到飽和鹽水(NaCl〉5M)的環(huán)境中存活.此外，對強光照、環(huán)境pH值、溫度等變化造成的脅迫也能夠有很好的耐受。脅迫條件下，細胞內(nèi)會產(chǎn)生大量甘油和類胡蘿卜素等物質(zhì)，調(diào)節(jié)細胞的生理活動來適應外界環(huán)境的變化。在4M NaCl條件下生長的鹽藻，體內(nèi)的甘油濃度可以達到7.8M;而在合適的誘導條件下，鹽藻積累的類胡蘿卜素的總量可以達到其有機干重的10%，甚至更高。因此，鹽藻不僅是研究生物逆境耐受機制的模式生物，在大規(guī)模生產(chǎn)類胡蘿卜素、脂肪酸等代謝物方面也有極大的潛力。而鹽藻類胡蘿卜素合成途徑基因的分離、功能鑒定及表達特性研究則為利用鹽藻在特定條件下大規(guī)模生產(chǎn)類胡蘿卜素提供了理論依據(jù)。
類胡蘿卜素是由類異戊二烯聚合而成的萜類化合物，其生物合成的前體是含有C5的異戊二烯焦磷酸(IPP)。 IPP在IPP異構(gòu)酶(IPPI)作用下，異構(gòu)化生成DMAPP，然后在櫳牛兒基牴牛兒基焦磷酸合成酶(GGPS)催化下，DMAPP與3個IPP分子縮合而生成含C20的櫳牛兒基櫳牛兒基焦磷酸(GGPP)。兩分子的GGPP再由八氫番茄紅素合成酶(phytoene synthase, PSY)
催化形成第一個C40的類胡蘿卜素-八氫番茄紅素(phytoene)。在鹽藻中，PSY基因以
及下游的PDS和LCY基因已經(jīng)相繼被克隆。但是，GGPP作為真正進入類胡蘿卜素合成途徑的第一種前體物質(zhì)，其表達調(diào)控與逆境條件下鹽藻胡蘿卜素合成之間的關(guān)系還沒有相關(guān)報道。因此，DvGGPS基因的克隆及功能研究不僅可以深入理解鹽藻胡蘿卜素合成途徑，為利用鹽藻大規(guī)模生產(chǎn)胡蘿卜素提供理論依據(jù)，還為利用基因工程法進行原核表達和農(nóng)作物品質(zhì)改良提供了更多的選擇。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的之一是提供一種與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因，該基因來源于鹽藻，稱為
本發(fā)明目的之二是提供該基因的編碼蛋白。本發(fā)明目的之三是提供該基因的克隆方法。
本發(fā)明的目的之四在于提供該基因在提高原核菌株中胡蘿卜素含量中的應用。為達以上目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案
一種與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因，其特征在于該基因具有下列核苷酸序列之一
1) 具有SEQ ID NO 1所示的堿基序列；
2) 與序列表中序列1所限定的核酸序列具有95%以上的同源性，且編碼相同生物學功能蛋白質(zhì)的DNA序列。
一種上述的基因的編碼蛋白，該蛋白具有下列氨基酸序列之一
1) 具有SEQ ID NO 2所示的氨基酸序列；
2) 通過將SEQ ID NO 2的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添加而產(chǎn)生的衍生蛋白質(zhì)的氨基酸序列，該衍生蛋白質(zhì)與SEQ ID NO 2的蛋白具有相同的生物學功能。
一種克隆上述的基因的方法，該方法的具體步驟為利用SMART cDNA construction kit構(gòu)建了 3個鹽藻cDNA文庫，通過對文庫中cDNA的序列進行大規(guī)模測序，獲得對應的EST文庫。通過序列比對，分離到了一個鵬牛兒基櫳牛兒基合成酶基因，命名為/^^;/^;挑選cDNA文庫相應克隆進行測序，獲得了 "^^尸5"的cDNA序列；ZW^/^最長cDNA片段為15566bp，含有綠藻基因特異的加尾信號TGTAA及poly (A)結(jié)構(gòu)。
一種重組表達載體，該重組載體含有上述的基因。
一種宿主細胞，該宿主細胞含有上述的重組載體。一種上述的基因在提高原核菌株中胡蘿卜素含量中的應用。
本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因/^^/^在E. coli中起到了雄牛兒基繼牛兒基合成酶的功能，為胡蘿卜素合成途徑中的下游基因提供了胡蘿卜素合成所需的前體GGPP。同時，含有本發(fā)明的Z^^^5"基因的原核菌株在利用基因工程生產(chǎn)胡蘿卜素方面具有很高的潛力。


圖1為本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因"K^7^的編碼蛋白保守結(jié)構(gòu)域分析圖。
圖2為本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因"^^尸5"在酵母突變體ANY119(湖r",/7etiW, ,sJ-5^力iW-W"中的功能互補分析圖。其中A為轉(zhuǎn)化子在25度條件下的生長狀況圖，B為轉(zhuǎn)化子在37度條件下的生長狀況圖。
圖3為本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因Z^0^5"原核表達后大腸桿菌菌體色素分析圖。其中A為對含有不同原核表達載體的菌株合成的色素進行的分光光度分析圖，B為對原核菌株合成的色素進行的液相色譜分析圖。
圖4為本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因ZVC67^在1M—3M NaCl振蕩及營養(yǎng)缺乏處理條件下的表達模式的Real-time PCR分析圖。
具體實施例方式
下面結(jié)合具體實施例，進一步闡述本發(fā)明。應理解，這些實例僅用于說明本發(fā)明而不用于限制本發(fā)明的范圍。下列實施例中未注明具體實驗條件的實驗方法，通常按照常規(guī)條件，分子克隆(Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd ed.)或酵母遺傳法實驗指南(Methods in Yeast Genetics: A Cold Spring Harbor Laboratory CourseManual, Adams A et al編，Cold Spring Harbor Laboratory, 1998出版)中所述條件，或按照制造廠商所建議的條件。實施例一/^^尸5"全長編碼區(qū)的克隆與分析
利用SMART cDNA construction kit構(gòu)建了 3個鹽藻cDNA文庫，通過對該3個文庫中cDNA的序列測序，獲得對應的EST文庫；通過序列比對，分離到了一個櫳牛兒基徙牛兒基合成酶基因，命名為ZV6^/^。挑選cDNA文庫相應克隆進行測序，獲得了i^6^/^的cDNA序列。ZVW/^最長cDNA片段為15566bp，含有綠藻基因特異的加尾信號TGTAA及poly(A)結(jié)構(gòu)。Vector NTI軟件的分析結(jié)果顯示，A^6T^最長讀碼框編碼了一個含345個氨基酸的蛋白，蛋白分子量大小為37. 3kDa，等電點是6.44。 ChloroP 1.1 Server預測結(jié)果顯示，該蛋白可能定位于葉綠體。同源性比對表明，該蛋白具有植物牴牛兒基櫳牛兒基合成酶特有的保守結(jié)構(gòu)域FARM(DDXXXXDXXDD)和結(jié)構(gòu)域SARM (DDILD)，參見圖l。
實施例二 zv^;/^在酵母突變體中的功能分析
通過PCR方法，以A^6^ 的全長cDNA為模板，擴增獲得包含完整ORF的基因片段。借助引物引入法，在靶基因5'端加上&oR I酶切位點和真核翻譯保守的Kozak序列。弓i物序列如下-
Sense: 5'TAGAATTCGAGGATGGGGGCCTT 3'Antisense: 5' TGACTCGAGTCAGTTCTCTCGGTAGC 3'
將克隆到的目的片段插入到酵母組成型表達載體pAJ401中，并轉(zhuǎn)化酵母突變體ANY119(朋r", 6e^-力"rW-設(shè)力i^-W幼。該突變體由于缺失II型櫳牛兒基櫳牛兒基轉(zhuǎn)移酶的e亞基BET2，所以在25'C培養(yǎng)條件下能夠正常生長，而在37"高溫培養(yǎng)條件下無法正常生長，。而繼牛兒基櫳牛兒基合成酶基因的過量表達，則可以互補這一缺陷表型。由圖2A可以看出，突變體(M)、野生型(W)及含有Z t^^5"基因的酵母轉(zhuǎn)化子(1-6)在25'C條件下均可正常生長。而在37'C條件下，突變體不能正常生長，參見圖2B;而含有/V6^/^基因的酵母轉(zhuǎn)化子，不僅恢復了正常生長，而且其生長情況明顯好于野生型。該實驗在驗證"W6T^基因功能的同時，也暗示了其在提高生物耐熱能力方面的應用價值。
實施例三"K^7/^原核表達
為了驗證/M^/^基因是否在鹽藻胡蘿卜素合成途徑中起作用，我們將該基因與嗜夏孢歐文氏菌胡蘿卜素合成基因簇CrtYIB組合，通過對大腸桿菌轉(zhuǎn)化子合成的色素進行吸光度檢測，來判斷該基因是否能夠與嗜夏孢歐文氏菌來源的下游基因共同作用，合成0-胡蘿卜素。
首先，以ZM^尸5"cDNA序列以及嗜夏孢歐文氏菌基因組為模板，通過特異引物擴增目的基因片段DvGGPS， CrtE， CrtYIB，并引入特定酶切位點。其中，CrtE是嗜夏孢歐文氏菌櫳牛兒基牴牛兒基合成酶基因，該基因與下游基因簇CrtYIB共同作用，在該菌中合成e-胡蘿卜素。相關(guān)引物序列如下(下劃線標注部分為引入的限制性內(nèi)切酶位點)CrtYIB sense:
5' ATAGGTACCATGCAACCGCATTATGAT 3'CrtYIB antisense:
5' ATACTCGAG AAGACATGGCGCTAGAGC 3'CrtE sense:
65' TATGCTAGCATGACGGTCTGCGCAAA 3'CrtE antisense:
5' TGACTCGAGTTAACTGACGGCAGCGAG 3'DvGGPS sense:
5' TCAGCTAGCATGTGGGCCTTGAAGAG 3'DvGGPS antisense:
5' TGACTCGAGTCAGTTCTCTCGGTAGC 3'
利用原核表達載體pET30a和pRSETA，分別構(gòu)建本實驗所需的目的原核表達載體pET30a-CrtYIB， pRSETA-CrtE, pRSETA-DvGGPS。pET30a-CrtYIB， pRSETA空載體共轉(zhuǎn)化E. coli作為負對照；pET30a-CrtYIB, pRSETA-CrtE共轉(zhuǎn)化E. coli作為正對照；pET30a-CrtYIB，pRSETA-DvGGPS共轉(zhuǎn)化E. Coli，用于驗證"W67^基因的功能。
IPTG誘導目的基因表達之后，含有A^^S基因的轉(zhuǎn)化子菌體及正對照均表現(xiàn)出明顯的橙黃色。利用丙酮對3種轉(zhuǎn)化子菌體進行色素抽提，并對抽提液進行吸光度分析。結(jié)果如圖3A所示，負對照沒有表現(xiàn)出明顯的紫外吸收光譜，表明僅有CrtYIB這三個胡蘿卜素合成途徑的下游基因無法使大腸桿菌具備合成胡蘿卜素的能力；而含有"K^ /^基因的轉(zhuǎn)化子合成的色素的紫外吸收光譜與正對照一致，均表現(xiàn)出日-胡蘿卜素特異的三指形吸收峰425ran、450nm、 475nm，且最大吸收峰為450nm處。
以己垸為溶劑，以甲醇二氯甲垸=9: i為流動相，對e-胡蘿卜素標準品和上述抽提的
色素進行HPLC分析。結(jié)果如圖3B所示，含有/V^7/^基因的轉(zhuǎn)化子菌體合成的色素與e-胡蘿卜素標準品均在28分鐘處有明顯的吸收峰。
上述兩個實驗結(jié)果表明，"W67^基因在E.coli中起到了妮牛兒基妮牛兒基合成酶的功能，為胡蘿卜素合成途徑中的下游基因提供了胡蘿卜素合成所需的前體GGPP。同時，該實驗還暗示了含有ZV^^5基因的原核菌株在利用基因工程生產(chǎn)胡蘿卜素方面的潛力。
實施例四通過Realtime-PCR方法分析鹽藻ZVW/^基因在高鹽及營養(yǎng)缺乏處理條件下的表達模式
為了進一步研究在鹽藻胡蘿卜素合成發(fā)生變化時，/^^/^基因在RNA水平的表達模式，我們對處于對數(shù)期的鹽藻進行了 1MNaCl， +Nutrients—3MNaCl， -Nutrients的高鹽振蕩以及營養(yǎng)缺乏處理。根據(jù)已發(fā)表文獻研究結(jié)果，在該處理條件下，鹽藻合成的胡蘿卜素含量受到明顯的誘導。我們分別在0hr， lhr， 3hr， ， 12hr， 24hr， 48hr， 72hr對處理材料進行取樣，并提取鹽藻細胞總RNA。上述RNA樣品經(jīng)DNase I消化后，在反轉(zhuǎn)錄酶的作用下反轉(zhuǎn)成cDNA，稀釋10倍后作為各個實驗條件的real-time PCR的模板。real-time PCR引物設(shè)計
(1) DvGGPS R+: 5' -TCAGCTAGCATGTGGGCCTTGAAGAG-3'
(2) DvGGPS R- 5' -TGACTCGAGTCAGTTCTCTCGGTAGC-3，
(3) DvACTIN R+: 5' -GCCACTGCTTTAGCTGTTTGC-3'
(4) DvACTIN R- 5， -CCTCATGCTCCCAGATGTTCTA-3，
ZM^/^和"WCn^的文庫質(zhì)粒經(jīng)純化和定量后，按照10倍梯度稀釋作為定量PCR的標準曲線，"K/JCr/yV的轉(zhuǎn)錄量作為內(nèi)參?；?v^7/^的轉(zhuǎn)錄變化數(shù)據(jù)以其在模板中的拷貝數(shù)與"W6T力V的拷貝數(shù)的比值來作圖展示。
由實驗結(jié)果圖4可以看出，"./r7VA在受到高鹽振蕩及營養(yǎng)脅迫時，"Kft^ 基因的表達短期內(nèi)會受到抑制，推測可能是為了保證有足夠多的前體物質(zhì)進入甘油合成途徑，以應對高鹽振蕩。12hr之后該基因的表達又逐漸受到誘導，推測可能是為了提供更多的GGPP前體，進一步保證胡蘿卜素合成的增加。<110> 上海大學
〈120>與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因、其編碼蛋白及其應用
〈160〉 2
〈210〉 1
<211〉 1556
〈212> 腿
〈213〉 鹽藻(/ i/朋7ie"a Wr/cZ/s)
〈400〉 1
CAGTGGTATTGTAATAGTTGTGGCGTGGCAGGGGAGCAGTAAGAGCGAAAGAGAAAGAGT60
GATGGCGTCCAGTGTCCAGGACGCAGCATAGCTCAGTGTTCAGCACACTCTCTCCCAGCC120
TCCCACGCACCTAGCAGCAGGCAGAGGAGCCACGCACATTGAGGATGTGGGCCTTGAAGA180
GAGGAGCCACCTGCTGCCCTTCACAAAGGCCGACGCCGAGTTGCTCAAGGCCCGCAGCCG240
CCTGGCGCGTTAGCCGCTCGTCTTGCAGGACCCTAGCAATAGCCACAGCTGATGGGGCTG300
CCAAGCAATCCACTGCCTCCTTCGATTTCAAGGGCTACATGAAGCAGCGGGCAGTGATGG360
TGAACGAGGCTCTGGACAAAGCCTTGCCACGGCGCCACCCAGAAGTCCTCCTTGATTCTA420
TGAGGTACTCATTATTAGCTGGAGGGAAGCGCGTTCGGCCAGCACTGACCCTTGCAGCGT■
GTGAGATGGTTGGAGGGAGCATTGAGACTGCCATGCCCACAGCTTGTGCCATGGAAGTGG540
TACATACAATGAGCTTGATCCACGATGACTTGCCATCAATGGACAACGATGACTTCCGGA600
GAGGGAATCCGACCAACCATAAAGTGTACGGAGAGGACATGGCCATCCTGGCGGGTGATG660
CCCTGCTCTCCTTTGCCTTTGAGCACGTGGCACGGGCCACCAAGGGCACCTCGCCAGAGC720
GAGTGCTCCGTGTCATCCTGGAGCTTGGGCGTGCTGTCGGTGCGGATGGGTTGACAGGCG780
GACAGGTGGTGGACATTAAAAGCGAGAATGAAGAGGTGGGCTTGGAGGTCCTGCAGTTCA840
TCCACGAGCACAAGACGGCTGCCCTGCTGGAAGCATCAGTCGTTTGTGGCGCTCTAGTGG900
GTGGCGCAGATGATGTCACTGTGGAGAAGCTGCGCAAGTACGCACGCAACATTGGGCTTG960
CTTTCCAGGTGGTGGATGACATCTTGGACTGCACCCAGACAACTGAGATGCTAGGCAAGA1020
CGGCTGGGAAGGACTTGGATGTGAATAAAACTACGTACCCCAAGCTGCTTGGCCTGGAAA1080
AGAGCAAGCAGACTGCTGAGGACCTGATCAGTGAAGCCATTCAGCAGCTGGATGGATTTG1140CGCCTGAGAAGCGGGTCCCACTGGTGGCCTTGGCCAAGTACATCGGCTACCGAGAGAACT1200
GAGCCTTCACAGATGGCATGTTGCCATCGTCTCTAGGAAGGGGGTTGTGCCTGCTGAACT1260
AAATCTGGTTCTGAACCAGTTCTCTGACCTGCCACTCATGTTGACCATGCCCTCTGCCAG1320
GGCTGTGCGCATTCTCAGCTCATGTCTGCCAGGTCCTTGAGGCCACGTCGAGCCATGACT1380
TGGTGATTAGCCTTGGAGCTGTGTCTCAAACTTTGAGTCAAAGGCAGAGATGCCAGGTGC1440
ATTCCTTCCTGTGTACTGTGCCCTTTTCTTTTTCCCCGTTTGCCTCTTTGCTCGTGAATT1500
CCCCTTGTCAAACAATGCATTAATTTTGCCAGCAAGTAAAAAAAAAAAAAAAAAAA1556
<210> 2
〈211> 345
<212> PRT
〈213〉 鹽藻("W7S"eWa
〈400〉 2
MetTrpAlaLeuLysArgGlyAlaThrCysCysProSerGinArgPro16
ThrProSerCysSerArgProAlaAlaAlaTrpArgValSerArgSer32
SerCysi\rgThrLeuAlalieAlaThrAlaAspGlyAlaAlaLysGin48
SerThrAlaSerPheAspPheLysGlyTyrMetLysGinArgAlaVal64
MetValAsnGluAlaleuAspLysAlaLeuProArgArgHisProGlu80
ValLeuLeuAspSerMetArgTyrSerLeuLeuAlaGlyGlyLysArg96
ValArgProAlaLeuThrLeuAlaAlaCysGluMetValGlyGlySer112
lieGluThrAlaMetProThrAlaCysAlaMetGluValValHisThr128
MetSerLeulieHisAspAspLeuProSerMetAspAsnAspAspPhe144
ArgArgGlyAsnProThrAsnHisLysValTyrGlyGluAspMetAla160
lieLeuAlaGlyAspAlaLeuLeuSerPheAlaPheGluHisValAla176
ArgAlaThrLysGlyThrSerProGluArgValLeuArgVallieLeu192
GluLeuGlyArgAlaValGlyAlaAspGlyLeuThrGlyGlyGinVal208
ValAsplieLysSerGluAsnGluGluValGlyLeuGluValLeuGin224
PhelieHisGluHisLysThrAlaAlaLeuLeuGluAlaSerValVal240
CysGlyAlaLeuValGlyGlyAlaAspAspValThrValGluLysLeu256
ArgLysTyrAlaArgAsnlieGlyLeuAlaPheGinValValAspAsp272lie LeuAsp CysThrGinThrThrGlu MetLeu GlyLys ThrAla Gly288
Lys AspLeu AspValAsnLysThrThr TyrPro lysLeu LeuGly Leu304
Glu LysSer LysGinThrAlaGluAsp Leulie SerGlu Alalie Gin320
Gin LeuAsp GlyPheAlaProGluLys ArgVal ProLeu ValAla Leu336
Ala LysTyrl leGlyTyrArgGluAsn34權(quán)利要求
1.一種與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因，其特征在于該基因具有下列核苷酸序列之一1)具有SEQ ID NO 1所示的堿基序列；2)與序列表中序列1所限定的核酸序列具有95％以上的同源性，且編碼相同生物學功能蛋白質(zhì)的DNA序列。
2. —種根據(jù)權(quán)利要求l所述的基因的編碼蛋白，該蛋白具有下列氨基酸序列之一1) 具有SEQ ID NO 2所示的氨基酸序列；2) 通過將SEQ ID NO 2的氨基酸殘基序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代、缺失或添 加而產(chǎn)生的衍生蛋白質(zhì)的氨基酸序列，該衍生蛋白質(zhì)與SEQ ID NO 2的蛋白具有相同的生物 學功能。
3. —種克隆根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因的方法，該方法的具體步驟為利用SMART cDNA construction kit構(gòu)建了 3個鹽藻cDNA文庫，通過對該3個文庫中cDNA的序列測序， 獲得對應的EST文庫；再通過序列比對，分離到了一個櫳牛兒基櫳牛兒基合成酶基因，命 名為Z^^/S挑選cDNA文庫相應克隆進行測序，獲得了 Z W^尸5"的cDNA序列；ZVW/^最 長cDNA片段為15566bp，含有綠藻基因特異的加尾信號TGTAA及poly (A)結(jié)構(gòu)。
4. 一種重組表達載體，該重組載體含有上述的基因。
5. —種宿主細胞，該宿主細胞含有上述的重組載體。
6. —種根據(jù)權(quán)利要求1所述的基因在提高原核菌株中胡蘿卜素含量中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因、其編碼蛋白及其應用。本發(fā)明的與胡蘿卜素合成有關(guān)的合成酶基因DvGGPS在E.coli中起到了牻牛兒基牻牛兒基合成酶的功能，為胡蘿卜素合成途徑中的下游基因提供了胡蘿卜素合成所需的前體GGPP。同時，含有本發(fā)明的DvGGPS基因的原核菌株在利用基因工程生產(chǎn)胡蘿卜素方面具有很高的潛力。
文檔編號C12N15/63GK101671683SQ20091019659
公開日2010年3月17日 申請日期2009年9月27日 優(yōu)先權(quán)日2009年9月27日
發(fā)明者孟祥宗, 婷 宋, 宋任濤, 沖 常, 林鈺靚, 許政暟 申請人:上海大學