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因子的蕓苔屬植物(特 別是甘藍植物),所述遺傳決定因子包含QTLl和QTL2,所述遺傳決定因子賦予對蕓 苔根腫菌的抗性,特別是對根據(jù)ECD鑒別系統(tǒng)(Buczacki et al.,Trans Br. Mycol. Soc. 65, 295-303,(1975))被稱為31/31/31的蕓苔根腫菌株的抗性。在進一步的實施方案 中,本發(fā)明涉及攜帶遺傳決定因子的蕓苔屬植物(特別是甘藍植物),所述遺傳決定因子包 含QTLl和/或QTL2和/或QTL3,所述遺傳決定因子賦予對蕓苔根腫菌的抗性,特別是對 根據(jù) ECD 鑒別系統(tǒng)(Buczacki et al·,Trans Br. Mycol. Soc. 65, 295-303,(1975))被稱為 16/2/30、31/31/12和16/14/29的蕓苔根腫菌株的抗性。
[0047] 在一個優(yōu)選的實施方案中,本發(fā)明涉及攜帶遺傳決定因子的蕓苔屬植物(特別是 甘藍植物),所述遺傳決定因子包含QTLl和/或QTL2和/或QTL3,所述遺傳決定因子賦 予對蕓苔根腫菌的抗性,特別是對根據(jù)ECD鑒別系統(tǒng)(Buczacki et al.,Trans Br. Mycol. Soc. 65, 295-303,(1975))被稱為16/3/30和31/31/31的蕓苔根腫菌株的抗性。
[0048] 本發(fā)明還涉及蕓苔屬植物(特別是甘藍植物),其雜合地包含遺傳決定因子,所述 遺傳決定因子可由以下種子所生長的植物獲得,所述種子的代表性樣品被以NCHMB登錄號 41851 保藏于 NCHMB。
[0049] 在一個進一步的實施方案中,本發(fā)明涉及包含賦予蕓苔根腫菌抗性的遺傳決定因 子的蕓苔屬植物(特別是甘藍植物),其中所述遺傳決定因子可由以下種子所生長的植物 通過漸滲(introgression)獲得,所述種子被以登錄號NCIMB 41851保藏于NCIMB。
[0050] 本發(fā)明還提供包含賦予蕓苔根腫菌抗性的遺傳決定因子的蕓苔屬植物(特別是 甘藍植物),其中所述抗性是自由以下種子所生長的植物漸滲而來的,所述種子被以登錄號 NCHMB 41851 保藏于 NCHMB。
[0051] 對于想要將性狀漸滲入植物的熟練育種者來說,知道表型和擁有所述性狀的來源 以及任選地擁有標(biāo)記物以在育種中追蹤所述性狀是足夠的。在本發(fā)明中,本領(lǐng)域技術(shù)人員 以保藏物的形式擁有該性狀的來源并知道要尋找的是什么表型,即根腫病抗性。此外,他能 夠分配標(biāo)記物以更容易地追蹤性狀的遺傳(inheritance)。
[0052] 更特別地,應(yīng)當(dāng)注意的是,如果明確規(guī)定了選擇標(biāo)準(zhǔn),那么本領(lǐng)域技術(shù)人員將能夠 在任何進一步的世代中鑒定攜帶所述性狀的后代。對于本發(fā)明的性狀,通過由作為來自最 初雜交和自交步驟結(jié)果的種子生長F2植物并選擇對根腫病具有抗性的植物,能夠發(fā)現(xiàn)來 自在不攜帶賦予蕓苔根腫菌抗性的遺傳決定因子的植物和攜帶賦予蕓苔根腫菌抗性的遺 傳決定因子的植物(其攜帶該性狀的代表性的種子被以登錄號NCHMB 41851保藏)之間的 雜交的后代。
[0053] 根據(jù)本發(fā)明,提供了蕓苔屬植物(特別是甘藍植物),其包含賦予蕓苔根腫菌抗性 的遺傳決定因子,所述植物能夠通過以下步驟而獲得:
[0054] a)由以登錄號NCHMB 41851保藏的保藏物種子生長植物;
[0055] b)在受蕓苔根腫菌侵染的環(huán)境中種植植物;
[0056] c)通過沒有形成腫脹來選擇顯示對蕓苔根腫菌具有抗性的植物;
[0057] d)將在步驟c中所選擇的植物與對蕓苔根腫菌沒有抗性的植物雜交以獲得Fl群 體;
[0058] e)將來自Fl的植物自交以獲得F2群體;以及
[0059] f)重復(fù)步驟b)和c)以鑒定顯示對根腫菌具有抗性的植物。
[0060] 備選地,通過利用在本申請中所公開的分子SNP標(biāo)記物對所述植物進行基因定型 來進行如步驟c)中所述的選擇步驟。因此,還可以利用所述分子標(biāo)記物進行如步驟f)中 所重復(fù)的選擇。
[0061] 在不存在分子標(biāo)記物的情況下,或在所述遺傳決定因子和所述標(biāo)記物之間已經(jīng)發(fā) 生重組使得所述標(biāo)記物不再具有預(yù)測性的情況下,可以通過公知的等位性測試(allelism test)(更具體地稱為互補性測試(complementation test))來確定遺傳決定因子的等效 性(equivalence)。為了進行等位性測試,將對于本發(fā)明的已知決定子為純合的測試者 (tester)植物與對于要被測試的遺傳決定因子為純合的材料進行雜交。當(dāng)在該雜交的F2 中沒有觀察到所述性狀的分離時,則所述遺傳決定因子被證實為等效或相同。
[0062] 當(dāng)超過一個基因負責(zé)某種性狀并且完成等位性測試以確定等效性時,進行所述測 試的本領(lǐng)域技術(shù)人員必須確保所有相關(guān)基因均純合存在以使得該測試正常工作。
[0063] 適當(dāng)?shù)?,所述測試者植物為保藏物NCHMB 41851的植物,或顯示對根腫菌具有抗 性的該保藏物的后代植物。
[0064] 本發(fā)明的蕓苔屬植物優(yōu)選為甘藍植物,但也可以是本領(lǐng)域技術(shù)人員能夠?qū)⒈景l(fā)明 的遺傳決定因子漸滲入其中的蕓苔屬任何其它植物,例如以下蕓苔屬的種:甘藍、歐洲油 菜、蕓苔、Brassica cretica、憲青、芥菜和黑芥。本領(lǐng)域技術(shù)人員知曉如何用這些種進行種 間雜交,例如通過胚挽救(embryo rescue)、原生質(zhì)體融合和其它相關(guān)技術(shù)手段。
[0065] 本發(fā)明涉及以下品種的甘藍植物:
[0066] 羽衣甘藍(Brassica oleracea var. acephala DC.)(羽衣甘藍(kales))
[0067] 花挪菜(Brassica oleracea var. botrytis L.)(花挪菜、羅馬花挪菜 (romanesco))
[0068] 甘藍(Brassica oleracea var. capitata L.)(紅球、白球、皺葉卷心菜)
[0069] 抱子甘藍(Brassica oleracea var. gemmifera DC.)(球芽甘藍)
[0070] Brassica oleracea var. gongylodes L.(孽藍)
[0071] Brassica oleracea var. italica Plenck.(西蘭花、calabrese)
[0072] Brassica oleracea var. sabauda L.(皺葉卷心菜)
[0073] Brassica oleracea var. sabellica(甘藍葉)
[0074] Brassica oleracea var. selensia(羽衣甘藍(borecole))
[0075] Brassica oleracea var. albiflora Sun [ = B. alboglabra](芥藍(Chinese kale))
[0076] Brassica oleracea var. alboglabra[ = B. alboglabra](芥藍)
[0077] Brassica oleracea var. chinensis Prain(緬甸野油菜(burma sarson))
[0078] Brassica oleracea var. fimbriata Mill.(烹調(diào)用羽衣甘藍(kitchen kale))
[0079] Brassica oleracea var. fruticosa Metz.(千頭羽衣甘藍(thousand-head kale))
[0080] Brassica oleracea var. tronchuda L. H. Bailey(tronchuda cabbage)
[0081] Brassica oleracea var. costata (葡萄牙甘藍(Portugese cabbage))
[0082] Brassica oleracea var. medulIosa (髓莖羽衣甘藍(marrow stem kale))
[0083] Brassica oleracea var. pamifolia(羽衣甘藍、澤西羽衣甘藍(Jersey kale))
[0084] Brassica oleracea var. ramona (千頭羽衣甘藍)
[0085] 優(yōu)選的品種是西蘭花、花椰菜、羅馬花椰菜、紅球卷心菜、白球卷心菜、皺葉卷心菜 和擘藍。
[0086] 根據(jù)其又一個方面,本發(fā)明涉及蕓苔屬植物(特別是甘藍植物)的種子,所述植物 包含導(dǎo)致如在具有保藏登錄號NCHMB 41851的種子中所發(fā)現(xiàn)的對蕓苔根腫菌具有抗性的 遺傳決定因子。
[0087] 本發(fā)明還涉及能夠生長成本發(fā)明的甘藍植物的本發(fā)明蕓苔屬植物(特別是甘藍 植物)的種子。
[0088] 本發(fā)明還涉及雜交種子(hybrid seed)和生產(chǎn)雜交種子的方法,所述方法包括將 第一親本植物與第二親本植物雜交并收獲所得到的雜交種子。在所述性狀是隱性的情況 下,兩個親本都必須針對抗性性狀是純合的,以使所述雜交種子攜帶本發(fā)明的性狀。對于其 它性狀,它們不必一致。因此,兩個親本都以純合形式攜帶導(dǎo)致對蕓苔根腫菌的抗性的遺傳 決定因子。
[0089] 顯然提供本發(fā)明遺傳決定因子的親本蕓苔屬植物(特別是親本甘藍植物)不必是 由保藏的種子所直接生長的植物。所述親本還可以是來自所述種子的后代植物,或來自通 過其它手段被鑒定為具有或已經(jīng)獲得導(dǎo)致本發(fā)明性狀的遺傳決定因子的種子的后代植物。
[0090] 本發(fā)明還涉及本發(fā)明的蕓苔屬植物(特別是甘藍植物)的后代,所述后代對蕓苔 根腫菌具有抗性。能夠通過本發(fā)明的植物或其后代植物的有性或營養(yǎng)繁殖生產(chǎn)這樣的后 代。所述后代以純合或者雜合的形式攜帶所述遺傳決定因子,所述遺傳決定因子導(dǎo)致對蕓 苔根腫菌的抗性的性狀以及所述遺傳決定因子如同在具有保藏登錄號NCHMB 41851的種 子中所發(fā)現(xiàn)的一樣。
[0091] 當(dāng)本發(fā)明的遺傳決定因子是純合存在時,所述后代植物以如由以下種子所生長 的植物的相同或類似的方式顯示所述抗性性狀,所述種子的代表性樣品被以登錄號NCHMB 41851保藏。這意味著這樣的后代具有與本發(fā)明的蕓苔屬植物(特別是甘藍植物)所要求 保護的相同蕓苔根腫菌抗性特征。除此之外,可以一個或多個其它特征修飾所述植物。例 如,這樣的另外修飾通過誘變或通過用轉(zhuǎn)基因轉(zhuǎn)化而實現(xiàn)。
[0092] 在本文中所使用的詞"后代(progeny) "是指來自用顯示抗性性狀和/或攜帶所述 性狀內(nèi)在的遺傳決定因子的本發(fā)明植物進行雜交的后代(offspring)或第一代和所有進 一步的后代(descendant)。本發(fā)明的后代包含用攜帶導(dǎo)致抗性性狀的遺傳決定因子的本發(fā) 明植物進行的任何雜交的后代。例如,這樣的后代能夠由將第一蕓苔屬植物(特別是甘藍 植物)與第二蕓苔屬植物(特別是甘藍植物)雜交而獲得,其中所述植物之一是由以下種 子生長的,所述種子的代表性樣品被以NCHMB登錄號41851保藏,但也可以是攜帶如同存在 于NCHMB 41851中的遺傳決定因子的任何其它蕓苔屬植物(特別是任何其它甘藍植物)的 后代。
[0093] 所述后代植物包含遺傳決定因子,所述遺傳決定因子包含引起本發(fā)明的抗性的 一個或多個QTL,其中所述遺傳決定因子能夠由來自以下種子所生長的蕓苔屬植物(特別 是甘藍植物)獲得,所述種子的代表性樣品被以NCHMB登錄號41851保藏。因此,所述抗 性性狀具有甘藍植物基因組的遺傳基礎(chǔ),并且例如通過采用實施例1中所述的生物試驗 (bioassay)能夠?qū)⒏仕{植物鑒定為本發(fā)明的植物。
[0094] 本發(fā)明還涉及本發(fā)明的甘藍植物的適于有性和營養(yǎng)繁殖的部分,即繁殖材料,其 中所述繁殖材料包含本發(fā)明的引起對蕓苔根腫菌的抗性的遺傳決定因子。例如,這樣的部 分選自由以下組成的組:小孢子、花粉、子房、胚珠、胚囊和卵細胞。
[0095] 此外,本發(fā)明涉及本發(fā)明的甘藍植物的適于營養(yǎng)繁殖的部分,特別是本發(fā)明的甘 藍植物的插條、根、莖、細胞、原生質(zhì)體和組織培養(yǎng)物。所述組織培養(yǎng)物包含可再生細胞。這 樣的組織培養(yǎng)物可以源自葉、花粉、胚、子葉、下胚軸、分生細胞、根尖、花藥、花、種子和莖。 所述繁殖材料以純合或者雜合的形式攜帶引起對本發(fā)明蕓苔根腫菌抗性的遺傳決定因子。
[0096] 本發(fā)明還涉及由本發(fā)明植物的所述繁殖材料所生長的或再生的甘藍植物,所述甘 藍植物抗蕓苔根腫菌。所述抗性表型如同發(fā)現(xiàn)于由以下種子所生長的植物中一樣,所述種 子具有NCHffi登錄號41851并且所述抗
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