恰麻古抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法和醫(yī)藥用圖
【專利摘要】本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥恰麻古抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法和其在制備預(yù)防及治療腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、肝癌等惡性腫瘤藥物中的應(yīng)用。所述的提取物通過如下方法制備：氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100：0-100:100，體積比）洗脫，洗脫液干燥后即得提取物。
【專利說明】
恰麻古抗腫瘤提取物及其組合物的制備方法和醫(yī)藥用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種維吾爾藥恰麻古抗腫瘤提取物及其組合物 的制備方法和其在制備預(yù)防及治療腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、 肝癌等惡性腫瘤細(xì)胞株藥物中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 恰瑪古屬十字花科（Cruciferae)蕓苔屬蕓苔種，恰瑪古（Brassica rapa L.)又 名蕪菁或蔓菁，恰瑪古系維吾爾文名稱，為兩年生草本植物，常用根入藥。作為維吾爾族常 用的藥食兩用植物，應(yīng)用非常廣泛。主產(chǎn)于中國(guó)新疆天山西南、塔里木西北地區(qū)，在新疆南 部種植非常廣泛，是新疆維吾爾等少數(shù)民族喜愛的，并有較長(zhǎng)食用歷史的傳統(tǒng)藥食同源植 物。恰瑪古因具有開胸順氣，健胃消食，解毒，抑制細(xì)菌、真菌、酵母及人的某些寄生蟲的作 用，常被維吾爾醫(yī)用于治療食欲不振、胃腹冷痛、消化不良、體虛多夢(mèng)、氣管炎、腹瀉、瘡癤腫 毒等疾病。
[0003] 但是，對(duì)其抗腫瘤的有效成分一直不清楚，本發(fā)明通過系統(tǒng)地篩選研究，發(fā)現(xiàn)了恰 麻古的提取物，可以應(yīng)用于腫瘤的預(yù)防和治療。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明所解決的技術(shù)問題是提供一種維吾爾藥恰麻古抗腫瘤提取物及其制備方 法，其對(duì)腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、肝癌等惡性腫瘤細(xì)胞株具 有抑制作用。
[0005] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供一種含有恰麻古抗腫瘤提取物的藥物組合物。
[0006] 本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：
[0007] 維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅膠 柱，用氯仿：甲醇（100:0-0:100)混合溶劑梯度洗脫（氯仿：甲醇，具體比例見表1)，各氯 仿：甲醇比例混合溶劑洗脫液，濃縮，干燥后，利用體外抗腫瘤活性篩選體系測(cè)試其抗腫瘤 活性，意外地發(fā)現(xiàn)用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100 :0-100:100,體積比）洗脫，洗脫 液干燥后得到的提取物，具有顯著地抗腫瘤活性。
[0008] 優(yōu)選地，先用氯仿洗脫，再用體積比100:2的氯仿：甲醇洗脫，所得氯仿：甲醇100 : 2洗脫液干燥即為抗腫瘤活性的化合物。該活性部位從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其100 :2洗脫液 的TLC分析表征如圖1，TLC分析色譜條件=GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：氯仿：乙酸乙酯：甲醇 (3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0009] 或維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠（SiO2)柱分離，上樣后的硅膠 柱，先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫，繼用氯仿：甲醇混合溶劑 (氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫，氯仿：甲醇100:100洗脫液干燥后，具有顯著地抗腫 瘤活性。該活性部位從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其TLC分析表征如圖2, TLC分析色譜條件=GF254硅 膠板，展開系統(tǒng)：氯仿：乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0010] 具體，發(fā)現(xiàn)過程如下：
[0011] 1、恰麻古經(jīng)水提取物的制備
[0012] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇超聲提取15min，提取液濃縮后，得提取物 SN0179B，2. 0312g。
[0013] 2、氯仿：甲醇混合溶劑梯度洗脫方法和結(jié)果
[0014] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇超聲提取15min，提取液濃縮后，得提取物 SN0179B2. 0312g，留樣：0. 0123g。上柱，甲醇溶解，共用甲醇15ml。上硅膠柱色譜，拌樣硅 膠200mg，空白硅膠10g，玻璃柱內(nèi)徑2. 0cm，氯仿：甲醇系統(tǒng)梯度洗脫（條件見表1)，柱體積 11ml，每個(gè)梯度洗脫100ml，得到，各個(gè)濃度提取洗脫液的洗脫物，回收溶劑，即得，氯仿：甲 醇梯度洗脫提取物，TLC分析結(jié)果見圖3, TLC分析色譜條件=GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：氯仿： 乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸顯色。
[0015] 表 1

[0017] 3、抗腫瘤活性篩選方法和結(jié)果
[0018] 1)實(shí)驗(yàn)條件
[0019] a)細(xì)胞株信息
[0020] 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株C6購于中國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心細(xì)胞庫。
[0021] b)藥品及試劑
[0022] 樣品無菌條件下，DMSO溶解配置成母液濃度為100mg/mL，使用時(shí)用RPMI-1640培 養(yǎng)液稀釋至所需濃度（DMSO彡1%。）。
[0023] RPMI Medium 1640培養(yǎng)基干粉購于美國(guó)GIBCO公司。胎牛血清購于北京元亨圣馬 生物技術(shù)研究所。Trypsin 1:250、二甲基二苯基四氮唑溴鹽（MTT)。
[0024] c)儀器
[0025] CO2培養(yǎng)箱（SANYO,日本）
[0026] 垂直層流潔凈工作臺(tái)（上海上凈凈化設(shè)備有限公司）
[0027] 倒置生物顯微鏡（重慶光電儀器有限公司）
[0028] 低/高速臺(tái)式離心機(jī)（上海安亭科學(xué)儀器廠）
[0029] 電子天平（奧豪斯儀器有限公司）
[0030] 酶標(biāo)儀（伯樂生命醫(yī)學(xué)產(chǎn)品有限公司）
[0031] 立式壓力蒸汽滅菌器（上海申安醫(yī)療器械廠）
[0032] 鼓風(fēng)干燥箱（上海躍進(jìn)醫(yī)療器械廠）
[0033] PH 計(jì)（SART0RIUS，德國(guó)）
[0034] 2)實(shí)驗(yàn)方法和過程
[0035] 大鼠腦膠質(zhì)瘤細(xì)胞株C6以4000/孔的密度鋪于96孔板，每孔IOOul，12h后使用。 各組分以DMSO溶解為lOOmg/mL儲(chǔ)存液，保存于-20°C待用。鋪板后12h，觀察細(xì)胞匯合率 約為40%，加藥，濃度均為100 μ g/mL，每個(gè)組分3個(gè)復(fù)孔。每板細(xì)胞設(shè)立二個(gè)對(duì)照組（培 養(yǎng)基+細(xì)胞；含〇. 1 % DMSO培養(yǎng)基+細(xì)胞），3個(gè)空白孔（只有培養(yǎng)基）。加入藥物24小 時(shí)后，加入20 μ 1四甲基偶氮唑鹽化學(xué)名為3-(4, 5-二甲基噻唑）-2, 5-二苯基四氮唑溴鹽 (3_(4, 5-dimethyl_2thiazolyl)-2, 5-diphenyl-tetrazolium bromide，ΜΤΤ)，繼續(xù)培養(yǎng) 4 小時(shí)。完全棄去上清液，加入100 μ I DMS0,混勻使MTT完全溶解，去氣泡。490nm測(cè)定OD 值。
[0036]
[0037] 3)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0038] 表 2
[0039]
[0041] 結(jié)果發(fā)現(xiàn)：
[0042] 本發(fā)明的最優(yōu)技術(shù)方案為：維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的310 2柱，先用氯仿洗脫，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比） 洗脫，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，得到高活性提取物，即為該抗腫瘤的 提取物。該活性部位從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其TLC分析表征如圖1。
[0043] 維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的3102柱，先用 氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿： 甲醇，100:100,體積比）洗脫，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，得到高活 性提取物，即為該抗腫瘤的提取物。該活性部位從未見文獻(xiàn)報(bào)道，其TLC分析表征如圖2。
[0044] 4、抗腫瘤有效提取物的提取方法研究
[0045] 1)提取溶劑的種類研究
[0046] 分別用甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑、乙醇水混合溶劑等有 機(jī)溶劑提取，并測(cè)試提取物對(duì)C6細(xì)胞的抗腫瘤活性，結(jié)果如下：
[0047]表 3
[0049] 研究結(jié)果表明：提取用有機(jī)溶劑可以為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水 混合溶劑、乙醇水混合溶劑。
[0050] 2)提取溶劑的用量研究
[0051] 分別用1、2、5、10、20、30、40、50倍（重量/體積比）有機(jī)溶劑提取，并測(cè)試提取物 對(duì)C6細(xì)胞的抗腫瘤活性，結(jié)果如下：
[0052] 表 4
[0055] 提取物提取用有機(jī)溶劑用量為藥材重量的2-50倍（重量/體積比）。
[0056] 3)干燥方法的研究
[0057] 分別用真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干燥法等方法，對(duì)得到 的抗腫瘤活性部位進(jìn)行干燥，以含水量、TLC、活性測(cè)試為指標(biāo)，發(fā)現(xiàn)真空干燥法、冷凍干燥 法、鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干燥法適用于對(duì)C6細(xì)胞抗腫瘤活性部位進(jìn)行干燥，其中，最 優(yōu)為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0058] 表 5
[0060] 因此，恰麻古抗腫瘤提取物的制備方法為：
[0061] 維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用 有機(jī)溶劑氯仿洗脫2-50倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比） 洗脫2-50倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。以上 條件最優(yōu)為先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫10倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇， 100:2,體積比）洗脫15倍柱體積。
[0062] 維吾爾藥恰麻古經(jīng)水提取，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，先用 氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫2-50倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混 合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫2-50倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng) 回收有機(jī)溶劑，干燥，即為該提取物。以上條件最優(yōu)為先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲 醇，100:30,體積比）洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體 積比）洗脫25倍柱體積。其中，
[0063] 1)提取物提取用有機(jī)溶劑可以為甲醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶 劑、乙醇水混合溶劑，最優(yōu)條件為甲醇和95%乙醇。提取物提取用有機(jī)溶劑用量為藥材重量 的2-50倍（重量/體積比）。
[0064] 2)提取物干燥方法可以為真空干燥法、冷凍干燥法、鼓風(fēng)干燥、離心干燥、旋蒸干 燥法等，最優(yōu)為真空干燥法、冷凍干燥法。
[0065] 5.恰麻古抗腫瘤有效提取物的抗腫瘤活性研究
[0066] 利用各種腫瘤細(xì)胞，如腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、肝 癌等惡性腫瘤細(xì)胞株，分別測(cè)試恰麻古抗腫瘤提取物的抗腫瘤活性，IC 5。結(jié)果如下：
[0067] 表 6
[0069] 因此，我們發(fā)現(xiàn)，恰麻古抗腫瘤提取物具備抗腫瘤活性，可望用于各種腫瘤如腦膠 質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌、肝癌等惡性腫瘤細(xì)胞株的預(yù)防及治療。
[0070] 6、恰麻古抗腫瘤有效提取物的組合物及其制備方法研究
[0071] 1)固體分散體 「007?1 階卞
[0074] 制備方法：
[0075] 稱取恰麻古提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比 分別放入燒杯中，加入無水乙醇，磁力攪拌器攪拌至恰麻古提取物和載體完全溶解，轉(zhuǎn)入旋 蒸儀中除去有機(jī)溶劑，干燥，粉碎過80目篩，即得恰麻古提取物PVP包合物。
[0076] 2)環(huán)糊精包合物
[0077] 處方：
[0079] 制備方法：
[0080] 將β -環(huán)糊精與1~5倍水研勻，加恰麻古提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有 機(jī)溶劑中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0081] 3)分散片處方：
[0082] 恰麻古提取物 1個(gè) 十·~烷基硫酸鉆 1 預(yù)膠化淀粉 10 可溶性淀粉 100 交聯(lián)聚維酮 ?α 微晶纖維素 10
[0083] 微分硅膠 0.3
[0084] 制備方法：
[0085] 1.恰麻古提取物淀粉分散體的制備，精密稱取恰麻古提取物提取物，加入適量的 十二烷基硫酸鈉，用70%的乙醇溶解加入等比例的可溶性淀粉混合均勻后，在70°C的溫度 下蒸干，粉碎，過100目篩；
[0086] 2.稱取處方量，恰麻古提取物淀粉分散體，交聯(lián)聚維酮，預(yù)膠化淀粉，用70 %乙 醇做濕潤(rùn)劑，邊加入邊攪拌，制成濕顆粒過14目篩，室溫下放置15min后，60°C烘箱烘干 45min，16目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
[0087] 7、恰麻古抗腫瘤有效提取物的檢測(cè)方法研究
[0088] 我們發(fā)現(xiàn)，可以用薄層色譜的方法，很好地檢測(cè)和標(biāo)示恰麻古抗腫瘤有效提取物 的特征。見圖1、圖2。
[0089] 具體條件為：色譜條件：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：氯仿：乙酸乙酯：甲醇=3:1:1， 顯色方法：香草醛濃硫酸顯色。
【附圖說明】：
[0090] 圖1恰麻古C6抑制活性提取物的TLC色譜圖；
[0091 ] 圖2恰麻古C6抑制活性提取物的TLC色譜圖；
[0092] 圖3恰麻古得到的化學(xué)組分的TLC色譜圖。
【具體實(shí)施方式】
[0093] 以下實(shí)施例表示本發(fā)明的實(shí)用性，本發(fā)明不受此限制。
[0094] 實(shí)施例1 :
[0095] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲 醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比）洗脫25倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，真空干燥，即為該提取物，收率0. 10%。
[0096] 實(shí)施例2 :
[0097] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲 醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比）洗脫25倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該提取物，收率0. 078%。
[0098] 實(shí)施例3 :
[0099] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL丙酮超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲 醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比）洗脫25倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，鼓風(fēng)干燥，即為該提取物，收率0. 063%。
[0100] 實(shí)施例4 :
[0101] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL氯仿超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分 離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲 醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比）洗脫25倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回 收有機(jī)溶劑，離心干燥，即為該提取物，收率0. 056%。
[0102] 實(shí)施例5 :
[0103] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙酸乙酯超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠 柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯仿洗脫20倍柱體積，繼用氯 仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2,體積比）洗脫25倍柱體積，氯仿：甲醇100:2洗脫 液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，旋蒸干燥，即為該提取物，收率0. 058%。
[0104] 實(shí)施例6 :
[0105] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇水混合溶劑（甲醇：水=1:1)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯 仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2，體積比）洗脫25倍柱體 積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該提取物，收率0. 087%。
[0106] 實(shí)施例7 :
[0107] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=1:1)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯 仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2，體積比）洗脫25倍柱體 積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，真空干燥，即為該提取物，收率0. 081 %。
[0108] 實(shí)施例8 :
[0109] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=90:10)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用有機(jī)溶劑氯 仿洗脫20倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:2，體積比）洗脫25倍柱體 積，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該提取物，收率0. 083%。
[0110] 實(shí)施例9:
[0111] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30， 體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫 30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，真空干燥，即為該提取物，收率 3. 1%〇
[0112] 實(shí)施例10 :
[0113] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30， 體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫 30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，冷凍干燥，即為該提取物，收率 2. 3%〇
[0114] 實(shí)施例11 :
[0115] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL丙酮超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30， 體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫 30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，鼓風(fēng)干燥，即為該提取物，收率 2. 1%〇
[0116] 實(shí)施例12 :
[0117] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL氯仿超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅膠柱 分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30， 體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫 30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，離心干燥，即為該提取物，收率 1. 5%〇
[0118] 實(shí)施例13 :
[0119] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙酸乙酯超聲提取15min，提取液濃縮后，用硅 膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇， 100:30,體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯仿：甲醇，100:100,體積 比）洗脫30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑，旋蒸干燥，即為該提取 物，收率1. 7%。
[0120] 實(shí)施例14:
[0121] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL甲醇水混合溶劑（甲醇：水=1:1)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇 混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯 仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑， 真空干燥，即為該提取物，收率2. 7%。
[0122] 實(shí)施例15 :
[0123] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=1:1)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇 混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯 仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑， 冷凍干燥，即為該提取物，收率2. 5%。
[0124] 實(shí)施例16 :
[0125] 取維吾爾藥恰麻古20g，經(jīng)100mL乙醇水混合溶劑（乙醇：水=90:10)超聲提取 15min，提取液濃縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱（2. Ocm內(nèi)徑小柱），先用氯仿：甲醇 混合溶劑（氯仿：甲醇，100:30,體積比）洗脫25倍柱體積，繼用氯仿：甲醇混合溶劑（氯 仿：甲醇，100:100,體積比）洗脫30倍柱體積，氯仿：甲醇100:100洗脫液經(jīng)回收有機(jī)溶劑， 真空干燥，即為該提取物，收率2. 9%。
[0126] 實(shí)施例17 :固體分散體
[0127] 稱取恰麻古提取物和載體聚乙烯吡咯烷酮（PVP)按比例、1:2、1:4、1:6的質(zhì)量比 分別放入燒杯中，加入無水乙醇，磁力攪拌器攪拌至恰麻古提取物和載體完全溶解，轉(zhuǎn)入旋 蒸儀中出去有機(jī)溶劑，干燥，粉碎過80目篩，即得恰麻古提取物PVP包合物。
[0128] 實(shí)施例18 :環(huán)糊精包合物
[0129] 將β -環(huán)糊精與1~5倍水研勻，加恰麻古提取物（水難溶性的應(yīng)先溶于少量有 機(jī)溶劑中）充分研磨至成糊狀物，低溫干燥即得。
[0130] 實(shí)施例19 :分散片
[0131] 1.稱取干燥的恰麻古提取物，加入適量的十二烷基硫酸鈉，使用70%的乙醇充分 溶解，加入水溶性淀粉與恰麻古提取物（1:1)，攪拌混合均勻，在70°C下干燥，粉碎，過100 目篩，得恰麻古提取物分散體。
[0132] 2.精密稱取處方量，恰麻古提取物分散體，交聯(lián)聚維酮，可壓性淀粉，用70 %乙醇 做濕潤(rùn)劑，邊加入邊攪拌，14目篩制成濕顆粒，室溫下放置15min后，70°C烘箱烘干45min， 16目篩整粒，加入滑石粉和微分硅膠，混合均勻后，壓片。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，維吾爾藥恰麻古經(jīng)有機(jī)溶劑提取，提取液濃 縮后，用硅膠柱分離，上樣后的硅膠柱，用體積比100 :0-100:1〇〇的氯仿：甲醇洗脫，洗脫液 經(jīng)干燥即得。2. 如權(quán)利要求1所述的維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，上樣后的硅膠柱，先用氯仿 溶劑洗脫，繼用體積比100:2的氯仿-甲醇混合溶劑洗脫，氯仿：甲醇100:2洗脫液經(jīng)回收 有機(jī)溶劑，干燥即為該提取物； 或上樣后的硅膠柱，先用體積比100:30的氯仿：甲醇混合溶劑洗脫，繼用體積比 100:100的氯仿：甲醇混合溶劑洗脫，氯仿：甲醇100:100洗脫液干燥后即得。3. 如權(quán)利要求1或2所述的維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，提取用有機(jī)溶劑為甲 醇、乙醇、丙酮、氯仿、乙酸乙酯、甲醇水混合溶劑或乙醇水混合溶劑，優(yōu)選甲醇或95%乙醇。4. 如權(quán)利要求1-3任何一項(xiàng)所述的一種維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，洗脫溶劑 的體積為2-50倍柱體積。5. 如權(quán)利要求2所述的一種維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，氯仿-甲醇為100 :0， 100 :2洗脫時(shí)，其洗脫體積分別為10倍柱體積和15倍柱體積。6. 如權(quán)利要求2所述的一種維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，氯仿-甲醇為100 :30， 100 :100洗脫時(shí)，其洗脫體積分別為20倍柱體積和25倍柱體積。7. -種藥物組合物，其特征在于，包含權(quán)利要求1-6任何一項(xiàng)所述的恰麻古提取物和 藥學(xué)上可接受的載體。8. -種藥物制劑，其特征在于，包含權(quán)利要求1-6任何一項(xiàng)所述的恰麻古提取物或權(quán) 利要求7所述的藥物組合物。9. 權(quán)利要求1-6任何一項(xiàng)所述的恰麻古提取物或權(quán)利要求7所述的組合物或權(quán)利要 求8所述的藥物制劑在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述的腫瘤為腦膠質(zhì)瘤、乳腺癌、肺癌、 胃癌、結(jié)腸癌、胰腺癌、宮頸癌或肝癌。10. 如權(quán)利要求1-6所述的一種維吾爾藥恰麻古提取物，其特征為，用TLC法檢測(cè)，其色 譜條件為：GF254硅膠板，展開系統(tǒng)：氯仿：乙酸乙酯：甲醇（3:1:1)顯色方法：香草醛-硫酸 顯色。
【文檔編號(hào)】A61P35/00GK105982939SQ201510080784
【公開日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年2月15日
【發(fā)明人】王金輝, 黃健, 逄小博
【申請(qǐng)人】沈陽藥科大學(xué)