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一種火焰南天竹快速繁殖培養(yǎng)基系列及組培方法與流程

文檔序號:12890859閱讀:1512來源:國知局
本發(fā)明涉及植物種苗生產(chǎn)方法,具體涉及一種火焰南天竹快速繁殖培養(yǎng)基系列及組培方法,屬于生物
技術(shù)領(lǐng)域

背景技術(shù)
:火焰南天竹為小檗科南天竹屬,植株自身矮小、莖節(jié)短,葉片呈橢圓或卵形。火焰南天竹是目前園林綠化樹種中最流行的彩葉樹種之一,極具經(jīng)濟(jì)和觀賞價值?;鹧婺咸熘癯S玫姆敝撤绞綖榉种攴敝澈颓げ宸敝?,這兩種繁殖方式存在繁殖速度慢、品種特性退化的缺陷。為了突破火焰南天竹繁殖的技術(shù)瓶頸,近年來人們開始尋求火焰南天竹的快速繁殖途徑,組織培養(yǎng)就是其中的一種途徑。目前國內(nèi)對于火焰南天竹的研究報道還較少,且大多存在培養(yǎng)周期長、生根率低等問題。本發(fā)明根據(jù)試管苗工廠化生產(chǎn)的特點,開展了火焰南天竹外植體消毒、不定芽誘導(dǎo)、生根培養(yǎng)三個方面的研究,明顯縮短培養(yǎng)周期,提高生根率,適用于火焰南天竹的組培工廠化生產(chǎn)。技術(shù)實現(xiàn)要素:為實現(xiàn)火焰南天竹的快速繁殖,本發(fā)明一方面提出了一種火焰南天竹快速繁殖培養(yǎng)基系列,其具體技術(shù)方案如下:一種火焰南天竹快速繁殖培養(yǎng)基系列,其特征在于,該培養(yǎng)基系列包括萌芽培養(yǎng)基、增殖培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基,所述培養(yǎng)基系列各組份成分含量分別為:萌芽培養(yǎng)基:ms+6-ba0-0.5mg/l+蔗糖20-40g/l+瓊脂5.5g/l;增殖培養(yǎng)基:ms+6-ba0.5-1.5mg/l+naa0.05-0.2mg/l+蔗糖20-40g/l+瓊脂5.5g/l;生根培養(yǎng)基:1/2ms+iba0.1-0.5mg/l+蔗糖10-30g/l+瓊脂5.5g/l。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),所述培養(yǎng)基系列各組份成分含量分別為:萌芽培養(yǎng)基:ms+6-ba0.1-0.3mg/l+蔗糖25-35g/l+瓊脂5.5g/l;增殖培養(yǎng)基:ms+6-ba0.8-1.2mg/l+naa0.05-0.15mg/l+蔗糖25-35g/l+瓊脂5.5g/l;生根培養(yǎng)基:1/2ms+iba0.15-0.3mg/l+蔗糖15-25g/l+瓊脂5.5g/l。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),所述培養(yǎng)基系列各組份成分含量分別為:萌芽培養(yǎng)基:ms+6-ba0.2mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/l;增殖培養(yǎng)基:ms+6-ba1.0mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/l;生根培養(yǎng)基:1/2ms+iba0.2mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂5.5g/l。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),所述6-ba為6-芐氨基腺嘌呤、所述naa為萘乙酸、所述iba為吲哚丁酸。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),所述萌芽培養(yǎng)基、所述增殖培養(yǎng)基及所述生根培養(yǎng)基的ph值均為5.8-6.0。作為本發(fā)明的進(jìn)一步改進(jìn),所述萌芽培養(yǎng)基、所述增殖培養(yǎng)基及所述生根培養(yǎng)基均為以瓊脂為支撐物的固體培養(yǎng)基。本發(fā)明另一方面提出了一種火焰南天竹快速繁殖培養(yǎng)方法,其具體技術(shù)方案如下:一種火焰南天竹快速繁殖組培方法,其特征在于,其包括如下步驟:外植體的獲取及滅菌處理:從火焰南天竹植株上取下無蟲病害的火焰南天竹莖尖,首先在75%的酒精浸泡30s,然后放入摩爾濃度為0.1%的升汞中浸泡8min;萌芽培養(yǎng):將滅菌處理后的火焰南天竹莖尖接種至已滅菌的萌芽培養(yǎng)基上,培養(yǎng)20-30天,獲得火焰南天竹組培苗,所述萌芽培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃;增殖培養(yǎng):將火焰南天竹組培苗去掉根須,接種至已滅菌的增殖培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25-35天,所述增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃;生根培養(yǎng):將火焰南天竹組培苗接種至生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)35-45天,所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明的有益效果在于:利用本發(fā)明的培養(yǎng)基系列進(jìn)行火焰南天竹種苗的培養(yǎng),具有培養(yǎng)周期短、增殖系數(shù)高、生根效果好、種苗抗性強等特點,由于采用組織培養(yǎng)的無性繁殖技術(shù),不但能夠保持母本的優(yōu)良性狀,而且能夠獲得優(yōu)質(zhì)種苗,所使用的培養(yǎng)基原料市場上較容易采購、培養(yǎng)基配制簡單。具體實施方式為使本發(fā)明的上述目的、特征和優(yōu)點、能夠更加明顯易懂,下面對本發(fā)明的較佳實施例進(jìn)行詳細(xì)闡述,從而對本發(fā)明的保護(hù)范圍做出更為清楚明確的界定。實施例1外植體的獲取及滅菌處理:從火焰南天竹植株上取下無蟲病害的火焰南天竹莖尖,首先在75%的酒精浸泡30s,然后放入摩爾濃度為0.1%的升汞中浸泡8min。萌芽培養(yǎng):將滅菌處理后的火焰南天竹莖尖接種至已滅菌的萌芽培養(yǎng)基上,培養(yǎng)20-30天,獲得火焰南天竹組培苗。所述萌芽培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述萌芽培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba0.2mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。增殖培養(yǎng):將火焰南天竹組培苗去掉根須,接種至已滅菌的增殖培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25-35天。所述增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述增殖培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba1.0mg/l+naa0.1mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。生根培養(yǎng):將高度1cm以上的火焰南天竹組培苗接種至生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)35-45天。所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述生根培養(yǎng)基的配方為:1/2ms+iba0.2mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。實施例2外植體的獲取及滅菌處理:從火焰南天竹植株上取下無蟲病害的火焰南天竹莖尖,首先在75%的酒精浸泡30s,然后放入摩爾濃度為0.1%的升汞中浸泡8min。萌芽培養(yǎng):將滅菌處理后的火焰南天竹莖尖接種至已滅菌的萌芽培養(yǎng)基上,培養(yǎng)20-30天,獲得火焰南天竹組培苗。所述萌芽培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述萌芽培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba0.5mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。增殖培養(yǎng):將火焰南天竹組培苗去掉根須,接種至已滅菌的增殖培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25-35天。所述增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述增殖培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba0.5mg/l+naa0.05mg/l+蔗糖20g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。生根培養(yǎng):將高度1cm以上的火焰南天竹組培苗接種至生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)35-45天。所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述生根培養(yǎng)基的配方為:1/2ms+iba0.1mg/l+蔗糖10g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。實施例3外植體的獲取及滅菌處理:從火焰南天竹植株上取下無蟲病害的火焰南天竹莖尖,首先在75%的酒精浸泡30s,然后放入摩爾濃度為0.1%的升汞中浸泡8min。萌芽培養(yǎng):將滅菌處理后的火焰南天竹莖尖接種至已滅菌的萌芽培養(yǎng)基上,培養(yǎng)20-30天,獲得火焰南天竹組培苗。所述萌芽培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述萌芽培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba0.5mg/l+蔗糖40g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。增殖培養(yǎng):將火焰南天竹組培苗去掉根須,接種至已滅菌的增殖培養(yǎng)基上,培養(yǎng)25-35天。所述增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述增殖培養(yǎng)基的配方為:ms+6-ba1.5mg/l+naa0.2mg/l+蔗糖40g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。生根培養(yǎng):將高度1cm以上的火焰南天竹組培苗接種至生根培養(yǎng)基上,培養(yǎng)35-45天。所述生根培養(yǎng)的培養(yǎng)環(huán)境為:光照強度1800-2000lx,光照時間14d/h,培養(yǎng)溫度為24-26℃。所述生根培養(yǎng)基的配方為:1/2ms+iba0.5mg/l+蔗糖30g/l+瓊脂5.5g/l,ph值為5.8-6.0。本發(fā)明的上述三個實施例中,所述6-ba為6-芐氨基腺嘌呤、所述naa為萘乙酸、所述iba為吲哚丁酸。(1)、增殖效果:本發(fā)明的上述3個實施例的增殖效果如表1所示:表1.不同激素配比的增殖培養(yǎng)的增殖效果編號基本培養(yǎng)基6-ba濃度naa濃度增殖效果實施例1ms1.0mg/l0.1mg/l平均增殖比例達(dá)到1:3.5實施例2ms0.5mg/l0.05mg/l平均增殖比例達(dá)到1:3.2實施例3ms1.5mg/l0.2mg/l平均增殖比例達(dá)到1:3.4(2)、生根效果:表2.不同配比的生根培養(yǎng)基的生根效果上文對本發(fā)明進(jìn)行了足夠詳細(xì)的具有一定特殊性的描述。所屬領(lǐng)域內(nèi)的普通技術(shù)人員應(yīng)該理解,實施例中的描述僅僅是示例性的,在不偏離本發(fā)明的真實精神和范圍的前提下做出所有改變都應(yīng)該屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍是由所述的權(quán)利要求書進(jìn)行限定的,而不是由實施例中的上述描述來限定的。當(dāng)前第1頁12
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