本發(fā)明涉及番茄育種技術(shù)領域，具體涉及一種番茄取種的方法。

背景技術(shù)：

傳統(tǒng)人工番茄取種是成熟番茄采收后的果實從中部橫切，擠出并刮凈種腔內(nèi)種子于容器內(nèi)。因為種子外面有一層果膠，擠出并刮凈種腔內(nèi)種子時，種子與果肉、果汁不可避免的粘在一起，形成帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物，同時這層果膠可抑制發(fā)芽，并使種子互相粘在一起，種子不易洗出，故未經(jīng)發(fā)酵的種子很難處理。番茄取種過程中發(fā)酵過程十分關鍵，尤其是人工取種過程中，通過發(fā)酵可去除種子外面的這層果膠。一般發(fā)酵方法：一是帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）經(jīng)過自然常溫下18～20h的發(fā)酵（秋冬季溫度低時發(fā)酵1d-2d），因發(fā)酵時間長導致采洗種時間長，用工量多，占用容器多、采種場地大（存放發(fā)酵的種子），且種子易色澤差、發(fā)芽率低，采種效率低。方法二是帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物中添加復合酶或5%鹽酸或5%果膠酶處理種子縮短發(fā)酵時間。方法三是將帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物連同品種編號牌一起放入尼龍種子袋中，將尼龍種子袋放于塑料袋中扎口，并放于30℃恒溫箱中保溫發(fā)酵。這三種方法適合制種生產(chǎn)單位批量生產(chǎn)種子。但一個科研單位每年有幾百個甚至上千個各種類型的番茄品種取種，每個品種根據(jù)生育期需采種3-4次，綜合起來需取種上千次甚至幾千次，品種多，樣本數(shù)量多少不一，且有的品種僅有1～2個果實，通過添加鹽酸、果膠酶、復合酶等不僅增加成本，而是鹽酸、果膠酶、復合酶用量相對少，每個樣本數(shù)量不等，計算稱取不易，大大增加了工作量?？蒲袉挝槐姸嗟钠贩N靠放于30℃恒溫箱中保溫發(fā)酵實際上也無可操作性。樣本少的品種靠自然發(fā)酵時，因取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物較少，再加上發(fā)酵時間長，混合物未等發(fā)酵好早已蒸發(fā)干，無法獲得優(yōu)質(zhì)種子?？蒲猩蠟闇p少采種次數(shù)，成熟度也不盡相同，單株采種時會把變色期、成熟期、完熟期的果實同時采收，若傳統(tǒng)自然發(fā)酵，發(fā)酵時間短變色期果實種子洗不出，發(fā)酵時間長完熟期果實種子易發(fā)芽。同時近年來，商業(yè)制種對種子飽滿度、色澤、發(fā)芽率等要求較嚴，為獲取良好的種子，果實采收后2d內(nèi)進行發(fā)酵脫籽，盡量縮短發(fā)酵時間，以免影響種子顏色和發(fā)芽率。種子清洗處理后立即進行干燥處理，盡量采用日光通風，嚴禁暴曬，含水量控制在8%～9%，種子呈黃色即可收。本發(fā)明的番茄取種方法，在不需要加溫、添加果膠酶、復合酶的前提下，能夠顯著縮短采取種時間，有效避免番茄采種期間種子發(fā)芽，無添加果膠酶、復合酶及加溫的成本，利用廢棄發(fā)酵液制取發(fā)酵母液，且發(fā)酵母液制取、添加方便，非常便于操作，特別適合科研單位多品種、多樣本的取種，同時也降低了制種單位的取種成本，提高種子質(zhì)量及取種效率。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

基于以上現(xiàn)狀，本發(fā)明的目的是提供一種番茄取種的方法，利用廢棄發(fā)酵液制取發(fā)酵母液，且發(fā)酵母液制取、添加方便，縮短取種時間，提高種子質(zhì)量及取種效率。為科研單位多品種、多樣本取種，制種單位的低成本取種提供了一種方便、快捷、低成本的方法，縮短了番茄取種時間，提高了種子質(zhì)量及取種效率。

本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

發(fā)酵母液的制備：所述番茄發(fā)酵母液的制備包括如下體積份及重量份的組分，番茄10～20kg、帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）2～4kg。取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）經(jīng)過自然常溫下18～20h的發(fā)酵后，用網(wǎng)紗過濾后取上清液做發(fā)酵母液。以后每次留取當天發(fā)酵后并經(jīng)過過濾的新鮮上清液做下次的發(fā)酵母液，所述發(fā)酵母液中嚴禁有任何殘留種子（保持種性純度）、不得摻混生水，每天制備發(fā)酵母液，保持發(fā)酵母液的新鮮，嚴禁使用長霉發(fā)臭的發(fā)酵母液。

取種發(fā)酵：待番茄果實紅熟時分別采摘掛牌標記，采收后的果實從中部橫切，擠出并刮凈種腔內(nèi)種子即帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）于容器內(nèi)。根據(jù)溫度（2017年5月15日-7月15日采種期間石家莊溫度：白天溫度為23～39℃，夜晚溫度為15～28℃）、天氣（陰天、晴天）、采洗種時間（上午、下午）、番茄的成熟度（變色期、成熟期、完熟期）等情況，加入體積份或重量份1/30～1/10發(fā)酵母液進行發(fā)酵。擱置4～12h（發(fā)酵時間：4～6h/7～12h）左右待種子發(fā)酵完全后，倒入紗網(wǎng)布中透洗干凈或放入離心式番茄種子分離器中進行漂洗分離，后置于網(wǎng)紗上晾曬或放在陰涼干燥處晾曬。

發(fā)酵母液的添加方法，包括如下體積份或重量份的組分：帶肉帶籽番茄湯汁種子混合物10～30份（kg）、發(fā)酵母液1份（kg）。

種子晾曬：種子量≦50g的番茄小品種，晾曬3～4h種皮發(fā)干發(fā)白后，裝紗袋掛起3～4天晾干即可。種子量≧50g的番茄大品種，置于網(wǎng)紗上晾曬24h后，裝紗袋掛起3～4天晾干即可。

進一步地，所述發(fā)酵溫度，白天溫度為25～38℃，夜晚溫度為15～28℃。

進一步地，所述番茄的成熟度指變色期、成熟期、完熟期的番茄。從果實的頂端開始由青轉(zhuǎn)黃，至變色面積達到果實表面積的3/4之前的時期為變色期。從3/4果實表面積變色至全部變成紅色或黃色的果實成熟時期為成熟期（堅熟期），是鮮食番茄的采收適期。果實已完全變色，肉質(zhì)逐漸變軟的果實成熟后期為晚熟期，是作為加工原料的采收期。變色期、成熟期、完熟期的種子均具有發(fā)芽率，變色期種子飽滿度差，完熟期種子易在果實內(nèi)或洗種發(fā)酵期發(fā)芽，降低成品種子的發(fā)芽率，以成熟期采收的種子最佳。

優(yōu)選地，所述番茄為成熟期番茄。

利用所述番茄取種的方法，包括以下步驟：

（1）果實采收

一般在番茄雜交制種人工授粉后或高代材料番茄自交授粉后40～50d，待果實完全紅熟后采收。注意:①在采收前，當果實開始紅熟時，檢查留種田內(nèi)是否存在雜株，若有雜株須拔除。②若為雜交制種，檢查雜交標記，在采果時查看每一采收的果實是否缺少2個萼片和果柄處綁繩（雜交標記），落地的果實不能按雜交果采收。③若為自交授粉番茄，選取整齊一致、成熟期的果實。④番茄果實紅熟時分別采摘掛牌標記。

（2）發(fā)酵母液的制備

所述番茄發(fā)酵母液的制備包括如下體積份及重量份的組分，番茄10～20kg、帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）2～4kg。取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）經(jīng)過自然常溫下18～20h的發(fā)酵后，用網(wǎng)紗過濾后取上清液做發(fā)酵母液（首次）。以后每次留取當天發(fā)酵后并經(jīng)過過濾的新鮮上清液做下次的發(fā)酵母液，所述發(fā)酵母液中嚴禁有任何殘留種子（保持純度）、不得摻混生水，每天制備發(fā)酵母液，保持發(fā)酵母液的新鮮，嚴禁使用長霉發(fā)臭的發(fā)酵母液。

（3）取種發(fā)酵

采收后的果實從中部橫切，擠出并刮凈種腔內(nèi)種子即帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）于容器內(nèi)。根據(jù)溫度（2017年5月15日-7月15日采種期間石家莊溫度：白天溫度為23～39℃，夜晚溫度為15～28℃）、天氣（陰天、晴天）、采洗種時間（上午、下午）、番茄的成熟度（變色期、成熟期、完熟期）等情況，加入體積份及重量份1/30～1/10發(fā)酵母液進行發(fā)酵。

（4）發(fā)酵時間

擱置4～12h（發(fā)酵時間：4～6h/7～12h）左右，種子發(fā)酵完全，即發(fā)現(xiàn)漿液表面有白色菌膜將漿液覆蓋，上面又沒有帶色的菌落，則發(fā)酵已好。如果白色菌膜上出現(xiàn)了紅、綠、黑菌落時，則發(fā)酵液受細菌感染，多為發(fā)酵時間過長所致。

（5）注意防水

在發(fā)酵時一定注意要干凈無水，發(fā)酵期間嚴防雨水進入，因為在發(fā)酵過程中，有水進入，易使種子發(fā)芽，而且種子顏色也不好。

（6）清洗晾曬

用木棍攪動發(fā)酵液，種子自然下沉，去掉上部污物，用水沖洗、漂除秕子。種子清洗處理后立即進行干燥處理，盡量采用日光通風，嚴禁暴曬，撈出種子，倒入紗網(wǎng)布中透洗干凈或放入離心式番茄種子分離器中進行漂洗分離，后置于小眼篩網(wǎng)上晾曬或放在陰涼干燥處晾曬。種子量≦50g的番茄小品種，晾曬3～4h種皮發(fā)干發(fā)白后，裝紗袋掛起3～4天晾干即可。種子量≧50g的番茄大品種，置于網(wǎng)紗上晾曬24h后，裝紗袋掛起3～4天晾干即可，嚴禁暴曬。種子表面水分要在當天曬干，如遇陰天，可用電風扇吹干，水分低于8%即可入庫。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下優(yōu)點：

本發(fā)明的番茄取種方法利用廢棄發(fā)酵液即時制作發(fā)酵母液，在取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）發(fā)酵過程中添加體積份或重量份1/30～1/10無成本的新鮮發(fā)酵母液進行4～12h發(fā)酵。添加方法方便實用（較添加復合酶或5%鹽酸或5%果膠酶），方便量取和添加，可操作性強（較放于30℃恒溫箱中保溫發(fā)酵），適應性廣（適用于變色期、成熟期、完熟期各時期的番茄果實取種），縮短了番茄取種的發(fā)酵時間（較自然發(fā)酵縮短了8-14h），提高了發(fā)酵速度（效率提高了40%-78%），特別適合科研單位多品種、多樣本的取種，同時也降低了制種單位的取種成本（占用容器少、空間小、周轉(zhuǎn)快），節(jié)儉環(huán)保（較添加酶及鹽酸），提高了種子質(zhì)量（發(fā)芽率、色澤）及取種效率。

本發(fā)明的番茄取種方法一是通過利用廢棄發(fā)酵液即時制作發(fā)酵母液，環(huán)保無成本，方便快捷。二是添加一定量的體積份或重量份，且根據(jù)洗種時間（上午、下午），天氣（陰天、晴天）、溫度（高、低）等具體情況決定添加量的大小，操作方便（直接容器稱量），便于科研單位多品種、多樣本、任意數(shù)量（多、少）番茄品種取種，即避免了添加鹽酸、果膠酶、復合酶增加成本，又避免添加物用量相對少，每個樣本數(shù)量不等，計算稱取不易，增加工作量，樣本少的品種靠自然發(fā)酵時，因取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物較少，再加上發(fā)酵時間長，混合物未等發(fā)酵好早已蒸發(fā)干，無法獲得優(yōu)質(zhì)種子。三是可操作性強，解決了科研單位眾多的品種保溫發(fā)酵實際上也無可操作性的難題。四是適應性廣，適應科研上為減少采種次數(shù)，單株采種時會把變色期、成熟期、完熟期的果實同時采收，若傳統(tǒng)自然發(fā)酵，發(fā)酵時間短變色期果實種子洗不出，發(fā)酵時間長完熟期果實種子易發(fā)芽。同時適應商業(yè)制種對種子飽滿度、色澤、發(fā)芽率等的嚴格要求，盡量縮短發(fā)酵時間，保證種子顏色和發(fā)芽率。本發(fā)明的番茄取種方法，在不需要加溫、添加果膠酶、復合酶的前提下，能夠顯著縮短采取種時間，有效避免番茄采種期間種子發(fā)芽，無添加果膠酶、復合酶及加溫的成本，利用廢棄發(fā)酵液制取發(fā)酵母液，且發(fā)酵母液制取、添加方便，非常便于操作，特別適合科研單位多品種、多樣本、不同數(shù)量的取種，同時也降低了制種單位的取種成本，提高種子質(zhì)量及取種效率。經(jīng)試驗，采用本發(fā)明的番茄取種方法較自然發(fā)酵時間縮短了8-14h，提高了發(fā)酵效率40%-78%。

具體實施方式

以下實施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的保護范圍。

2017年5月15日-7月15日采種期間石家莊溫度：白天氣溫為23～39℃，夜晚氣溫為15～28℃，所有實施例及實驗例均在此溫度范圍內(nèi)進行。

實施例1（大果粉果雜交制種成熟期番茄）

2017年6月5日，白天最高溫25℃、夜晚最低溫16℃，小雨。2017年6月6日，白天最高溫23℃、夜晚最低溫17℃，多云。這兩天為2017年5月15日-7月15日采種期間的最低溫度，河北省石家莊市在河北省農(nóng)林科學院經(jīng)濟作物研究所某一番茄采種室進行試驗。

一種番茄取種方法，包括如下重量份發(fā)酵母液的制備，成熟期番茄10kg、取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）2kg。取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）經(jīng)過自然常溫下20h的發(fā)酵后，用網(wǎng)紗過濾后取上清液做發(fā)酵母液。

取大果粉果雜交制種成熟期番茄15kg，取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物3kg，添加發(fā)酵母液0.3kg，發(fā)酵時間12h。

將本實施例發(fā)酵母液用于番茄取種，步驟如下：

（1）2017年6月5日中午12點制備發(fā)酵母液，2017年6月6日上午8點發(fā)酵母液制備完成；

（2）2017年6月6日上午8點開始，取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物3kg，添加發(fā)酵母液0.3kg，2017年6月6日晚20點發(fā)酵完成，發(fā)酵時間12h；

（3）2017年6月6日晚20點，發(fā)酵好的混合液倒入紗網(wǎng)布中透洗干凈，漂洗分離后的干凈種子，置于小眼篩網(wǎng)上晾曬。

實驗例2（大果高代材料變色期、成熟期、完熟期混合采種果實番茄）

2017年7月8日，白天最高溫39℃、夜晚最低溫28℃，晴～多云。2017年7月9日，白天最高溫37℃、夜晚最低溫26℃，多云～晴。這兩天為2017年5月15日-7月15日采種期間的最高溫度，在河北省農(nóng)林科學院經(jīng)濟作物研究所某一番茄采種室進行試驗。將該取種番茄分為試驗組（實施例3和4）、對照兩部分。

一種番茄取種方法，包括如下重量份發(fā)酵母液的制備，成熟期番茄10kg、取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）2kg。取出的帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物（帶有胎座膠狀物質(zhì)的種子）經(jīng)過自然常溫下18h的發(fā)酵后，用網(wǎng)紗過濾后取上清液做發(fā)酵母液。

分別取大果高代材料變色期、成熟期、完熟期三種時期混合采種果實番茄各10kg，分別取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物，在混合物中添加體積份及重量份1/30～1/10發(fā)酵母液進行發(fā)酵，發(fā)酵時間4-12h。

將本實驗例發(fā)酵母液用于番茄取種，步驟如下：

（1）2017年7月8日下午2點制備發(fā)酵母液，2017年7月9日上午8點發(fā)酵母液制備完成；

（2）2017年7月9日上午8點開始，取出帶肉帶籽及胎座膠狀物質(zhì)混合物，添加發(fā)酵母液體積份及重量份1/30～1/10，2017年7月9日12-20點發(fā)酵完成，發(fā)酵時間4-12h；

（3）2017年7月9日，發(fā)酵好的混合液倒入紗網(wǎng)布中透洗干凈，漂洗分離后的干凈種子，置于小眼篩網(wǎng)上晾曬。

實施例3～4及對比例1～3

發(fā)酵母液添加數(shù)量及發(fā)酵時間見下表，其余管理與實施例1相同。

表1實施例3～4及對比例1～3發(fā)酵母液添加數(shù)量及發(fā)酵時間

。

由上表可見，本發(fā)明選擇了各組分最適配比范圍，在此范圍之外的組分配比的取種效果均不理想。

除在實施例中特指外，實施同樣的取種方法，不同之處在于：試驗組采用實施例1的方法，對照在實施例1的基礎上不添加發(fā)酵母液；統(tǒng)計兩組發(fā)酵時間、發(fā)酵效率，試驗組比對照分別發(fā)酵時間縮短了8-14h，發(fā)酵效率提高了40%-78%。

以上所述為本發(fā)明最佳實施方式的舉例，其中未詳細述及的部分均為本領域普通技術(shù)人員的公知常識。本發(fā)明的保護范圍以權(quán)利要求的內(nèi)容為準，任何基于本發(fā)明的技術(shù)啟示而進行的等效變換，也在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。