本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)
技術(shù)領(lǐng)域：
，具體涉及一種杜梨組培苗生根培養(yǎng)基，還涉及一種杜梨組培苗生根方法。
背景技術(shù)：
：梨為薔薇科(rosaceae)，梨亞科(pomoideae)之梨屬(pyrusl.)植物。梨是一種重要的果樹，在我國水果產(chǎn)量中，僅次于蘋果、柑橘，居第三位。梨在生產(chǎn)中均采用嫁接繁殖，砧木是果樹嫁接的重要基礎(chǔ)，與果樹的生產(chǎn)密切相關(guān)。優(yōu)良砧木的篩選對于調(diào)節(jié)樹勢，延長結(jié)果年限，甚至調(diào)節(jié)果實(shí)品質(zhì)等方面具有非常重要的意義。杜梨(pyrusbetulaefoliabunge.)是梨樹砧木中綜合抗性最強(qiáng)的砧木，在梨樹生產(chǎn)研究中起著重要的作用。由于其適生性強(qiáng)，耐旱，根深、發(fā)達(dá)、耐瘠薄，抗鹽堿能力強(qiáng)，在中性土及鹽堿土中均能正常生長，且與我國現(xiàn)有大面積種植的白梨、砂梨、秋子梨等系統(tǒng)品種具有親和力，為我國梨樹砧木最佳選擇，生產(chǎn)中廣泛應(yīng)用。與其他木本果樹一樣，杜梨具有童期較長、田間繁殖耗用較大人力和時(shí)間、占用較多土地等特點(diǎn)，使其在常規(guī)育種中受限。目前，杜梨繁殖以實(shí)生播種為主，由于實(shí)生苗具有不同基因型，繁育的苗木生長勢、抗病性、親和力等方面均存在較大差異。此外，生產(chǎn)中已發(fā)現(xiàn)嫁接于不同砧木上接穗的生長勢、抗病性、果實(shí)品質(zhì)等也存在較大的差異。因而，生產(chǎn)中有必要選擇基因型一致砧木用于苗木快繁。對砧木進(jìn)行無性繁殖，可以獲得基因型一致的苗木，通常采用壓條、扦插、組織培養(yǎng)等方式進(jìn)行無性繁殖。其中，組織培養(yǎng)由于不受季節(jié)、環(huán)境等因素的影響，占場地面積以及人工較少而被認(rèn)為是性價(jià)比以及效率最高的快繁方式。然而，木本植物組培快繁普遍存在生根困難、移栽成活率低等問題，影響了組培快繁技術(shù)的生產(chǎn)實(shí)際應(yīng)用。為解決試管苗生根，目前常用方法有以下幾種：一是篩選合適生根培養(yǎng)基，在生根培養(yǎng)基上直接培養(yǎng)。二是瓶外生根，先將試管苗的莖段進(jìn)行激素處理后，轉(zhuǎn)到蛭石、珍珠巖、泥炭、苔蘚等基質(zhì)中來完成瓶外生根過程。三是瓶內(nèi)二次轉(zhuǎn)接生根，先將試管苗的莖段激素處理后，再轉(zhuǎn)到空白培養(yǎng)基上誘導(dǎo)生根。這些方法在不同植物上都有成功的報(bào)道，但是不同植物采用的培養(yǎng)基配方以及培養(yǎng)方式存在極大差異，這對杜梨砧木的研究利用等方面造成了不便。此外，這些常用方法僅僅集中于培養(yǎng)基的配方以及外源生長調(diào)節(jié)劑的濃度及配比，并未對外植體的選擇考慮在內(nèi)，而事實(shí)上，植物體內(nèi)源激素對外植體的生根也具有相當(dāng)大的影響，因?yàn)樯L素對植物的作用具有正負(fù)兩重性，即在低濃度促進(jìn)生長，而超過最適濃度則抑制生長。植物的不同器官對其反應(yīng)不同，一般敏感性為根＞芽＞莖，也就是說，組培苗外植體生根不僅僅取決于外源生長調(diào)節(jié)劑的控制，而是在內(nèi)源以及外源生長素的共同調(diào)節(jié)下完成的，尤其是組培苗不定根的形成。其次，植物體分泌生長素的部位是幼芽幼葉和發(fā)育中的種子，不同外植體的選取，也在一定程度上影響著植物體內(nèi)內(nèi)源激素的含量，因此，結(jié)合外植體取材方式以及外源生長素的配比探索出便捷高效的杜梨組培苗生根的培養(yǎng)基配方具有重要的實(shí)際意義。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種杜梨組培苗生根培養(yǎng)基，該生根培養(yǎng)基能夠提高生根效率、縮短生根周期、節(jié)約成本、操作簡便。本發(fā)明還要解決的技術(shù)問題是提供一種高效、簡易的杜梨組培苗生根方法，該方法可提高杜梨組培苗生根率和移栽成活率，適用于杜梨組培快繁。為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：一種杜梨組培苗生根培養(yǎng)基，包括：無機(jī)鹽減半的ms培養(yǎng)基+0.25～0.5mg/l3-吲哚丁酸+6～9g/l瓊脂+0.3～0.5g/l活性炭+15～30g/l蔗糖。其中，所述無機(jī)鹽減半的ms培養(yǎng)基的組分和其在杜梨組培苗生根培養(yǎng)基中的濃度如下：0.95g/l硝酸鉀、0.825g/l硝酸銨、0.185g/l七水硫酸鎂、0.085g/l磷酸二氫鉀、0.166g/l無水氯化鈣、16.9mg/l一水硫酸錳、8.6mg/l七水硫酸鋅、6.2mg/l硼酸、0.83mg/l碘化鉀、0.25mg/l二水錳酸鈉、0.025mg/l五水硫酸銅、0.025mg/l六水氯化鈷、37.3mg/l乙二胺四乙酸二鈉、34.55mg/l七水硫酸亞鐵、100mg/l肌醇、2mg/l甘氨酸、0.5mg/l煙酸、0.5mg/l鹽酸吡哆醇、0.1mg/l鹽酸硫胺素。本發(fā)明使用無機(jī)鹽減半的ms培養(yǎng)基可使杜梨組培苗發(fā)根快，生根率高，根系發(fā)達(dá)，根多而粗壯，同時(shí)節(jié)約成本。其中，所述生根培養(yǎng)基，3-吲哚丁酸(iba)的濃度為0.25mg/l。當(dāng)生長素iba的濃度為0.25mg/l時(shí)，杜梨組培苗生根效率最高，并且成本用量較低。其中，所述生根培養(yǎng)基，活性炭的濃度為0.3g/l。添加活性炭有利于提供生根所需的暗環(huán)境，免去刻意給予暗培養(yǎng)環(huán)境環(huán)節(jié)，促進(jìn)生根，縮短生根周期；還對防止外植體褐化有一定的作用。其中，所述生根培養(yǎng)基，瓊脂的濃度為7～8g/l，優(yōu)選7g/l。瓊脂在離體生根中用來充當(dāng)支持物，其生理作用表現(xiàn)較弱，但其濃度的高低通過影響培養(yǎng)基的水勢和硬度進(jìn)而影響組培苗的生根。其中，所述生根培養(yǎng)基，蔗糖的濃度為15～25g/l，優(yōu)選20g/l。蔗糖作為能源和滲透壓物質(zhì)，不同的蔗糖濃度影響根系的發(fā)育。其中，所述生根培養(yǎng)基，溶劑為煮沸后的自來水。從實(shí)際操作角度來說，用煮沸的自來水作為溶劑配制杜梨生根培養(yǎng)基，不但減少了成本而且簡化了實(shí)際操作過程，提高了實(shí)際生產(chǎn)上效率。優(yōu)選的，所述生根培養(yǎng)基包括：無機(jī)鹽減半的ms培養(yǎng)基+0.25mg/l3-吲哚丁酸+7g/l瓊脂+0.3g/l活性炭+20g/l蔗糖，溶劑為煮沸后的自來水。其中，所述生根培養(yǎng)基與生長健壯的切成1～2.5cm莖段的僅保留1～2片幼葉以及一芽的杜梨組培苗結(jié)合用于杜梨組培苗生根。一種基于杜梨組培苗生根培養(yǎng)基的杜梨組培苗生根方法，該方法包括如下步驟：選擇生長健壯的杜梨組培苗，切成1～2.5cm莖段，放入所述的生根培養(yǎng)基進(jìn)行生根培養(yǎng)，得到杜梨生根苗。其中，所述杜梨組培苗為繼代培養(yǎng)30～50天后得到的組培苗，優(yōu)選為繼代培養(yǎng)40天后得到的組培苗。繼代培養(yǎng)30天左右組培苗長勢是最為良好的，超過50天，培養(yǎng)基養(yǎng)分大部分會(huì)被消耗掉，培養(yǎng)基會(huì)干涸，減少，對組培苗不利。其中，所述莖段僅保留1～2片幼葉以及一芽。優(yōu)選地，將所述杜梨組培苗切成1.5～2.5cm莖段，僅保留一片幼葉以及一芽。外植體的類型對杜梨組培苗的生根效率有很大的影響。由于新生葉片及芽的數(shù)量影響著外植體內(nèi)源激素的含量，因此，外植體的選取應(yīng)結(jié)合培養(yǎng)基激素含量的水平。當(dāng)外植體僅保留1～2片幼葉以及一芽時(shí)，組培苗主枝清晰，根系發(fā)達(dá)。當(dāng)外植體為多葉多芽時(shí)，組培苗叢生嚴(yán)重，發(fā)根率較低。其中，所述生根培養(yǎng)，培養(yǎng)條件為：白天溫度為25±2℃，夜間溫度為20±2℃，光照強(qiáng)度為50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h。本發(fā)明還提供與上述杜梨組培苗生根方法配合使用的煉苗和移栽方法，包括如下步驟：向生根的杜梨組培苗中加水，敞口煉苗2～3天；取出組培苗，洗凈培養(yǎng)基，每株留葉2～3片，移入滅菌后的基質(zhì)中，持水量為60％；白天溫度為25±2℃，夜間溫度為20±2℃；避免強(qiáng)光直射，陰暗角落培養(yǎng)一周；隨后光照強(qiáng)度為50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h，繼續(xù)練苗20天，期間澆灌1/8無機(jī)鹽ms液體培養(yǎng)基，用煮沸后的自來水配制；然后移栽定植。其中，所述基質(zhì)為珍珠巖∶蛭石∶草炭體積比為1∶1∶3的基質(zhì)。有益效果：(1)ms培養(yǎng)基無機(jī)鹽用量減半，提高生根效率的同時(shí)節(jié)約成本。(2)現(xiàn)有杜梨組培苗生根技術(shù)經(jīng)暗培養(yǎng)和光培養(yǎng)兩個(gè)步驟，耗時(shí)長、操作復(fù)雜，而本發(fā)明添加活性炭，提供生根所需的暗環(huán)境，免去刻意給予暗培養(yǎng)環(huán)境環(huán)節(jié)，促進(jìn)生根，縮短生根周期，操作簡便、成本低。(3)打破了杜梨生根培養(yǎng)基的常規(guī)采用多種生長調(diào)節(jié)劑并用的方法，僅單一使用3-吲哚乙酸，并且優(yōu)化的選擇了最佳植物生長調(diào)節(jié)劑濃度，3-吲哚乙酸含量微量，使得操作簡便、成本降低。(4)無需刻意調(diào)試酸堿度，或特殊水源，僅日常自來水煮沸后即可使用，在未影響生根率的同時(shí)，簡化操作過程，降低成本。(5)篩選最佳生根外植體，優(yōu)化生根體系。(6)本發(fā)明較常規(guī)方法處理，大幅提高了杜梨組培苗生根率和移栽成活率，縮短生根周期。本發(fā)明的杜梨組培苗生根率可達(dá)75.7％，平均根數(shù)3.01條，平均根長3.0厘米。植株葉形及葉色正常，后續(xù)移栽成活率高，生根組培苗的移栽率可達(dá)95％。綜上所述，本發(fā)明的方法較常規(guī)方法生根率和移栽成活率高，繁殖效率高，操作簡便，成本低，便于推廣，遺傳穩(wěn)定性好，適用于杜梨組培快繁。附圖說明圖1為杜梨生根苗移植定栽后的照片；圖2為實(shí)施例2中杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片(a、處理1；b、處理2)；圖3為實(shí)施例4中杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片(a、處理1；b、處理2)；圖4為實(shí)施例5中杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片(a、處理1；b、處理2)；圖5為實(shí)施例6中杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片(a、一葉一芽外植體；b、多葉多芽外植體；c、處理1；d、處理2)。具體實(shí)施方式根據(jù)下述實(shí)施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領(lǐng)域的技術(shù)人員容易理解，實(shí)施例所描述的內(nèi)容僅用于說明本發(fā)明，而不應(yīng)當(dāng)也不會(huì)限制權(quán)利要求書中所詳細(xì)描述的本發(fā)明。實(shí)施例1：杜梨組培苗的生根(1)培養(yǎng)基組分ms基本培養(yǎng)基(無機(jī)鹽，微量元素，鐵鹽，有機(jī)元素)：無機(jī)鹽：硝酸鉀38g/l；硝酸銨33g/l；七水硫酸鎂7.4g/l；磷酸二氫鉀3.4g/l；無水氯化鈣6.64g/l；微量元素：一水硫酸錳16.9g/l；七水硫酸鋅8.6g/l；硼酸6.2g/l；碘化鉀0.83g/l；二水錳酸鈉0.25g/l；五水硫酸銅0.025g/l；六水氯化鈷0.025g/l；鐵鹽：乙二胺四乙酸二鈉7.46g/l；七水硫酸亞鐵6.91g/l；有機(jī)元素：肌醇20g/l；甘氨酸0.4g/l；煙酸0.1g/l；鹽酸吡哆醇0.1g/l；鹽酸硫胺素0.02g/l；3-吲哚丁酸(iba)：1mg/ml活性炭；瓊脂；蔗糖。(2)配備1l生根培養(yǎng)基所需各組分的數(shù)量：25mlms無機(jī)鹽+1mlms微量元素+5mlms鐵鹽+5mlms有機(jī)元素+0.3～0.5g活性炭+6～9g瓊脂+15～30g蔗糖+0.25～0.5mliba。(3)外植體的選?。涸诶^代培養(yǎng)40天的杜梨組培苗中，選生長健壯、杜梨組培苗作為試材，切成1～2.5cm的莖段，除去多余葉片，保留1-2片幼葉以及一芽，將莖段條接種到上述生根培養(yǎng)基上。(4)培養(yǎng)條件每顆植株培養(yǎng)基用量為30ml；白天溫度為25±2℃，夜間溫度為20±2℃；光照強(qiáng)度為50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h。(5)移栽定植待40天左右生根后(生根率可達(dá)75％)，向生根的試管植株三角瓶中加水5～10ml，敞口煉苗2～3天，取出組培苗，洗凈培養(yǎng)基，每株留葉2～3片，移入滅菌后的基質(zhì)中(珍珠巖∶蛭石∶草炭土1∶1∶3)，持水量為60％；白天溫度為25±2℃，夜間溫度為20±2℃；避免強(qiáng)光直射陰暗角落培養(yǎng)一周；隨后光照強(qiáng)度為50～60μmol·m-2·s-1，每天光照12～14h，繼續(xù)練苗20天，期間澆灌1/8無機(jī)鹽ms液體培養(yǎng)基，仍用煮沸后的自來水配制；然后移栽定植，成活率可達(dá)95％以上。杜梨生根苗移植定栽后的照片見圖1。實(shí)施例2：ms無機(jī)鹽對杜梨組培苗生根效果的影響本實(shí)施例基于ms增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的苗齡40天的生長健壯的叢生苗，剪取1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，保留頂部一片葉片和一個(gè)葉芽。生根培養(yǎng)基配方如下：處理1：ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba處理2∶1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba試驗(yàn)方法：將備用試管苗莖段分成兩組，分別在上述兩種不同ms無機(jī)鹽含量的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行平行試驗(yàn)，具體是：試管苗莖段接種到培養(yǎng)基中后，觀察培養(yǎng)，40天后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，見表1。杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片見圖2(a、處理1；b、處理2)。表1處理方式ms無機(jī)鹽生根率(％)平均生根條數(shù)(條)平均根長(厘米)1ms40.21.951.5621/2ms75.73.013.10由表1、圖2可見，在觀察期內(nèi)，雖然兩種處理?xiàng)l件下，杜梨組培苗都可以發(fā)根，但是無機(jī)鹽含量低(ms大量元素減半)可使杜梨組培苗發(fā)根快，生根率高，根系發(fā)達(dá)，且根多而粗壯。在培養(yǎng)基1/2ms上培養(yǎng)生根比在培養(yǎng)基ms上培養(yǎng)生根的生根率提高了88.5％，平均生根條數(shù)增加了54.4％，平均根長增加了98.7％，并且成本降低。實(shí)施例3：生長素iba濃度的篩選實(shí)驗(yàn)本實(shí)施例基于ms增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的苗齡40天的生長健壯的叢生苗，剪取1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，保留頂部一片葉片和一個(gè)葉芽。培養(yǎng)基配方如下：處理1：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.2mg/liba處理2：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba處理3：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.3mg/liba處理4：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.4mg/liba處理5：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.5mg/liba處理6：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+1.0mg/liba試驗(yàn)方法：將備用試管苗莖段分成六組，分別在1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖并附加不同濃度的iba的生根培養(yǎng)基中進(jìn)行平行試驗(yàn)，具體是：試管苗莖段接種到培養(yǎng)基中后，觀察培養(yǎng)，40天后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，見表2。表2由表2可見，當(dāng)生長素iba的濃度為0.25～0.5mg/l時(shí)，杜梨組培苗生根率可達(dá)68.1％以上，平均生根條數(shù)可達(dá)2.75厘米以上，平均根長可達(dá)2.88厘米以上。當(dāng)生長素iba的濃度為0.25mg/l時(shí)，杜梨組培苗生根效率最高，可達(dá)75.7％，平均生根條數(shù)3.01條，平均根長可達(dá)3.10厘米，并且成本用量較低。從表2明顯能夠看出，當(dāng)生長素iba的濃度不在范圍內(nèi)時(shí)杜梨組培苗生根率、平均生根條數(shù)、平均根長明顯不如處理方式2～6。實(shí)施例4：培養(yǎng)基溶劑酸堿度對杜梨組培苗生根效果的影響本實(shí)施例基于ms增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的苗齡40天的生長健壯的叢生苗，剪取1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，保留頂部一片葉片和一個(gè)葉芽。培養(yǎng)基配方如下：處理1：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba。用蒸餾水溶解，酸堿度調(diào)節(jié)至5.8，定容。處理2：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba。用煮沸后的自來水溶解，定容。試驗(yàn)方法：將備用試管苗莖段分成兩組，分別用蒸餾水調(diào)ph值至5.8與煮沸后的自來水為溶劑配制生根培養(yǎng)基進(jìn)行平行試驗(yàn)，具體是：試管苗莖段接種到培養(yǎng)基中后，觀察培養(yǎng)，40天后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，見表3。杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片見圖3(a、處理1；b、處理2)。表3處理方式培養(yǎng)基溶劑酸堿度生根率平均生根條數(shù)(條)平均根長(厘米)1蒸餾水調(diào)ph值至5.875.33.103.02煮沸后的自來水75.73.113.1由表3、圖3可見，分別用蒸餾水調(diào)ph值至5.8與煮沸后的自來水為溶劑配制生根培養(yǎng)基，杜梨組培苗的生根效率差別不大。但從實(shí)際操作角度來說，用煮沸的自來水作為溶劑配制杜梨生根培養(yǎng)基，不但減少了成本而且簡化了實(shí)際操作過程，提高了實(shí)際生產(chǎn)上效率。實(shí)施例5：活性炭對杜梨組培苗生根效果的影響本實(shí)施例基于ms增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的苗齡40天的生長健壯的叢生苗，剪取1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，保留頂部一片葉片和一個(gè)葉芽。處理1：1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba處理2：1/2ms+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba試驗(yàn)方法：將備用試管苗莖段分成兩組，分別在上述兩種不同生根培養(yǎng)基中進(jìn)行平行試驗(yàn)，具體是：試管苗莖段接種到培養(yǎng)基中后，觀察培養(yǎng)，40天后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，見表4。杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片見圖4(a、處理1；b、處理2)。表4處理方式活性炭生根率(％)平均生根條數(shù)(條)平均根長(厘米)1加活性炭75.73.013.12不加活性炭64.62.502.0由表4、圖4可見，使用添加活性炭的培養(yǎng)基，杜梨組培苗的生根效率以及生根條數(shù)和根長等三個(gè)方面均高于不添加活性炭的培養(yǎng)基。添加活性炭有利于提供生根所需的暗環(huán)境，促進(jìn)生根。除此之外，添加活性炭對防止外植體褐化有一定的作用。實(shí)施例6：外植體類型對杜梨組培苗生根效果的影響本實(shí)施例基于ms增殖培養(yǎng)基培養(yǎng)的苗齡40天的生長健壯的叢生苗莖段，接種培養(yǎng)基為1/2ms+0.3g/l活性炭+7g/l瓊脂粉+20g/l蔗糖+0.25mg/liba。處理1：外植體為保留一葉一芽的杜梨叢生苗莖段。處理2：外植體為多葉多芽的杜梨叢生苗莖段。試驗(yàn)方法：剪取1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，保留頂部一片葉片和一個(gè)葉芽，剪去其他多余的葉片及葉芽，接種于生根培養(yǎng)基上。剪去1.5～2.5厘米左右杜梨叢生苗莖段，直接接種于生根培養(yǎng)基。進(jìn)行平行試驗(yàn)。40天后統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，見表5。杜梨組培苗培養(yǎng)40天后的照片見圖5(a、一葉一芽外植體；b、多葉多芽外植體；c、處理1；d、處理2)。表5處理方式外植體生根率(％)平均生根條數(shù)(條)平均根長(厘米)1一葉一芽75.73.013.12多葉多芽47.11.752.15由表5、圖5可見，外植體的類型對杜梨組培苗的生根效率有很大的影響。由于新生葉片及芽的數(shù)量影響著外植體內(nèi)源激素的含量，因此，外植體的選取應(yīng)結(jié)合培養(yǎng)基激素含量的水平。當(dāng)杜梨組培苗莖段長度在1.5～2.5厘米之間，嫩芽嫩葉各保留一處時(shí)，與本發(fā)明中使用的生根培養(yǎng)基結(jié)合可以達(dá)到最佳的生根效果，此時(shí)，組培苗主枝清晰，根系發(fā)達(dá)。而當(dāng)外植體為多葉多芽時(shí)，組培苗叢生嚴(yán)重，發(fā)根率較低。當(dāng)前第1頁12