本發(fā)明涉及一種植物組織培養(yǎng)技術領域，尤其涉及一種甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的方法。
背景技術：
甘薯是一種分布廣、產(chǎn)量高的塊根作物，也是重要的糧食、飼料和工業(yè)原料，甘薯是利用塊根和莖蔓繁殖的作物，極易受到病毒的繼代傳染，感染了病毒的甘薯苗會導致甘薯品種退化、單產(chǎn)下降，同時會造成巨大的經(jīng)濟損失，因此，解決防治甘薯病毒病的根本措施是進行莖尖剝離培育脫毒苗。
技術實現(xiàn)要素：
本發(fā)明旨在解決現(xiàn)有技術的不足，而提供一種甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的方法。
本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的，采用以下技術方案：一種甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的方法，其特征在于，包括如下步驟：
(1)選取無病害、蟲害的甘薯塊，在室溫下進行育苗處理；
(2)剪取生長健壯、長度為6～7cm的甘薯莖尖進行消毒處理，并除去莖尖上肉眼可見的葉片，留下約1～2cm的莖尖浸泡在無菌水中備用；
(3)在超凈工作臺中剝離步驟(2)中消毒后的莖尖，用消毒后的解剖刀通過顯微鏡剝離0.6～0.8mm的莖尖分生組織；
(4)將剝離的莖尖分生組織接種在ph＝6.2的ms固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為25～28℃，光照強度為2500～2800lux，采用led燈照射8～12h/d；
(5)莖尖分生組織在ms固體培養(yǎng)基上逐漸形成愈傷組織，繼續(xù)培養(yǎng)15～18天后，將愈傷組織轉移到ms基本培養(yǎng)基上，誘導育苗的形成并采用巴西牽牛嫁接法對育苗進行病毒檢測，去除帶有病毒的育苗；
(6)將不帶病毒的育苗培養(yǎng)在ms基本培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為25～28℃，光照強度為2500lux，采用led燈照射8～10h/d，5～6周擴繁一次，即可實現(xiàn)甘薯莖尖剝離培育脫毒苗。
特別的，所述步驟(2)的消毒處理方法為：先將甘薯莖尖用60～65％的乙醇浸泡60s，然后再用1～1.4％的次氯酸鈉浸泡3min，最后用無菌水漂洗干凈即可。
特別的，所述步驟(5)和步驟(6)中的ms基本培養(yǎng)基的ph值為6.2。
本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明在甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的步驟中，對甘薯莖尖進行了消毒處理并在超凈工作臺中對莖尖進行剝離，減少了甘薯莖尖感染病毒，本發(fā)明實現(xiàn)了甘薯莖尖剝離培育脫毒苗，有效防止了甘薯品種的退化，提高了甘薯的單產(chǎn)與質量，同時減少了因甘薯病毒病而造成的經(jīng)濟損失。
具體實施方式
下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明：
實施例1
一種甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的方法，包括如下步驟：
(1)選取無病害、蟲害的甘薯塊，在室溫下進行育苗處理；
(2)剪取生長健壯、長度為6cm的甘薯莖尖進行消毒處理，先將甘薯莖尖用65％的乙醇浸泡60s，然后再用1％的次氯酸鈉浸泡3min，最后用無菌水漂洗干凈即可，并除去莖尖上肉眼可見的葉片，留下約1cm的莖尖浸泡在無菌水中備用；
(3)在超凈工作臺中剝離步驟(2)中消毒后的莖尖，用消毒后的解剖刀通過顯微鏡剝離0.6mm的莖尖分生組織；
(4)將剝離的莖尖分生組織接種在ph＝6.2的ms固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為25℃，光照強度為2500lux，采用led燈照射12h/d；
(5)莖尖分生組織在ms固體培養(yǎng)基上逐漸形成愈傷組織，ms基本培養(yǎng)基的ph值為6.2，繼續(xù)培養(yǎng)15天后，將愈傷組織轉移到ms基本培養(yǎng)基上，誘導育苗的形成并采用巴西牽牛嫁接法對育苗進行病毒檢測，去除帶有病毒的育苗；
(6)將不帶病毒的育苗培養(yǎng)在ms基本培養(yǎng)基上，ms基本培養(yǎng)基的ph值為6.2，培養(yǎng)溫度為25℃，光照強度為2500lux，采用led燈照射8h/d，6周擴繁一次，即可實現(xiàn)甘薯莖尖剝離培育脫毒苗。
實施例2
一種甘薯莖尖剝離培育脫毒苗的方法，包括如下步驟：
(1)選取無病害、蟲害的甘薯塊，在室溫下進行育苗處理；
(2)剪取生長健壯、長度為7cm的甘薯莖尖進行消毒處理，先將甘薯莖尖用60％的乙醇浸泡60s，然后再用1.4％的次氯酸鈉浸泡3min，最后用無菌水漂洗干凈即可，并除去莖尖上肉眼可見的葉片，留下約2cm的莖尖浸泡在無菌水中備用；
(3)在超凈工作臺中剝離步驟(2)中消毒后的莖尖，用消毒后的解剖刀通過顯微鏡剝離0.8mm的莖尖分生組織；
(4)將剝離的莖尖分生組織接種在ph＝6.2的ms固體培養(yǎng)基上，培養(yǎng)溫度為28℃，光照強度為2800lux，采用led燈照射8h/d；
(5)莖尖分生組織在ms固體培養(yǎng)基上逐漸形成愈傷組織，ms基本培養(yǎng)基的ph值為6.2，繼續(xù)培養(yǎng)18天后，將愈傷組織轉移到ms基本培養(yǎng)基上，誘導育苗的形成并采用巴西牽牛嫁接法對育苗進行病毒檢測，去除帶有病毒的育苗；
(6)將不帶病毒的育苗培養(yǎng)在ms基本培養(yǎng)基上，ms基本培養(yǎng)基的ph值為6.2，培養(yǎng)溫度為28℃，光照強度為2500lux，采用led燈照射10h/d，5周擴繁一次，即可實現(xiàn)甘薯莖尖剝離培育脫毒苗。
上面對本發(fā)明進行了示例性描述，顯然本發(fā)明具體實現(xiàn)并不受上述方式的限制，只要采用了本發(fā)明的方法構思和技術方案進行的各種改進，或未經(jīng)改進直接應用于其它場合的，均在本發(fā)明的保護范圍之內(nèi)。