專利名稱：：甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法
技術領域：
：本發(fā)明涉及一種農作物病蟲害抗擴展性鑒定方法，具體的說就是一種甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法，屬農業(yè)植保領域。
背景技術：
：甘薯莖線蟲病Z^j^/7c/^ofe"r""or由馬鈴薯腐爛線蟲所引起，在山東、江蘇、安徽和河南等地發(fā)生嚴重。該病害在甘薯IC藏期導致爛窖，在育苗期引起爛床，大田期甘薯受害后，薯塊出現糠心，一般發(fā)病田塊減產20%-50%，嚴重的甚至絕產。連作重茬使線蟲日益積累，病情逐年加重，已成為北方薯區(qū)甘薯生產上最嚴重的病害?？共∑贩N的選育和推廣是控制該病害的主要手段。準確評價品種的抗性顯得尤其重要。甘薯品種對莖線蟲病的抗性有抗侵入和抗擴展的區(qū)別，抗侵入性鑒定是用病地自然誘發(fā)鑒定，而抗擴展是對鑒定品種進行室內接種，鑒定方法一直采用林茂松等提出的方法，引用文獻資料為林茂松.室內人工接種測定甘薯品種對馬鈴薯腐爛線蟲的抗性.南京農業(yè)大學學報，1989，12(3):44-47，以接種后薯塊橫切面的防效評價品種的抗性。但多年抗擴展鑒定工作實踐表明線蟲在薯塊中橫向和縱向擴展不一致，僅以品種橫切面的防效評價品種對莖線蟲病抗擴展特性有欠缺，不能有效應用于甘薯育種研究中對甘薯莖線蟲病的抗擴展性鑒定。
發(fā)明內容本發(fā)明的目的是為克服上述現有技術的不足之處，提供一種甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法，取幾塊經嚴格消毒過的薯塊，采用直徑5mm的打孔器在每薯塊中部打？L,用消毒過的移液器將200條線蟲打入孔中，再切下一小段薯條放置于孔口，用石蠟將孔口密封，放入消毒過的塑料箱中，置于25。C室溫下培養(yǎng)45天，然后將鑒定薯塊取出，從打孔處切開，量取薯塊橫切面上薯塊的直徑和線蟲擴展大小，計算薯塊橫切面的面積與病斑面積的比值，再將薯塊沿中心點縱切，量取薯塊縱切面上薯塊的長度和線蟲擴展的長度，計算薯塊縱切面的長度與病斑長度的比值，分別計算橫切面和縱切面的防效，以橫切和縱切面平均防效進行分級，評價品種的抗感特性。本發(fā)明是以如下技術方案實現的一種甘薯基線蟲病抗擴展性鑒定方法，其特征是按如下步驟進行(1)參試品種準備，從田間取回被感染莖線蟲病的帶蟲薯塊，用淺盤法將線蟲分離出來備用；(2)將需進行鑒定的品種，每品種準備三塊中等大小的薯塊，清洗后用75%的酒精進行表面消毒，消毒后置于消毒過的塑料箱中備用，用高感品種栗子香做對照；(3)線蟲消毒，將分離出的線蟲用400目篩網過濾，用無菌水清洗三次，放入預先配好的青霉素+鏈霉素的消毒液中，消毒5min，再用無菌水清洗三次，配成200條/lml線蟲的懸浮液備用；(4)接種鑒定，采用直徑5rnrn的打孔器在每薯塊中部打孔，用消毒過的移液器將200條線蟲打入孔中，再切下一小段薯條放置于孔口，用石蠟將孔口密封，放入消毒過的塑料箱中，置于25。C室溫下培養(yǎng)45天；(5)當25'C室溫下培養(yǎng)45天時將鑒定薯塊取出，從打孔處切開，量取薯塊橫切面上薯塊的直徑和線蟲擴展大小，計算薯塊橫切面的面積與病斑面積的比值，再將薯塊沿中心點縱切，量取薯塊縱切面上薯塊的長度和線蟲擴展的長度，計算薯塊縱切面的長度與病斑長度的比值，分別計算橫切面和縱切面的防效，以橫切和縱切面平均防效進行分級，評價品種的抗感特性；(6)防效計算對照橫(縱)切面比-品種橫(縱)切面比防治效果=-X100%對照橫(縱)切面比分級標準高抗平均防效》80%;抗病平均防效在60.1%-80%;中抗平均防效40.1%-60%;感病平均防效20.1%-40%;高感平均防效《201本發(fā)明的優(yōu)點是該鑒定方法科學，操作過程簡單，以每塊經嚴格消毒的薯塊在室內接種200條線蟲，25'C室溫下培養(yǎng)45天，用薯塊的橫切和縱切面平均防效進行評價最為有效。具體實施方式下面結合實施例對本發(fā)明作進一步說明小說加一種甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法，按如下步驟進行(1)參試品種準備，從田間取回被感染莖線蟲病的帶蟲薯塊，用淺盤法將線蟲分離出來備用；(2)將需進行鑒定的品種，每品種準備三塊中等大小的薯塊，清洗后用75%的酒精進行表面消毒，消毒后置于消毒過的塑料箱中備用，用高感品種栗子香做對照；(3)線蟲消毒，將分離出的線蟲用400目篩網過濾，用無菌水清洗三次，放入預先配好的青霉素+鏈霉素的消毒液中，消毒5min，再用無菌水清洗三次，配成200條/lml線蟲的懸浮液備用；(4)接種鑒定，采用直徑5mm的打孔器在每薯塊中部打孔，用消毒過的移液器將200條線蟲打入孔中，再切下一小段薯條放置于孔口，用石蠟將孔口密封，放入消毒過的塑料箱中，置于25'C室溫下培養(yǎng)45天；(5)當25'C室溫下培養(yǎng)45天時將鑒定薯塊取出，從打孔處切開，量取薯塊橫切面上薯塊的直徑和線蟲擴展大小，計算薯塊橫切面的面積與病斑面積的比值，再將薯塊沿中心點縱切，量取薯塊縱切面上薯塊的長度和線蟲擴展的長度，計算薯塊縱切面的長度與病斑長度的比值，分別計算橫切面和縱切面的防效，以橫切和縱切面平均防效進行分級，評價品種的抗感特性；(6)防效計算對照橫(縱)切面比-品種橫(縱)切面比防治效果=-^-X100%對照橫(縱)切面比分級標準高抗平均防效》80%;抗病平均防效在60.1%-80%;中抗:平均防效40.1%_60%;感病平均防效20.1°/。_40%;高感平均防效《20%。薯塊橫切面與縱切面調查對抗性評價的影響<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>*HR:高抗，highresistance;R:抗，resistance;MR:中抗，middleresistance;HS:高感，highsusceptibility;S:感，susceptibility;MS:中感，middlesusceptibility結論從上述列舉的鑒定結果可以看出品種的橫切面抗性與平均抗性有差異。如徐01-2-22其橫切面防效為抗，平均防效則為感；徐273橫切面防效為高抗，而平均防效為抗；徐03-3-4橫切面防效為中抗，而平均防效為高感；因此，僅以橫切面防效確定品種的抗擴展性是不全面的，以室內接種200條線蟲，25。C室溫下培養(yǎng)45天，用薯塊的橫切和縱切面平均防效進行評價最為有效。權利要求1.一種甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法，其特征是按如下步驟進行(1)參試品種準備，從田間取回被感染莖線蟲病的帶蟲薯塊，用淺盤法將線蟲分離出來備用；(2)將需進行鑒定的品種，每品種準備三塊中等大小的薯塊，清洗后用75％的酒精進行表面消毒，消毒后置于消毒過的塑料箱中備用，用高感品種栗子香做對照；(3)線蟲消毒，將分離出的線蟲用400目篩網過濾，用無菌水清洗三次，放入預先配好的青霉素+鏈霉素的消毒液中，消毒5min，再用無菌水清洗三次，配成200條/1ml線蟲的懸浮液備用；(4)接種鑒定，采用直徑5mm的打孔器在每薯塊中部打孔，用消毒過的移液器將200條線蟲打入孔中，再切下一小段薯條放置于孔口，用石蠟將孔口密封，放入消毒過的塑料箱中，置于25℃室溫下培養(yǎng)45天；(5)當25℃室溫下培養(yǎng)45天時將鑒定薯塊取出，從打孔處切開，量取薯塊橫切面上薯塊的直徑和線蟲擴展大小，計算薯塊橫切面的面積與病斑面積的比值，再將薯塊沿中心點縱切，量取薯塊縱切面上薯塊的長度和線蟲擴展的長度，計算薯塊縱切面的長度與病斑長度的比值，分別計算橫切面和縱切面的防效，以橫切和縱切面平均防效進行分級，評價品種的抗感特性；(6)防效計算id="icf0001"file="S2008100236042C00011.gif"wi="118"he="12"top="189"left="42"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="no"/>分級標準高抗平均防效≥80％；抗病平均防效在60.1％-80％；中抗平均防效40.1％-60％；感病平均防效20.1％-40％；高感平均防效≤20％。全文摘要本發(fā)明涉及一種農作物病蟲害抗擴展性鑒定方法，具體的說就是一種甘薯莖線蟲病抗擴展性鑒定方法。該方法科學，操作過程簡單，取幾塊經嚴格消毒過的薯塊，采用直徑5mm的打孔器在每薯塊中部打孔，用消毒過的移液器將200條線蟲打入孔中，再切下一小段薯條放置于孔口，用石蠟將孔口密封，放入消毒過的塑料箱中，置于25℃室溫下培養(yǎng)45天，然后將鑒定薯塊取出，從打孔處切開，量取薯塊橫切面上薯塊的直徑和線蟲擴展大小，計算薯塊橫切面的面積與病斑面積的比值，再將薯塊沿中心點縱切，量取薯塊縱切面上薯塊的長度和線蟲擴展的長度，計算薯塊縱切面的長度與病斑長度的比值，分別計算橫切面和縱切面的防效，以橫切和縱切面平均防效進行分級，評價品種的抗感特性。文檔編號C12Q1/02GK101260422SQ20081002360公開日2008年9月10日申請日期2008年4月10日優(yōu)先權日2008年4月10日發(fā)明者強李,李洪民,李秀英,欣王,謝逸萍,馬代夫申請人:江蘇徐州甘薯研究中心