1.一種耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:該育種新方法步驟如下:
1)分別選取耐熱粳稻品種/系和粳稻育種骨干品種/系作親本,雜交獲得F1,F(xiàn)1與母本回交獲得BCF1:選取農(nóng)藝性狀優(yōu)良的粳稻育種骨干品種/系作為母本,選取耐熱粳稻品種/系作為父本,然后將父本和母本正季大田種植,抽穗后雜交,獲得F1,F(xiàn)1與母本回交獲得BCF1;
2)取BCF1花藥進(jìn)行誘導(dǎo)培養(yǎng),得到花藥愈傷后進(jìn)行熱處理:將BCF1雜交種正季種植,選取健壯主穗花藥進(jìn)行花藥誘導(dǎo)培養(yǎng),獲得花藥愈傷組織,待花藥愈傷組織普遍長至直徑0.3~0.6cm后,調(diào)節(jié)培養(yǎng)室溫度至35~36℃,持續(xù)5~7天;
3)挑選花藥愈傷轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基,進(jìn)行常溫分化培養(yǎng)~熱處理循環(huán):挑選直徑為0.4~0.7cm的花藥愈傷組織,轉(zhuǎn)入分化培養(yǎng)基,進(jìn)行常溫分化培養(yǎng),溫度控制為25~27℃,時間控制為7~9天,再變換為熱處理,溫度控制為35~36℃,時間控制為3~4天,然后恢復(fù)至常溫分化培養(yǎng),如此常溫分化培養(yǎng)~熱處理循環(huán)3~4次至褐化愈傷組織部分超過一半;
4)將活性愈傷投入復(fù)蘇劑中浸泡,然后轉(zhuǎn)入新分化培養(yǎng)基中繼續(xù)分化培養(yǎng):熱處理后愈傷組織部分褐化變黑,一些愈傷組織白化喪失活性,切下褐化和白化部分,將留下的活性愈傷投入濕熱滅菌過的復(fù)蘇劑中浸泡處理,然后將活性愈傷轉(zhuǎn)入新的分化培養(yǎng)基中繼續(xù)分化培養(yǎng);
5)愈傷組織誘導(dǎo)出苗后,轉(zhuǎn)入繼代培養(yǎng)基中壯苗,煉苗后移栽入溫室:部分愈傷組織經(jīng)過熱處理、復(fù)蘇劑處理后存活下來,并分化出苗,待花培苗長至2cm之后轉(zhuǎn)接于繼代培養(yǎng)基進(jìn)行壯苗,待花培苗長至8cm后打開封口膜煉苗,10~15天后移栽入溫室;
6)花培苗單株收種獲得花培家系,進(jìn)一步農(nóng)藝性狀、耐熱篩選獲得耐熱粳稻新品系:溫室內(nèi)花培單株收種,獲得粳稻花培家系若干,正季將收獲的花培家系大田種植,以粳稻育種骨干品種/系親本為對照,篩選獲得農(nóng)藝形狀良好且耐熱性得到改良的粳稻新品系。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟1)中耐熱粳稻品種/系的特點為:在大田栽培遭遇極端高溫天氣時,相比于普通水稻品種/系,株高、穗長、粒重變化幅度較小,空殼率低,水稻產(chǎn)量損失程度低的水稻品種/系;粳稻育種骨干品種/系的特點為:產(chǎn)量高,米質(zhì)好,抗性優(yōu)良但不耐熱的粳稻品種/系。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟2)中進(jìn)行花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)的具體過程如下:
(2.1)取材與預(yù)處理:將選取的BCF1雜交種正季大田常規(guī)栽培,取葉枕距為5~7cm、穗與花藥呈淡黃綠色、花藥長度為穎殼的1/3~1/2且孕穗不裂開的健壯主穗,保留2~3張葉片,75%酒精表面消毒,用濕紗布包裹后置于4℃冰箱中低溫預(yù)處理2~3天;
(2.2)接種:預(yù)處理后,將含主穗的稻苞剪下,然后將該稻苞浸泡于75%的酒精中表面消毒3~4min,接著將該稻苞轉(zhuǎn)移于超凈工作臺中剝離主穗,進(jìn)一步剝?nèi)⌒∷霝榇笮【鶆虻男≈Ч?,接下來用消毒過的紗布包裹小支梗,然后將紗布投入濃度為0.1%的升汞滅菌10min,無菌水漂洗3~4次,打開紗布晾干,最后用消毒過的剪刀剪開花藥上部,抖藥法接種花藥于誘導(dǎo)培養(yǎng)基。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟(2.2)中的花藥誘導(dǎo)培養(yǎng)基配方為:N6大量元素+MS微量元素+MS有機(jī)質(zhì)+2mg/L2,4-D+0.5mg/LNAA+0.5mg/L水解蛋白+5%蔗糖+0.8%植物凝膠,pH值為5.8。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟2)中誘導(dǎo)培養(yǎng)的培養(yǎng)條件控制為:溫度25~27℃,暗培養(yǎng)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟3)常溫分化培養(yǎng)與熱處理的光照條件均為:光照強度為1000~1500Lux,光周期為14h光/10h暗。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟3)和4)中分化培養(yǎng)基配方為:MS無機(jī)鹽+MS有機(jī)物+蔗糖3%+瓊脂0.7%+KT2.0mg/L+NAA0.5 mg/L+水解蛋白1g/L,pH值為5.8。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟4)中活性愈傷特點為:結(jié)構(gòu)疏松、表面具球形顆粒、顏色淺而透明。
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟4)中復(fù)蘇劑成分為:每升水含維生素C 0.3~0.4g、維生素E 0.6~0.8g、Na2-EDTA 0.8~1.0g、FeSO4?7H2O 0.5~0.7g、ZnSeO4·5H2O1.2~1.5g、MgSO4·7H2O 0.6~0.8g、植物硫化激動素PSK-α 0.02~0.03μmol;所述復(fù)蘇劑浸泡處理的時間為6-8h。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的耐熱粳稻育種新方法,其特征在于:所述步驟5)中繼代培養(yǎng)基配方為:1/2MS大量+MS微量+MS有機(jī)物+蔗糖3%+多效唑 0.2~0.3mg/L+瓊脂0.8%,pH值為5.8。