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一種南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法與流程

文檔序號:12072577閱讀:來源:國知局

技術特征:

1.一種南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述方法包括以下步驟:

1)鱗片的預處理:選取南非伯利恒之星健康、飽滿的鱗莖,挑選出內部干凈、完整的鱗片,對鱗片進行滅菌處理;

2)誘導培養(yǎng):將經步驟1)處理過的鱗片切成2~3cm×3~4cm的小方塊,然后接種于誘導培養(yǎng)基上,光照條件下進行誘導培養(yǎng)40~45天,獲得不定芽;所述誘導培養(yǎng)基組成為:MS培養(yǎng)基、激動素0.4~0.8mg/L、萘乙酸0.2~0.6mg/L、6-芐氨基腺嘌呤1.0~2.0mg/L、白砂糖20~30g/L和瓊脂5~7g/L;

3)增殖培養(yǎng):將經步驟2)誘導培養(yǎng)所得不定芽離體后接種于增殖培養(yǎng)基上,光照條件下進行增殖培養(yǎng)45~50天;所述增殖培養(yǎng)基組成為:MS培養(yǎng)基、萘乙酸0.3~0.8mg/L、6-芐氨基腺嘌呤1.0~2.0mg/L、白砂糖30~35g/L和瓊脂5~7g/L;

4)生根培養(yǎng):將經步驟3)增殖培養(yǎng)所得高度為3.0~5.0cm的不定芽轉接到生根培養(yǎng)基中,光照條件下進行生根培養(yǎng)45~50天,獲得南非伯利恒之星種苗;所述生根培養(yǎng)基組成為:1/2MS培養(yǎng)基、萘乙酸0.5~1.0mg/L、吲哚乙酸0.2~0.8mg/L、白砂糖10~15g/L、瓊脂5~7g/L和活性炭0.5~1.0g/L。

2.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟1)中滅菌處理的操作為:將鱗片洗凈后用質量分數為75%的乙醇處理30秒以上,無菌水沖洗掉乙醇,再用質量分數為0.1~0.15%的氯化汞水溶液滅菌處理10~20min,然后用無菌水沖洗5~6次。

3.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟2)中誘導培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為26~27℃。

4.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟2)中光照條件為:光照時長10h·d-1,光照強度800~1000lx。

5.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟3)中增殖培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為26~27℃。

6.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟3)中光照條件為:光照時長10h·d-1,光照強度800~1000lx。

7.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟4)中生根培養(yǎng)的培養(yǎng)溫度為26~27℃。

8.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟4)中光照條件為:光照時長10h·d-1,光照強度500~800lx。

9.根據權利要求1所述的南非伯利恒之星離體培養(yǎng)方法,其特征在于,所述步驟4)中還包括對高度為3.0~5.0cm的不定芽進行切除葉片和莖后,再接種至增殖培養(yǎng)基上。

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