一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基，以1L培養(yǎng)基計，由以下組分組成：硝酸銨(NH4NO3)627～693mg，硝酸鉀(KNO3)722～798mg，氯化鈣(CaCl2·2H2O)168～184mg，硫酸鎂(MgSO4·7H2O)160～176mg，磷酸二氫鉀(KH2PO4)65～71mg，碘化鉀(KI)0.315～0.348mg，硼酸(H3BO3)2.36～2.60mg，硫酸錳(MnSO4·4H2O)6.43～7.09mg，硫酸鋅(ZnSO4·7H2O)3.27～3.61mg，鉬酸鈉(Na2MoO4·2H2O)0.095～0.105mg，硫酸銅(CuSO4·5H2O)0.009～0.011mg，氯化鈷(CoCl2·6H2O)0.009～0.011mg，乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA·H2O)28.5～31.5mg，肌醇(C6H12O6)38～42mg，煙酸(C6H5NO2)0.19～0.21mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3·HCl)0.19～0.21mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS·HCl)0.038～0.042mg，蔗糖(C12H22O11)7600～8400mg，甘露醇7600～8400mg，瓊脂6650～7350mg，余量為水。使用本發(fā)明的培養(yǎng)基，馬鈴薯組培苗生長緩慢，從接種之日起到株高長至8厘米需要140-150天，顯著度提高了馬鈴薯種苗的保存時間。
【專利說明】一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種培養(yǎng)基，具體涉及一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基。
【背景技術(shù)】
[0002]目前國內(nèi)外進(jìn)行馬鈴薯核心種苗保存使用方法之一是利用組培的方法來進(jìn)行，而且一般是使用MS培養(yǎng)基來保存，但是在MS培養(yǎng)基上生長的組培苗30天左右就需要剪切轉(zhuǎn)接一次，需要人工和材料較多，而且如此頻繁的操作使得核心種苗的生理年齡加速衰老，不利于長期保存。也有研究人員在MS培養(yǎng)基中添加脫落酸、青鮮素、矮壯素、多效唑、B9等植物生長調(diào)節(jié)劑來減緩組培苗的生長速度，但是保存時間范圍一般在60天至90天左右。

【發(fā)明內(nèi)容】
[0003]本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的
培養(yǎng)基。
[0004]為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
[0005]一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3)627 ~693mg,硝酸鉀(KNO3) 722 ~798mg,氯化鈣(CaCl2.2H20) 168 ~184mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 160 ~176mg，磷酸二氫鉀(KH2PO4) 65 ~71mg，碘化鉀(KI) 0.315 ~0.348mg,硼酸(H3BO3) 2.36 ~2.60mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 6.43 ~7.09mg,硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.27 ~3.61mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.09 ~0.1lmg,硫酸銅(CuSO4.5Η20)0.009 ~0.01lmg，氯化鈷(CoCl2.6Η20)0.009 ~0.01 Img，乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20) 28.5 ~31.5mg,肌醇(C6H12O6) 38 ~42mg，煙酸(C6H5NO2) 0.19 ~0.21mg,鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCD0.19 ~0.21mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.038 ~0.042mg,蔗糖(C12H22O11) 7600 ~8400mg，甘露醇 7600 ~8400mg，瓊脂 6650 ~7350mg，余量為水。
[0006]優(yōu)選的是，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 660mg,硝酸鉀(KNO3) 760mg,氯化鈣(CaCl2.2H20) 176mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 168mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 68mg，碘化鉀(KI)0.332mg，硼酸(H3BO3) 2.4Smg，硫酸錳(MnSO4.4Η20) 6.76mg，硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.44mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.lmg，硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.01mg，氯化鈷(CoCl2.6Η20)0.01mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.Η20)30π^，肌醇(C6H12O6)40mg，煙酸(C6H5NO2) 0.2mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.2mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.04mg,蔗糖(C12H22O11) 8000mg,甘露醇8000mg，瓊脂7000mg，余量為水。
[0007]—種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基的制備方法，包含以下制備步驟:
[0008]a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分，加蒸餾水充分溶解后，定容；
[0009]b、準(zhǔn)確稱取瓊脂并加入到定容好的溶液中，加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解；
[0010]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.5-5.7 ；
[0011]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘，制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0012]一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基的使用方法，在無菌操作臺上，每100mL培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20-22°C、24小時光照的組培室內(nèi)保存。
[0013]相對于現(xiàn)有技術(shù)，采用本發(fā)明的培養(yǎng)基保存馬鈴薯核心組培苗，在24小時光照、室內(nèi)溫度20-22°C的條件下，組培苗生長緩慢，從接種之日起到株高長至8厘米所需要的時間較長，為140-150天，且該培養(yǎng)基對組培苗無毒害作用，植株生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯，并大大降低了保存馬鈴薯核心種苗所需的人工和材料。
【具體實施方式】
[0014]下面結(jié)合實施例對本發(fā)明的【具體實施方式】做進(jìn)一步說明。
[0015]本發(fā)明提供一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 627~693mg，硝酸鉀(KNO3) 722~798mg，氯化鈣(CaCl2.2H20) 168 ~184mg，硫酸鎂(MgSO4.7H20) 160 ~176mg，磷酸二氫鉀(KH2PO4) 65 ~71mg,碘化鉀(KI)0.315 ~0.348mg,硼酸(H3BO3) 2.36 ~2.60mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 6.43 ~7.09mg，硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.27 ~3.61mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.09 ~0.1lmg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.009 ~0.01lmg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.009 ~0.01lmg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 28.5 ~31.5mg,肌醇(C6H12O6) 38 ~42mg，煙酸(C6H5NO2) 0.19 ~0.21mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.19 ~
0.21mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.038 ~0.042mg，蔗糖(C12H22O11) 7600 ~8400mg,甘露醇7600~8400mg，瓊脂6650~7350mg，余量為水。
[0016]其制備方法為:
[0017]a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分，加蒸餾水充分溶解后，定容；
[0018]b、準(zhǔn)確稱取瓊脂并加入到定容好的溶液中，加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解；
[0019]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至5.5-5.7 ；
[0020]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘，制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0021]將通過上述制備方法制得的培養(yǎng)基，用于延緩馬鈴薯組培苗的生長速度，其方法為:在無菌操作臺上，每100mL培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20-220C >24小時光照的組培室內(nèi)保存。
[0022]實施例1
[0023]一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 660mg,硝酸鉀(KNO3) 760mg,氯化鈣(CaCl2.2H20) 176mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 168mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 68mg,碘化鉀(KI)0.332mg,硼酸(H3BO3) 2.48mg，硫酸錳(MnSO4.4H20) 6.76mg，硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.44mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.lmg，硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.01mg，氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.01mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 30mg，肌醇(C6H12O6) 40mg，煙酸(C6H5NO2) 0.2mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.2mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.04mg，蔗糖(C12H22O11) 8000mg，甘露醇8000mg，瓊脂7000mg，余量為水。
[0024]上述培養(yǎng)基的制備方法，包含以下步驟:
[0025]a、準(zhǔn)確稱取除瓊脂外的培養(yǎng)基其余組分，加蒸餾水充分溶解后，定容；
[0026]b、準(zhǔn)確稱取瓊脂并加入到定容好的溶液中，加熱至70~90°C至瓊脂完全溶解；
[0027]C、分別用lmol/1的硝酸或lmol/1的氫氧化鈉溶液將培養(yǎng)基的pH值調(diào)節(jié)至
5.5-5.7 ；
[0028]d、將配制好的培養(yǎng)基分裝至組織瓶中，于121~125°C、103.43kPa下滅菌20~30分鐘，制得本發(fā)明的培養(yǎng)基。
[0029]將通過上述制備方法制得的培養(yǎng)基，用于延緩馬鈴薯組培苗的生長速度，其方法為:在無菌操作臺上，每100mL培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20-220C >24小時光照的組培室內(nèi)保存。
[0030]使用本實施例中的培養(yǎng)基，對不同的馬鈴薯組培苗進(jìn)行培養(yǎng)，其典型結(jié)果如下:
[0031]1、宣威市馬鈴薯種薯研發(fā)中心組培室利用本實施例的培養(yǎng)基保存馬鈴薯核心組培苗，2011年3月16日剪切接種，培養(yǎng)基PH值5.7，室內(nèi)溫度設(shè)定為22°C，24小時光照，2011年8月3日組培苗株高長至8厘米，生長時間是141天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯。
[0032]2、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)薯類作物研究所組培室利用本實施例的培養(yǎng)基保存馬鈴薯核心組培苗，2011年3月5日剪切接種，培養(yǎng)基PH值5.6，室內(nèi)溫度設(shè)定為20°C，24小時光照，2011年7月31日組培苗株高長 至8厘米，生長時間是149天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯。
[0033]3、云南農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)與生物技術(shù)學(xué)院組培室利用本實施例的培養(yǎng)基保存馬鈴薯核心組培苗，2011年3月10日剪切接種，培養(yǎng)基PH值5.6，室內(nèi)溫度設(shè)定為20°C，24小時光照，2011年8月2日組培苗株高長至8厘米，生長時間是146天，組培苗生長健壯，葉色濃綠，莖桿粗壯。
[0034]相同條件下，使用MS培養(yǎng)基保存的馬鈴薯核心組培苗，2011年3月10日剪切接種，2011年4月9日組培苗株高長至8厘米，生長時間是31天，組培苗生長較弱，葉色淡綠，莖桿細(xì)弱彎曲，分枝較多且細(xì)弱。
[0035]本發(fā)明所描述的具體實施例只用于對該培養(yǎng)基的具體實現(xiàn)過程的詳細(xì)描述，而不是對該培養(yǎng)基的限定。任何對此產(chǎn)品進(jìn)行的修飾與改良，在專利范圍或范疇內(nèi)同類或相近物質(zhì)的替代與使用，均屬于本發(fā)明專利范圍，受此專利保護(hù)。
【權(quán)利要求】
1.一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基，其特征在于，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 627~693mg，硝酸鉀(KNO3) 722~798mg，氯化鈣(CaCl2.2H20) 168 ~184mg，硫酸鎂(MgSO4.7H20) 160 ~176mg，磷酸二氫鉀(KH2PO4) 65 ~71mg,碘化鉀(KI)0.315 ~0.348mg,硼酸(H3BO3) 2.36 ~2.60mg,硫酸錳(MnSO4.4H20) 6.43 ~7.09mg，硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.27 ~3.61mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.09 ~0.1lmg,硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.009 ~0.01lmg,氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.009 ~0.01lmg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 28.5 ~31.5mg,肌醇(C6H12O6) 38 ~42mg，煙酸(C6H5NO2) 0.19 ~0.21mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.19 ~0.21mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.038 ~0.042mg，蔗糖(C12H22O11) 7600 ~8400mg,甘露醇7600~8400mg，瓊脂6650~7350mg，余量為水。
2.按照權(quán)利要求1所述的培養(yǎng)基，其特征在于，以IL培養(yǎng)基計，由以下組分組成:硝酸銨(NH4NO3) 660mg,硝酸鉀(KNO3) 760mg,氯化鈣(CaCl2.2H20) 176mg,硫酸鎂(MgSO4.7H20) 168mg,磷酸二氫鉀(KH2PO4) 68mg,碘化鉀(KI)0.332mg,硼酸(H3BO3) 2.48mg，硫酸錳(MnSO4.4H20) 6.76mg，硫酸鋅(ZnSO4.7H20) 3.44mg，鑰酸鈉(Na2MoO4.2H20) 0.lmg，硫酸銅(CuSO4.5H20) 0.01mg，氯化鈷(CoCl2.6H20) 0.01mg,乙二胺四乙酸鐵鈉(FeNa2EDTA.H2O) 30mg，肌醇(C6H12O6) 40mg，煙酸(C6H5NO2) 0.2mg，鹽酸吡哆醇(C8H11NO3.HCl) 0.2mg，鹽酸硫胺素(C12H17ClN4OS.HCl) 0.04mg，蔗糖(C12H22O11) 8000mg，甘露醇8000mg，瓊脂7000mg，余量為水。
3.一種延緩馬鈴薯組培苗生長速度的培養(yǎng)基的使用方法，其特征在于:其使用方法為:在無菌操作臺上，每100mL培養(yǎng)基扦插入10-12個馬鈴薯組培苗莖段，在環(huán)境溫度20-220C >24小時光照的組培室內(nèi)保存。
【文檔編號】A01H4/00GK103875537SQ201410164504
【公開日】2014年6月25日 申請日期:2014年4月19日 優(yōu)先權(quán)日:2013年4月19日
【發(fā)明者】張新永, 包媛媛, 宋雷 申請人:云南農(nóng)業(yè)大學(xué)