一種延胡索塊莖的培植方法
【專利摘要】本發(fā)明公布了一種延胡索塊莖的培植方法，包括下列步驟：1)將無病蟲害、體相飽滿的延胡索放入恒溫箱中培養(yǎng)，使其發(fā)芽；2)將上述帶小芽的延胡索塊莖切成帶芽塊莖，用酒精清洗切口后，接種到特別配制的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；3)待塊莖在箱中發(fā)出小芽，用小刀將芽割??；4)將小芽接種到誘導(dǎo)塊莖培養(yǎng)基上培養(yǎng)；5)待小苗的根部有長(zhǎng)成類球狀塊莖時(shí)，將其接種到塊莖增殖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，培養(yǎng)到所要求的株高和莖徑大??；6)待步驟3)所得的帶芽塊莖重新長(zhǎng)出小苗時(shí)，割去小芽；并重復(fù)一次進(jìn)行步驟4)和步驟5)。采用本方法能獲得大量延胡索發(fā)芽塊莖。
【專利說明】一種延胡索塊莖的培植方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明設(shè)計(jì)一種延胡索塊莖的培植法。
【背景技術(shù)】
[0002]延胡索為傳統(tǒng)中藥材，主治胸腹疼痛、痛經(jīng)、四肢瘀滯作痛、跌仆傷痛等病癥。由于很多中成藥需要添加延胡索，因而市場(chǎng)上延胡索走勢(shì)很高。但同時(shí)由于過度采挖使延胡索的野生資源瀕臨枯竭，而延胡索的人工栽培繁殖系數(shù)低、耗種量大，導(dǎo)致延胡索生產(chǎn)增長(zhǎng)速度慢且成本增加。植物組織和細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)為從根本上改變傳統(tǒng)延胡索藥材的生產(chǎn)提供了一個(gè)嶄新的方法。組織培養(yǎng)生產(chǎn)延胡索，可為人工栽培提供大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗(莖)，進(jìn)而可以解決野生資源缺乏這一日益嚴(yán)重的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種延胡索塊莖的培植法，采用此方法可以得到大量延胡索塊莖，包括以下步驟:
[0004](I)將無病蟲害、體相飽滿的延胡索放入恒溫箱中培養(yǎng)，使其發(fā)芽，直至塊莖上萌發(fā)的小芽高度約0.5~1.0cm ;培養(yǎng)條件為:25~30°C ；
[0005](2)將上述帶小芽的延胡索塊莖切成長(zhǎng):0.5~1.0cm、寬:0.1~0.5cm、高:0.1~
0.5cm的帶芽塊莖；將上述帶芽塊莖用酒精清洗切口后，接種到特別配制的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C,保持燈光照射；
[0006](3)待塊莖在箱中發(fā)出小芽，小芽長(zhǎng)1.0~1.5cm時(shí)，用小刀將芽割取；
[0007](4)將割下來的小芽接種到誘導(dǎo)塊莖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C，保持燈光照射；
[0008](5)待恒溫箱中的小苗的根部有長(zhǎng)成球狀類塊莖時(shí)，將其接種到塊莖增殖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并達(dá)到所要求的株高和塊莖直徑大?。慌囵B(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C，保持燈光照射；最終可將其移植到戶外種植；
[0009](6)待步驟⑶所得的帶芽塊莖重新長(zhǎng)出1.0~1.5cm高的小苗時(shí)，割去小芽；并重復(fù)一次進(jìn)行步驟(4)和步驟(5)。
[0010]作為本發(fā)明的延胡索塊莖的培植法的改進(jìn)，步驟(2)中的MS培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+1~5%蔗糖+0.5~1.0%瓊脂，保持pH為5.5~6.5。
[0011]上述MS培養(yǎng)基的制作方法具體如下:以MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)，分別加入蔗糖、瓊脂，混合均勻，用KOH和HCL調(diào)節(jié)pH到5.5~6.5。
[0012]作為本發(fā)明的延胡索塊莖的培植法的改進(jìn)，步驟(4)中的MS培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+0.1~0.5mg/l萘乙酸+1~5%蔗糖+0.5~1.0 %瓊脂，保持pH為5.5~6.5。
[0013]上述MS培養(yǎng)基的制作方法具體如下:以MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)，分別加入NAA、蔗糖、瓊脂，混合均勻，用KOH和HCL調(diào)節(jié)pH到5.5~6.5。
[0014]作為本發(fā)明的延胡索塊莖的培植法的改進(jìn)，步驟(5)中的1/2MS培養(yǎng)基為:1/2MS基本培養(yǎng)基+0.1~0.5mg/lNAA+l~5%蔗糖+0.5~1.0 %瓊脂，保持pH為5.5~6.5。
[0015]上述MS培養(yǎng)基的制作方法具體如下:以1/2MS培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)，然后分別加入NAA、蔗糖、瓊脂，混合均勻，用KOH和HCL調(diào)節(jié)pH到5.5~6.5。
[0016]本發(fā)明的延胡索塊莖培植法，屬于一種誘導(dǎo)法將延胡索塊莖組織來進(jìn)行培養(yǎng)。依照植物組織培養(yǎng)中細(xì)胞全能性的原理，可以在短時(shí)間內(nèi)生產(chǎn)大量?jī)?yōu)質(zhì)種苗，而且依靠實(shí)驗(yàn)室可以實(shí)現(xiàn)周年的長(zhǎng)期提供優(yōu)質(zhì)種苗。在本發(fā)明方法中，將健壯的延胡索塊莖先進(jìn)行催芽，有助于打破塊莖休眠。采用次發(fā)明的方法，延胡索塊莖田間移栽成活率達(dá)到95%。此方法不受季節(jié)等因素的影響，高效，快速獲得優(yōu)質(zhì)延胡索塊莖，并能保持優(yōu)質(zhì)傳代。
【具體實(shí)施方式】
[0017]實(shí)施例1、一種延胡索塊莖的培植法。依次進(jìn)行一下步驟:
[0018](I)將無病蟲害、體相飽滿的延胡索放入恒溫箱中培養(yǎng)，使其發(fā)芽，直至塊莖上萌發(fā)的小芽高度約0.5cm ;培養(yǎng)條件為:25~26°C ；
[0019](2)將上述帶小芽的延胡索塊莖切成長(zhǎng):0.8cm、寬:0.5cm、高:0.5cm的帶芽塊莖；將上述帶芽塊莖用酒精搽切口后，接種到特別配制的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25-26°C，保持燈光照射15h/d ；
[0020]該誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+3%蔗糖+0.5%瓊脂，保持pH為 6.0 ~6.5。
[0021](3)待塊莖在箱中發(fā)出小芽，芽高在1.0~1.5cm時(shí)，用小刀將芽割??；
[0022](4)將割下來的小芽接種到誘導(dǎo)塊莖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~26 °C，保持燈光照射15h/d;
[0023]該誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+0.3mg/l萘乙酸+3%蔗糖+0.5瓊脂，保持pH為
6.0 ~6.5。
[0024](5)待恒溫箱中的小苗的根部有長(zhǎng)成球狀類塊莖時(shí)，將其接種到塊莖增殖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并達(dá)到1.ο-l.5cm株高和塊莖直徑大小為1.0cm左右時(shí)，接種到培養(yǎng)機(jī)中培養(yǎng)；其培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25-26°C，保持燈光照射15h/d。
[0025]該誘導(dǎo)培養(yǎng)基為:1/2MS培養(yǎng)基為:1/2MS基本培養(yǎng)基+0.3mg/lNAA+3%蔗糖+0.5瓊脂，保持pH為6.0-6.5。
[0026](6)待步驟(3)所得的帶芽塊莖重新長(zhǎng)出1.0~1.5cm高的小苗時(shí)，割去小芽；并重復(fù)一次進(jìn)行步驟(4)和步驟(5)。
[0027]依照上述方法，可以得到大量的塊莖。
[0028]最后，還需要注意的是，以上所舉例子僅以本發(fā)明的具體實(shí)例。顯然，本發(fā)明并不局限于以上實(shí)例，還有其他很多變形。
【權(quán)利要求】
1.一種延胡索塊莖的培植法，其特征在于:包括下列步驟: (1)將無病蟲害、體相飽滿的延胡索塊莖放入恒溫箱中培養(yǎng)，使其發(fā)芽，直至塊莖上萌發(fā)的小芽高度約0.5~1.0cm ;培養(yǎng)條件為:25~30°C ； (2)將上述帶小芽的延胡索塊莖切成長(zhǎng):0.5~1.0cm、寬:0.1~0.5cm、高:0.1~0.5cm的帶芽塊莖；將上述帶芽塊莖用酒精清洗切口后，接種到特別配制的MS培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)；培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C,保持燈光照射； (3)待塊莖在箱中發(fā)出小芽，小芽長(zhǎng)1.0~1.5cm時(shí)，用小刀將芽割??； (4)將割下來的小芽接種到誘導(dǎo)塊莖培養(yǎng)基上，培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C，保持燈光照射； (5)待恒溫箱中的小苗的根部有長(zhǎng)成球狀類塊莖時(shí)，將其接種到塊莖增殖的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，并達(dá)到所要求的株高和塊莖直徑大??；培養(yǎng)條件為:恒溫箱中溫度25~30°C，保持燈光照射；最終可將其移植到戶外種植； (6)待步驟(3)所得的帶芽塊莖重新長(zhǎng)出1.0~1.5cm高的小苗時(shí)，割去小芽；并重復(fù)一次進(jìn)行步驟(4)和步驟(5)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的延胡索塊莖的培植法，其特征是:步驟(2)中的MS培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+1~5%蔗糖 +0.5~1.0 %瓊脂，保持pH為5.5~6.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的延胡索塊莖的培植法，其特征是:步驟(4)中的MS培養(yǎng)基為:MS基本培養(yǎng)基+0.1~0.5mg/L萘乙酸+1~5%蔗糖+0.5~1.0 %瓊脂，保持pH為5.5~6.5o
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的延胡索塊莖的培植法，其特征是:步驟(5)中的1/2MS培養(yǎng)基為:1/2MS基本培養(yǎng)基+0.1~0.5mg/l NAA+1~5%蔗糖+0.5~1.0%瓊脂，保持pH為5.5 ~6.5。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK104012405SQ201310061813
【公開日】2014年9月3日 申請(qǐng)日期:2013年2月28日 優(yōu)先權(quán)日:2013年2月28日
【發(fā)明者】毛健, 姬中偉, 張敏, 牟穰, 陽志銳, 郭燕飛, 黎衛(wèi), 馮東陽, 鞏丹, 劉蕓雅 申請(qǐng)人:江南大學(xué)