用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法
【技術領域】
[0001]本發(fā)明涉及貝母總生物堿的提取，具體涉及用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法。
【背景技術】
[0002]貝母是百合科(Liliaceae)貝母屬{Fri tillaria)植物，傳統(tǒng)藥用部位為其鱗莖，貝母主治傷寒煩熱、咳嗽止氣、安五臟、利骨髓、消痰潤心肺，兼有消炎退腫、治療痛癤腫毒等功效。1982年版《中藥志》述:有“清熱潤肺、化痰止咳、散結功能等功效”，臨床用于痰熱咳嗽、臉色悶痰，治瘰癘和瘡瘍腫毒。貝母主要藥用成份為貝母生物堿，包括貝母甲素(C27H45NO3X貝母乙素(C27H43NO3)等，貝母生物堿具有自由基清除活性。目前從貝母中提取總生物堿的方法為傳統(tǒng)的有機溶劑萃取，如公告號為CN1146425的發(fā)明專利，就公開了先將貝母用95%乙醇回流，加2%鹽水溶解后，依次用石油醚、醋酸乙酯萃取多次，再用氯仿萃取，得到貝母總生物堿，然后再用硅膠柱層析貝母總生物堿，氯仿-甲醇洗脫，洗脫液濃縮后得到貝母甲素，同樣方法也可以得到貝母乙素，只是收集時間不同。但傳統(tǒng)方法萃取復雜，需反復萃取，萃取時間長，萃取效率低，且是以貝母鱗莖作為原料，而貝母花大多腐爛在田野中，得不到利用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題是提供一種提取簡單、時間短、效率高的用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法。
[0004]本發(fā)明解決上述技術問題所采用的技術方案為:用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，其步驟如下:
a、將當日摘取的鮮貝母花風干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，裝入超臨界萃取爸中；
b、在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取時間I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g貝母花粉末萃取后用20?30ml甲醇吸收；
C、吸收液用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析速度為每小時兩個柱床體積流速，層析后先用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，然后用2個柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，再用8個柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa條件下減壓濃縮30?50 min，得到濃縮液；d、濃縮液用100目硅膠柱層析，每小時以4?6柱床體積流速用體積比17:2的乙酸乙酯-甲醇混合液洗脫，收集270?305 min洗脫液，濃縮干燥，得到白色的貝母乙素。
[0005]與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的優(yōu)點在于用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，貝母花粉末在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min，萃取時間I?3h，再用甲醇吸收，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮30?50 min，濃縮后用100目硅膠柱層析，乙酸乙酯-甲醇混合液洗脫，收集270-305 min洗脫液，濃縮干燥，得到白色的貝母乙素。該方法步驟簡單，提取時間縮短，提取效率較高，每公斤浙貝母花可以提取貝母乙素2.7克左右，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價值。
【具體實施方式】
[0006]以下結合實施例對本發(fā)明作進一步詳細描述。
[0007]實施例1
將當日摘取的鮮貝母花(可以是浙貝母、川貝母等)風干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，稱重50g，裝入超臨界萃取釜中，萃取溫度為38°C，C(V流體壓力為33MPa，夾帶劑乙醇流速0.25ml/min，萃取時間2h，萃取物用10?15ml甲醇吸收后得吸收液，吸收液DlOl型大孔樹脂層析柱層析，以每小時兩個柱床體積流速用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，然后用2個柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，再用8個柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液，貝母花在450?500Pa條件下減壓濃縮30?50 min,得到濃縮液，濃縮液用100目硅膠柱層析，每小時以4?6柱床體積流速用體積比17:2的乙酸乙酯-甲醇混合液洗脫，收集270?305 min洗脫液，濃縮干燥，得到白色的貝母乙素0.135克，采用超高效液相色譜法-蒸發(fā)光散射法測定含量，純度達到99.45%ο
[0008]實施例2
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為30°C，C(V流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.20ml/min，萃取時間3h，萃取物用30ml甲醇吸收后得吸收液，得到白色的貝母乙素0.132克。
[0009]實施例3
與實施例1基本相同，所不同的只是萃取溫度為50 °C，C(V流體壓力為40MPa，夾帶劑乙醇流速0.50ml/min，萃取時間lh，萃取物用20ml甲醇吸收后得吸收液，得到白色的貝母乙素0.134克。
【主權項】
1.用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，其特征在于步驟如下: a、將當日摘取的鮮貝母花風干后粉碎，過45?60目篩，得到貝母花粉末，裝入超臨界萃取爸中； b、在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30?50°C，C(V流體壓力為20?40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2?0.5ml/min,萃取時間I?3h，萃取物用甲醇吸收后得吸收液，其中10g貝母花粉末萃取后需用20?30ml甲醇吸收； C、吸收液用DlOl型大孔樹脂層析柱層析，層析速度為每小時兩個柱床體積流速，層析后先用蒸餾水洗層析柱，洗至流出液無色，然后用2個柱床體積的質(zhì)量百分濃度50%乙醇洗層析柱，再用8個柱床體積的質(zhì)量百分濃度95%乙醇洗脫，收集95%乙醇洗脫的洗脫液得到貝母花洗脫液，貝母花洗脫液在450?500Pa條件下減壓濃縮30?50 min，得到濃縮液； d、濃縮液用100目硅膠柱層析，每小時以4?6柱床體積流速用體積比17:2的乙酸乙酯-甲醇混合液洗脫，收集270?305 min洗脫液，濃縮干燥，得到白色的貝母乙素。2.如權利要求1所述的用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，其特征在于步驟b中，萃取溫度為38°C，C(V流體壓力為33MPa，夾帶劑乙醇流速0.25ml/min，萃取時間2h。3.如權利要求1所述的用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，其特征在于步驟b中，萃取溫度為30°C，C(V流體壓力為20MPa，夾帶劑乙醇流速0.20ml/min,萃取時間3h。
【專利摘要】本發(fā)明公開了用超臨界流體從貝母花中提取貝母乙素的方法，貝母花粉末在超臨界萃取釜中，萃取溫度為30～50℃，CO2流體壓力為20～40MPa，夾帶劑乙醇流速0.2～0.5ml/min，萃取時間1～3h，再用甲醇吸收，然后用大孔樹脂層析柱層析，乙醇洗脫，95%乙醇洗脫的貝母花洗脫液減壓濃縮30～50min，濃縮后用100目硅膠柱層析，乙酸乙酯-甲醇混合液洗脫，收集270～305min洗脫液，濃縮干燥，得到白色的貝母乙素。該方法步驟簡單，提取時間縮短，提取效率較高，每公斤浙貝母花可以提取貝母乙素2.7克左右，且將貝母花充分利用，提高種植貝母的價值。
【IPC分類】C07J71/00
【公開號】CN105218620
【申請?zhí)枴緾N201510676865
【發(fā)明人】王強, 戴永峰
【申請人】浙江大學寧波理工學院
【公開日】2016年1月6日
【申請日】2015年10月20日