專利名稱：無(wú)籽刺梨種苗快速擴(kuò)繁的方法
無(wú)籽刺梨種苗快速擴(kuò)繁的方法技術(shù)領(lǐng)域
本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)中的一項(xiàng)苗木生產(chǎn)應(yīng)用技術(shù)，主要是通過(guò)反復(fù)誘導(dǎo)無(wú)籽刺梨腋芽來(lái)進(jìn)行快速培育組培苗的方法。
背景技術(shù)：
無(wú)籽刺梨(愈sa俗稱搭鉤刺梨，為貴州特有種，屬薔薇科攀援性多年生常綠灌木，高4-6m，生長(zhǎng)強(qiáng)旺。小枝和葉柄紫紅色，具稀少?gòu)澢钠ご?，被灰白色絨毛。羽狀復(fù)葉，具小葉7-9枚，小葉橢圓形或倒卵狀橢圓形，長(zhǎng)1. 5-3. 5厘米，寬1-2. 5厘米，先端急尖或鈍，基部近圓形，兩側(cè)不對(duì)稱，兩面無(wú)毛，托葉附生于葉柄上，披針形。花3-5朵組成傘房花序，頂生。果實(shí)扁球形，徑約2厘米，灰棕色，疏被刺。成熟果暗橙黃色，果面皮刺基本脫落。由于無(wú)籽刺梨的雄蕊敗育，幾乎沒(méi)有花粉，因此種子敗育，無(wú)籽，故叫做無(wú)籽刺梨。無(wú)籽刺梨人工種植后，一般第三年便可掛果，成熟的刺梨果肉肥厚、味酸甜，其果實(shí)內(nèi)含有豐富的維生素C，被稱為“維C之王”，因其食補(bǔ)、藥補(bǔ)功效明顯，又被稱為“延年果”，是加工保健食品的上等原料，具有多種醫(yī)療保健作用，鮮食加工均宜。
此外，無(wú)籽刺梨生長(zhǎng)快，根系發(fā)達(dá)，適宜山地造林，特別是山區(qū)可作為重要的經(jīng)濟(jì)樹(shù)種進(jìn)行開(kāi)發(fā)，有效帶動(dòng)當(dāng)?shù)匕傩罩赂?。由于無(wú)籽刺梨屬野生資源，分布范圍窄，資源較少，無(wú)法通過(guò)種子繁殖，所以自然繁殖較慢。采用傳統(tǒng)的扦插方法進(jìn)行無(wú)籽刺梨的種苗繁育，其繁殖速度相對(duì)較慢，需要的材料多；特別是對(duì)于優(yōu)良無(wú)性系材料的擴(kuò)繁，材料數(shù)量少，短時(shí)間內(nèi)很難大量擴(kuò)繁，不能有效的滿足企業(yè)及種植戶對(duì)優(yōu)質(zhì)種苗的需求，采用組培的方法其繁殖系數(shù)達(dá)3-4倍，有效解決了無(wú)籽刺梨優(yōu)良材料快速擴(kuò)繁的問(wèn)題，從而使得優(yōu)良無(wú)性系材料能夠大面積推廣，為高產(chǎn)奠定堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種遺傳性狀穩(wěn)定、培養(yǎng)過(guò)程簡(jiǎn)單、易生根，移栽容易成活的無(wú)籽刺梨快速擴(kuò)繁的方 法。
本發(fā)明是一種無(wú)籽刺梨種苗快速擴(kuò)繁的方法，按下列步驟實(shí)施(1)腋芽誘導(dǎo)的啟動(dòng)培養(yǎng)，選取優(yōu)良的無(wú)籽刺梨的當(dāng)年生嫩莖，將嫩莖先用流水沖洗 10-15分鐘后，剪成5cm長(zhǎng)的莖段進(jìn)行消毒，消毒采用75%的酒精和O. 1%升汞組合消毒，酒精30秒，升汞8-12分鐘，消毒后用無(wú)菌水沖洗3-4遍，用消毒過(guò)的濾紙吸干莖段上的水分， 再將其切成帶I個(gè)葉腋的莖段，斜插在腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA0. 5-2. 0mg/L+IBA0. 1-0. 3mg/L, 10天后從葉腋處位置誘導(dǎo)出腋芽，繼續(xù)培養(yǎng)，整個(gè)啟動(dòng)培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000LUX，光照時(shí)間12小時(shí)/ 天，溫度在23-26 °C間；(2)腋芽的增殖誘導(dǎo)，當(dāng)腋芽長(zhǎng)高成4厘米以上的小苗后，將其切成2厘米長(zhǎng)的莖段， 每段帶1-3個(gè)葉腋，然后斜插在腋芽增殖培養(yǎng)基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，增殖培養(yǎng)基為MS+ZT1. 0-1. 5mg/L+IBA0. 05-0. lmg/L, 15天后，誘導(dǎo)出腋芽，同時(shí)在腋芽基部會(huì)誘導(dǎo)出1-3個(gè)不定芽小苗，再經(jīng)過(guò)30天的培養(yǎng)，待小苗長(zhǎng)到4厘米高，再將小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段轉(zhuǎn)到相同的腋芽增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)45天的培養(yǎng)，誘導(dǎo)出來(lái)的小苗又可長(zhǎng)高到4-5厘米，反復(fù)將高4-5厘米的小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段在增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，可以使得無(wú)籽刺梨進(jìn)行快速大量的擴(kuò)繁，其增殖倍數(shù)為3-4倍，整個(gè)腋芽增殖培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23-26。。間；
(3)無(wú)籽刺梨組培苗的生根，將長(zhǎng)高到4厘米的小苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0. 01-0. 05mg/L +ΙΑΑ0. 01-0. 05mg/L, 15天后可生根，得到無(wú)籽刺梨生根苗，生根率達(dá)95%以上，整個(gè)生根培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在 23-26。。間；
(4)無(wú)籽刺梨生根苗的清洗及移栽當(dāng)無(wú)籽刺梨生根苗的根長(zhǎng)到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗凈沾附在根部的培養(yǎng)基，之后進(jìn)行煉苗移栽，移栽基質(zhì)配比為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1，移栽后注意棚內(nèi)控溫控濕，溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15·天后成活，成活率達(dá)90%以上，成活后移至IOcmX IOcm的營(yíng)養(yǎng)袋中，移栽基質(zhì)為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1。該方法結(jié)合了組培技術(shù)及扦插技術(shù)，利用在組培過(guò)程中的無(wú)菌環(huán)境，采用微型扦插的方法，首先從無(wú)籽刺梨的葉腋處誘導(dǎo)出腋芽，不必經(jīng)過(guò)脫分化和再分化，當(dāng)試管苗長(zhǎng)大伸長(zhǎng)后，將其剪成帶I葉或2葉的莖段，一定時(shí)間后腋芽萌發(fā)，同時(shí)腋芽也會(huì)萌生出1-2個(gè)小芽，之后莖伸長(zhǎng)，下端不生根。爾后再將莖切成小段，利用腋芽萌發(fā)成植株，這樣周而復(fù)始繼代培養(yǎng)繁殖苗木。該方法和扦插繁殖一樣，不過(guò)是在無(wú)菌條件下的試管內(nèi)進(jìn)行，由于沒(méi)有經(jīng)過(guò)脫分化和再分化階段，每次轉(zhuǎn)苗可增加2-4倍。它具有遺傳性狀穩(wěn)定、培養(yǎng)過(guò)程簡(jiǎn)單、易生根，移栽容易成活的優(yōu)點(diǎn)。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1:實(shí)施時(shí)間為2012年，無(wú)籽刺梨組培苗批量生產(chǎn)在昆明美蘭花卉種苗有限責(zé)任公司進(jìn)行。按下列步驟實(shí)施
(I)腋芽誘導(dǎo)的啟動(dòng)培養(yǎng)，于2012年3月選取優(yōu)良的無(wú)籽刺梨的當(dāng)年生嫩莖，啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA1. 0mg/L+IBA0. lmg/L，消毒后共接種2000瓶，每瓶接種I個(gè)葉腋，莖段長(zhǎng)度2厘米。10天后從葉腋處位置誘導(dǎo)出腋芽，去除污染后，腋芽誘導(dǎo)率90%以上，20天后腋芽長(zhǎng)至4厘米以上，進(jìn)行一下步操作。啟動(dòng)培養(yǎng)條件為光強(qiáng)1000-2000LUX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23-26°C間。(2)腋芽的增殖誘導(dǎo)，當(dāng)腋芽長(zhǎng)高到4厘米以上后，將其再切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段，接種于增殖培養(yǎng)基上，增殖培養(yǎng)基為MS+ZT1. 0mg/L+IBA0. 05mg/L。培養(yǎng)15天后，在誘導(dǎo)出腋芽的同時(shí)，在腋芽基部會(huì)誘導(dǎo)出2個(gè)不定芽小苗，待小苗長(zhǎng)到4厘米以上后，再將小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段轉(zhuǎn)到相同的增殖培養(yǎng)基上，重復(fù)腋芽的增殖培養(yǎng)過(guò)程，使得無(wú)籽刺梨進(jìn)行快速大量的擴(kuò)繁，其增殖系數(shù)為3。培養(yǎng)條件為光強(qiáng)1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23_26°C間。(3)無(wú)籽刺梨組培苗的生根。2012年10月開(kāi)始對(duì)小苗進(jìn)行生根，生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0. Olmg/L +IAAO. Olmg/L，15天后生根率達(dá)98%以上，培養(yǎng)條件為光強(qiáng) 1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23_26°C間。
(4)無(wú)籽刺梨生根苗的清洗及移栽當(dāng)根長(zhǎng)到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗 凈后進(jìn)行煉苗移栽，棚內(nèi)溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15天后小苗開(kāi)始生長(zhǎng)， 成活率達(dá)99%以上，I個(gè)月后，轉(zhuǎn)到營(yíng)養(yǎng)袋中，營(yíng)養(yǎng)袋規(guī)格為IOcmX 10cm，再養(yǎng)護(hù)3個(gè)后，苗高20厘米以上，進(jìn)行上山造林。
權(quán)利要求
1.一種無(wú)籽刺梨種苗快速擴(kuò)繁的方法，其特征在于包括腋芽誘導(dǎo)、組培苗生根、生根苗移栽等步驟，具體是 (1)腋芽誘導(dǎo)的啟動(dòng)培養(yǎng)，選取優(yōu)良的無(wú)籽刺梨的當(dāng)年生嫩莖，將嫩莖先用流水沖洗10-15分鐘后，剪成5cm左右的莖段進(jìn)行消毒，消毒采用75%酒精和O. 1%升汞組合消毒，酒精30秒，升汞8-12分鐘，消毒后用無(wú)菌水沖洗3-4遍，用消毒過(guò)的濾紙吸干莖段上的水分，再將其切成帶I個(gè)葉腋的莖段，斜插在腋芽啟動(dòng)培養(yǎng)基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，啟動(dòng)培養(yǎng)基為MS+6-BA0. 5-2. 0mg/L+IBA0. 1-0. 3mg/L, 10天后從葉腋處位置誘導(dǎo)出腋芽，繼續(xù)培養(yǎng)，整個(gè)啟動(dòng)培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000LUX，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23-26 °C間； (2)腋芽的增殖誘導(dǎo)，當(dāng)腋芽長(zhǎng)高成4厘米以上的小苗后，將其切成2厘米長(zhǎng)的莖段，每段帶1-3個(gè)葉腋，然后斜插在腋芽增殖培養(yǎng)基上，葉腋朝上，保證葉腋處能夠得到充分的光照，增殖培養(yǎng)基為MS+ZT1. 0-1. 5mg/L+IBA0. 05-0. lmg/L, 15天后，誘導(dǎo)出腋芽，同時(shí)在腋芽基部會(huì)誘導(dǎo)出1-3個(gè)不定芽小苗，再經(jīng)過(guò)30天的培養(yǎng)，小苗可長(zhǎng)到4厘米高，之后再將小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段轉(zhuǎn)到相同的腋芽增殖培養(yǎng)基上，經(jīng)過(guò)45天的培養(yǎng)，誘導(dǎo)出來(lái)的小苗又可長(zhǎng)高到4-5厘米，反復(fù)將高4-5厘米的小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段在增殖培養(yǎng)基上進(jìn)行增殖培養(yǎng)，其增殖倍數(shù)為3-4倍，整個(gè)腋芽增殖培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23_26°C間； (3)無(wú)籽刺梨組培苗的生根，將長(zhǎng)高到4厘米的小苗轉(zhuǎn)接到生根培養(yǎng)基上，生根培養(yǎng)基為1/2MS+IBA0. 01-0. 05mg/L +ΙΑΑ0. 01-0. 05mg/L, 15天后可生根，得到無(wú)籽刺梨生根苗，整個(gè)生根培養(yǎng)的條件均為光強(qiáng)1000-2000Lux，光照時(shí)間12小時(shí)/天，溫度在23_26°C間； (4)無(wú)籽刺梨生根苗的清洗及移栽當(dāng)無(wú)籽刺梨生根苗的根長(zhǎng)到2厘米以上后，直接取出生根苗，洗凈沾附在根部的培養(yǎng)基，之后進(jìn)行煉苗移栽，移栽基質(zhì)配比按體積比為腐殖土 珍珠巖=5 :1，移栽后注意棚內(nèi)控溫控濕，溫度控制在25-30度之間，濕度在80%以上，15天后成活，成活后移至IOcmXlOcm的營(yíng)養(yǎng)袋中，移栽基質(zhì)為按體積比腐殖土 珍珠巖=5 :1。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物無(wú)性繁殖苗木的方法，特別是一種無(wú)籽刺梨種苗快速擴(kuò)繁的方法，按以下步驟進(jìn)行1.腋芽誘導(dǎo)啟動(dòng)培養(yǎng)階段；2.腋芽快速增殖階段，將伸長(zhǎng)的腋芽切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段，接種于增殖培養(yǎng)基上，進(jìn)行增殖培養(yǎng)，待小苗長(zhǎng)高到4厘米以上后，再將小苗切成2厘米長(zhǎng)帶1-3個(gè)葉腋的莖段進(jìn)行腋芽增殖誘導(dǎo)，重復(fù)2此過(guò)程便可進(jìn)行無(wú)籽刺梨的大量擴(kuò)繁；3.組培生根煉苗移栽階段，將獲得的增殖苗接種于生根培養(yǎng)基后，待根系長(zhǎng)至2-3厘米后，洗凈根上的培養(yǎng)基，移栽到煉苗基質(zhì)(腐殖土珍珠巖=51)中，成活后移至營(yíng)養(yǎng)袋中。煉苗4個(gè)月后，可直接用于造林。該方法操作簡(jiǎn)單，增殖系數(shù)穩(wěn)定，苗木質(zhì)量有保證，可以有效地滿足工廠化生產(chǎn)需求。
文檔編號(hào)A01H4/00GK102986535SQ20121054199
公開(kāi)日2013年3月27日 申請(qǐng)日期2012年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月14日
發(fā)明者李永和, 唐軍榮, 辛靜, 辛培堯, 林 源 申請(qǐng)人:西南林業(yè)大學(xué)