專利名稱：白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生物工程領(lǐng)域，特別涉及一種培養(yǎng)基及其制備方法。
背景技術(shù)：
白靈菇是一種食用和藥用價(jià)值都很高的食用菌。白靈菇的菇體色澤潔白、肉質(zhì)細(xì)膩、味道鮮美，被譽(yù)為“草原上的牛肝菌”，頗受消費(fèi)者的青睞。白靈菇營養(yǎng)豐富，據(jù)科學(xué)測定，其蛋白質(zhì)含量占干菇的20%，含有17種氨基酸，多種維生素和無機(jī)鹽。白靈菇還具有一定的醫(yī)藥價(jià)值，有消積、殺蟲、鎮(zhèn)咳、消炎和防治婦科腫瘤等功效。它還含有真菌多糖和維生素等生理活性物質(zhì)及多種礦物質(zhì)，具有調(diào)節(jié)人體生理平衡，增強(qiáng)人體免疫功能的作用。 白靈菇生產(chǎn)所用的菌種有固體菌種和液體菌種，液體菌種相對固體菌種具有成本低、培養(yǎng)時(shí)間短、發(fā)菌快、生物轉(zhuǎn)化率高、菌種純度高等優(yōu)勢，是食用菌產(chǎn)業(yè)工廠化技術(shù)革新的趨勢。而液體菌種主要依靠吸收液體培養(yǎng)基的養(yǎng)分來生長。目前現(xiàn)有的白靈菇液體菌種培養(yǎng)基及制備方法存在制備成功率低、菌絲生長不適應(yīng)、操作專業(yè)技術(shù)要求高、不具備通用性等缺點(diǎn)，無法大批量普及使用。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于，提供一種白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，解決以上技術(shù)問題。本發(fā)明的另一目的在于，提供一種白靈菇液體菌種的制備方法，解決以上技術(shù)問題。本發(fā)明所解決的技術(shù)問題可以采用以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，包括原料、水溶液，其特征在于，所述水溶液中包括以下重量比的原料酵母粉O. 1-0. 5%、糖分1-2%、豆粉O. 2-1%、磷酸二氫鉀O. 05-0. 1%、硫酸鎂O. 05-0. 1%。本發(fā)明采用上述組分的培養(yǎng)基原料，原料來源豐富、價(jià)格低廉，采用本發(fā)明培養(yǎng)出的白靈菇菌絲體生長快、活力強(qiáng)、菌絲含量高，接種后的菌種萌發(fā)率好、發(fā)酵周期短、成品率高。另外，豆粉作為白靈菇生長用氮源物質(zhì)，菌絲生長快速、粗壯。所述原料還包括蛋白胨O. 2-2%。蛋白胨也作為一種氮源物質(zhì)，提高白靈菇的菌絲生長。 所述原料還可以包括麥麩O. 3-0. 5%、玉米粉O. 3-0. 5%中的至少一種。所述糖分可以采用蔗糖，也可以采用葡萄糖、麥芽糖或者白砂糖中的至少一種或多種。優(yōu)選采用蔗糖，相對其他糖分，蔗糖更適合作為白靈菇的碳源，所述蔗糖與酵母粉之間的反應(yīng)，相對葡萄糖、麥芽糖與酵母粉之間的反應(yīng)更為穩(wěn)定，成本更為低廉，利用效果更佳。所述原料優(yōu)選包括以下重量比組合酵母粉O. 2%、糖分2%、豆粉1%、磷酸二氫鉀
O.08%、硫酸鎂O. 08%、蛋白胨1%。
所述原料還包括以下比重組分維生素0-0. 5%或葉酸0-0. 5%中的至少一種。所述維生素采用維生素B I或者維生素B2中的至少一種，維生素BI、維生素B2可促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。葉酸作為一種白靈菇菌絲生長所需的氮源，適量的葉酸可促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。白靈菇液體菌種的制備方法，其特征在于，包括如下步驟I)培養(yǎng)基配置將原料中的糖分、硫酸鎂、磷酸二氫鉀溶于水中充分?jǐn)嚢瑁敝寥芙獬砂氤善啡芤?；再將所述原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉加入所述半成品溶液中攪拌溶解，并去?制成培養(yǎng)基液體。2)培養(yǎng)基調(diào)整用PH調(diào)節(jié)劑調(diào)整所述培養(yǎng)基液體的PH值。
3)培養(yǎng)基滅菌將所述培養(yǎng)基液體倒入種子罐內(nèi)，送入滅菌設(shè)備內(nèi)進(jìn)行至少30分鐘的滅菌，在不損失營養(yǎng)的情況下，殺滅所述培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌。4)接種滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至20_25°C，接入白靈菇菌種后，將所述培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23 °C后，將所述培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)7-8天即可制得白靈菇菌種。步驟I)中，還可以加入原料麥麩、玉米粉、維生素、葉酸中的至少一種，可以在所述半成品溶液中與豆粉等原料一起加入。步驟2)中，所述培養(yǎng)基液體的PH值調(diào)節(jié)為6. 0-6. 5。步驟3)中，在對所述培養(yǎng)基液體滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。在高溫高壓狀態(tài)下，可完全殺滅所述培養(yǎng)基液體中的微生物，避免白靈菇菌絲在培育過程中受污染。有益效果由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明可提高白靈菇菌絲的存活率，使白靈菇菌絲生長快、活力強(qiáng)、穩(wěn)定性好，接種種植后，菌絲抗逆性強(qiáng)，不易衰老，可快速生長萌發(fā)。


圖I為本發(fā)明制備方法的流程圖。
具體實(shí)施例方式為了使本發(fā)明實(shí)現(xiàn)的技術(shù)手段、創(chuàng)作特征、達(dá)成目的與功效易于明白了解，下面結(jié)合具體圖示進(jìn)一步闡述本發(fā)明。白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，包括原料、水溶液，水溶液中包括以下重量比的原料酵母粉O. 1-0. 5%、糖分1-2%、豆粉O. 2-1%、磷酸二氫鉀O. 05-0. 1%、硫酸鎂O. 05-0. 1%。本發(fā)明采用上述組分的培養(yǎng)基原料，原料來源豐富、價(jià)格低廉，采用本發(fā)明培養(yǎng)出的白靈菇菌絲體生長快、活力強(qiáng)、菌絲含量高，接種后的菌種萌發(fā)率好、發(fā)酵周期短、成品率高。另外，豆粉作為白靈菇生長用氮源物質(zhì)，菌絲生長快速、粗壯。原料還包括蛋白胨O. 2_2%。蛋白胨也作為一種氮源物質(zhì)，提高白靈菇的菌絲生長。原料還可以包括麥麩O. 3-0. 5%、玉米粉O. 3-0. 5%中的至少一種。糖分可以采用蔗糖，也可以采用葡萄糖、麥芽糖或者白砂糖，優(yōu)選采用蔗糖，相對其他糖分，蔗糖更適合作為白靈菇的碳源，蔗糖與酵母粉之間的反應(yīng)，相對葡萄糖、麥芽糖與酵母粉之間的反應(yīng)更為穩(wěn)定，成本更為低廉，利用效果更佳。原料優(yōu)選包括以下重量比組合酵母粉O. 2%、糖分2%、豆粉1%、磷酸二氫鉀O. 08%、硫酸鎂O. 08%、蛋白胨1%。原料還包括以下比重組分維生素0-0. 5%、葉酸0-0. 5%。維生素采用維生素BI或者維生素B2中的至少一種，維生素BI、維生素B2可促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。葉酸作為一種白靈菇菌絲生長所需的氮源，適量的葉酸可促進(jìn)白靈菇菌絲的生長。參照圖1，白靈菇液體菌種的制備方法，包括如下步驟第一步，培養(yǎng)基配置將原料中的糖分、硫酸鎂、磷酸二氫鉀溶于水中充分?jǐn)嚢?，直至溶解成半成品溶液；再將原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉加入半成品溶液中攪拌溶解，并去泡，制成培養(yǎng)基液體。還可以加入原料麥麩、玉米粉、維生素、葉酸中的至少一種，可以在半成品溶液中與豆粉等原料一起加入，也可以與糖分一起溶解。 第二步，培養(yǎng)基調(diào)整用PH調(diào)節(jié)劑調(diào)整培養(yǎng)基液體的PH值。培養(yǎng)基液體的PH值調(diào)節(jié)為6. 0-6. 5為佳。第三步，培養(yǎng)基滅菌將培養(yǎng)基液體倒入種子罐內(nèi)，送入滅菌設(shè)備內(nèi)進(jìn)行至少30分鐘的滅菌，在不損失營養(yǎng)的情況下，殺滅培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌。在對培養(yǎng)基液體滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。在高溫高壓狀態(tài)下，可更好的去除培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌，避免白靈菇菌絲在培育過程中受污染。第四步，接種滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至20-25°C，接入白靈菇菌種后，將培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23 °C后，將培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)7-8天即可制得白靈菇菌種。豆粉、蛋白胨作為持效氮源，酵母粉作為速效氮源，可為白玉菇菌絲的生長提供足夠的氮養(yǎng)料，有利于菌絲快速生長。而糖分、玉米粉作為碳源可與氮源相配合促進(jìn)菌絲生長。在實(shí)際操作時(shí)，可在原料優(yōu)選組合的基礎(chǔ)上，降入維生素和葉酸并進(jìn)行適當(dāng)調(diào)整。實(shí)施例I :原料包括以下重量比組合酵母粉O. 1%、蔗糖1%、豆粉O. 2%、磷酸二氫鉀O. 05%、硫酸鎂O. 05%、蛋白胨O. 2%、維生素O. 1%。將原料中的蔗糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀、維生素按上述比例溶于水中充分?jǐn)嚢瑁敝寥芙獬砂氤善啡芤?；再原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉按上述比例加入半成品溶液中攪拌溶?并去泡,制成培養(yǎng)基液體。在用鹽酸對培養(yǎng)基液體進(jìn)行PH至調(diào)整，使其PH值控制在6，保持弱酸性，以便白靈菇生長。然后將調(diào)制完畢的培養(yǎng)基液體放入種子罐內(nèi)，并將種子罐放入滅菌設(shè)備進(jìn)行滅菌30分鐘，滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。在高溫高壓狀態(tài)下，可更好的去除培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌，避免白靈菇菌絲在培育過程中受污染。滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至20-25°C，接入白靈菇菌種后，將培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23°C后，將培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)7天即可制得白靈菇菌種。實(shí)施例2 原料包括以下重量比組合酵母粉O. 5%、葡萄糖2%、豆粉1%、磷酸二氫鉀O. 1%、硫酸鎂O. 1%、蛋白胨1%、維生素O. 5%、葉酸O. 5%。
將原料中的葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀溶于水中充分?jǐn)嚢瑁敝寥芙獬砂氤善啡芤?；再將原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉、維生素、葉酸加入半成品溶液中攪拌溶解，并去泡，制成培養(yǎng)基液體。使用對菌類無害的PH調(diào)節(jié)劑對培養(yǎng)基液體的PH值進(jìn)行調(diào)整，使培養(yǎng)基液體的PH值為6. 5。然后在對培養(yǎng)基液體倒入種子罐，放入滅菌設(shè)備內(nèi)進(jìn)行40分鐘的滅菌，在不損失營養(yǎng)的情況下，殺滅培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌。在對培養(yǎng)基液體滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。在高溫高壓狀態(tài)下，可更好的去除培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌，避免白靈菇菌絲在培育過程中受污染。滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至25°C以下，接入白靈菇菌種后，將培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23 °C后，將培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)8天即可制得白靈菇菌種。實(shí)施例3 原料包括以下重量比組合酵母粉O. 3%、糖分I. 5%、豆粉O. 6%、磷酸二氫鉀O. 08%、硫酸鎂O. 07%、蛋白胨O. 4%、維生素O. 2%、葉酸O. 3%。
將原料中的葡萄糖、硫酸鎂、磷酸二氫鉀溶于水中充分?jǐn)嚢?，直至溶解成半成品溶液；再將原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉、維生素、葉酸加入半成品溶液中攪拌溶解，并去泡，制成培養(yǎng)基液體。使用對菌類無害的PH調(diào)節(jié)劑對培養(yǎng)基液體的PH值進(jìn)行調(diào)整，使培養(yǎng)基液體的PH值為6-6. 5。然后在對培養(yǎng)基液體倒入種子罐，放入滅菌設(shè)備內(nèi)進(jìn)行至少30分鐘的滅菌，在不損失營養(yǎng)的情況下，殺滅培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌。在對培養(yǎng)基液體滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。在高溫高壓狀態(tài)下，可更好的去除培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌，避免白靈菇菌絲在培育過程中受污染。滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至25 °C以下，接入白靈菇菌種后，將培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23°C后，將培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)7天即可制得白靈菇菌種。以上顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，在不脫離本發(fā)明精神和范圍的前提下，本發(fā)明還會有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的本發(fā)明范圍內(nèi)。本發(fā)明要求保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求書及其等效物界定。
權(quán)利要求
1.白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，包括原料、水溶液，其特征在于，所述水溶液中包括以下重量比的原料酵母粉O. 1-0. 5%、糖分1-2%、豆粉O. 2-1%、磷酸二氫鉀O. 05-0. 1%、硫酸鎂O.05-0. 1%。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，其特征在于所述原料還包括蛋白胨O. 2-2%。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，其特征在于所述原料還包括麥麩O. 3-0. 5%、玉米粉O. 3-0. 5%中的至少一種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I所述的白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，其特征在于所述糖分采用蔗糖、葡萄糖、麥芽糖或者白砂糖中的至少一種。
5.根據(jù)權(quán)利要求I至5中任意一項(xiàng)所述的白靈燕液體菌種培養(yǎng)基配方,其特征在于所述原料還包括以下比重組分維生素0-0. 5%或葉酸0-0. 5%中的至少一種。
6.白靈菇液體菌種的制備方法，其特征在于，包括如下步驟 O培養(yǎng)基配置將原料中的糖分、硫酸鎂、磷酸二氫鉀溶于水中充分?jǐn)嚢?，直至溶解成半成品溶液；再將所述原料中的豆粉、蛋白胨、酵母粉加入所述半成品溶液中攪拌溶解，并去泡，制成培養(yǎng)基液體； 2)培養(yǎng)基調(diào)整用PH調(diào)節(jié)劑調(diào)整所述培養(yǎng)基液體的PH值； 3)培養(yǎng)基滅菌將所述培養(yǎng)基液體倒入種子罐內(nèi)，送入滅菌設(shè)備內(nèi)進(jìn)行至少30分鐘的滅菌，在不損失營養(yǎng)的情況下，殺滅所述培養(yǎng)基液體中的細(xì)菌； 4)接種滅菌完成后，將培養(yǎng)基溶液冷卻至20-25°C，接入白靈菇菌種后，將所述培養(yǎng)溫度調(diào)整至20-23°C后，將所述培養(yǎng)基溶液進(jìn)行有氧培養(yǎng)，發(fā)酵培養(yǎng)7-8天即可制得白靈菇菌種。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的白靈菇液體菌種的制備方法，其特征在于步驟I)中，還加入原料麥麩、玉米粉、維生素、葉酸中的至少一種。
8.根據(jù)權(quán)利要求6所述的白靈菇液體菌種的制備方法，其特征在于步驟2)中，所述培養(yǎng)基液體的PH值調(diào)節(jié)為6-6. 5。
9.根據(jù)權(quán)利要求6所述的白靈菇液體菌種的制備方法，其特征在于步驟3)中，在對所述培養(yǎng)基液體滅菌時(shí)，保持溫度123°C，壓力為I. 2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)大氣壓下滅菌。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種生物工程領(lǐng)域，特別涉及一種培養(yǎng)基及其制備方法。白靈菇液體菌種培養(yǎng)基配方，包括原料、水溶液，水溶液中包括以下重量比的原料酵母粉0.1-0.5%、糖分1-2%、豆粉0.2-1%、磷酸二氫鉀0.05-0.1%、硫酸鎂0.05-0.1%。由于采用上述技術(shù)方案，本發(fā)明可提高白靈菇菌絲的存活率，使白靈菇菌絲生長快、活力強(qiáng)、穩(wěn)定性好，接種種植后，菌絲抗逆性強(qiáng)，不易衰老，可快速生長萌發(fā)。
文檔編號C05G1/00GK102964156SQ20121031671
公開日2013年3月13日 申請日期2012年8月30日 優(yōu)先權(quán)日2012年8月30日
發(fā)明者問卓君 申請人:上海雪榕生物科技股份有限公司