專利名稱：提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種提高病原線蟲耐寒能力的方法。
背景技術(shù)：
昆蟲病原線蟲是害蟲的重要天敵，具有廣譜、高效、對(duì)人畜和環(huán)境安全等優(yōu)點(diǎn)，這種新型生物殺蟲劑有廣闊的應(yīng)用前景。目前它的繁殖和應(yīng)用技術(shù)很成熟，但引進(jìn)的大多數(shù)昆蟲病原線蟲產(chǎn)品不適應(yīng)東北地區(qū)田間低溫環(huán)境，是其推廣應(yīng)用的主要問題。在中國(guó)的東北地區(qū)，春秋季晝夜溫差大，夜間經(jīng)常降至o°c以下，白天升至十幾度，不耐低溫的病原線蟲存活率降低，進(jìn)而致病力下降。我國(guó)北方的韭菜根蛆每年4、5月份是為害盛期，此時(shí)地溫較 低，不耐低溫的線蟲因田間環(huán)境溫度低使其存活率下降，導(dǎo)致防治效果差。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明為了解決昆蟲病原線蟲不適應(yīng)田間低溫環(huán)境的技術(shù)問題，提供了一種提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法。提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法按照以下步驟進(jìn)行一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入8°C 12°C的冰箱中儲(chǔ)存6 8天，然后用昆蟲病原線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲；ニ、將受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲采用White trap培養(yǎng)法進(jìn)行繁殖，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。步驟一中所述昆蟲病原線蟲是小卷蛾斯氏線蟲或芫菁夜蛾斯氏線蟲。步驟ニ中所述White trap培養(yǎng)法如下—、在直徑為60_的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有相同大小的雙層中速定性濾紙,姆皿蓋中放30頭受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底；ニ、用O. 5ml滅菌水浸潤(rùn)培養(yǎng)皿蓋中的雙層中速定性濾紙,在25°C恒溫培養(yǎng)至受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲全部死亡后，移去直徑為60mm培養(yǎng)皿底，并將直徑為60mm培養(yǎng)皿蓋置于盛有IOml滅菌水、直徑為90mm的玻璃皿內(nèi)，然后在25°C繼續(xù)恒溫20天，收集直徑為90_的玻璃皿內(nèi)的水，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。本發(fā)明用物理方法(在8°C 12°C冰箱)處理寄主昆蟲，通過低溫馴化的寄主昆蟲，保護(hù)對(duì)低溫敏感的昆蟲病原線蟲，即提高其低溫存活率。使昆蟲病原線蟲在_20°C的冰箱中30分鐘的存活率從O %提高到12% 15%，進(jìn)而提高了昆蟲病原線蟲的耐寒能力。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明技術(shù)方案不局限于以下所列舉具體實(shí)施方式
，還包括各具體實(shí)施方式
間的任意組合。
具體實(shí)施方式
一本實(shí)施方式提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法按照以下步驟進(jìn)行
一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入8°C 12°C的冰箱中儲(chǔ)存6 8天，然后用昆蟲病原線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲；ニ、將受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲采用White trap培養(yǎng)法進(jìn)行繁殖，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。
具體實(shí)施方式
ニ 本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一不同的是步驟一中所述昆蟲病原線蟲是小卷蛾斯氏線蟲或芫菁夜蛾斯氏線蟲。其它與具體實(shí)施方式
一相同。
具體實(shí)施方式
三本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一或ニ不同的是步驟ニ中所述Whitetrap培養(yǎng)法如下—、在直徑為60_的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有相同大小的雙層中速定性濾紙,姆皿蓋中放30頭受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底；ニ、用O. 5ml滅菌水浸潤(rùn)培養(yǎng)皿蓋中的雙層中速定性濾紙,在25°C恒溫培養(yǎng)至受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲全部死亡后，移去直徑為60mm培養(yǎng)皿底，并將直徑為60mm培養(yǎng)皿蓋置于盛有IOml滅菌水、直徑為90mm的玻璃皿內(nèi)，然后在25°C繼續(xù)恒溫20天，收集直徑為90mm的玻璃皿內(nèi)的水，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。其它與具體實(shí)施方式
一或二相同。
具體實(shí)施方式
四本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至三之一不同的是步驟一中將7齡黃粉蟲幼蟲放入9°C 11 °C的冰箱中儲(chǔ)存6 8天。其它與具體實(shí)施方式
一至三之一相同。
具體實(shí)施方式
五本實(shí)施方式與具體實(shí)施方式
一至四之一不同的是步驟一中將7齡黃粉蟲幼蟲放入10°c的冰箱中儲(chǔ)存7天。其它與具體實(shí)施方式
一至四之一相同。采用下述試驗(yàn)驗(yàn)證本發(fā)明效果實(shí)驗(yàn)ー一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入10°C的冰箱中儲(chǔ)存7天，然后用小卷蛾斯氏線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受小卷蛾斯氏線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲；ニ、在直徑為60_的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有相同大小的雙層中速定性濾紙，每皿蓋中放30頭受小卷蛾斯氏線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底，用O. 5ml滅菌水浸潤(rùn)培養(yǎng)皿蓋中的雙層中速定性濾紙，在25°C恒溫培養(yǎng)26天，收集從黃粉蟲體內(nèi)繁殖出的小卷蛾斯氏線蟲；三、取500條繁殖后的小卷蛾斯氏線蟲和500條未經(jīng)低溫處理的黃粉蟲中繁殖出的小卷蛾斯氏線蟲分別放入含水量為5%、過20目篩的5g細(xì)沙中，然后將細(xì)沙放入-20°C冰箱中30分鐘,取出后置于室溫,24小時(shí)后,加IOml水,得懸浮液。將本實(shí)驗(yàn)所得懸浮液倒入有格的培養(yǎng)皿中，顯微鏡下調(diào)查線蟲存活率。調(diào)查結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)方法繁殖出的小卷蛾斯氏線蟲存活率為12. I %。未經(jīng)低溫處理的黃粉蟲中繁殖出的小卷蛾斯氏線蟲存活率為0%。實(shí)驗(yàn)ニ一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入10°C的冰箱中儲(chǔ)存7天，然后用芫菁夜蛾斯氏線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受芫菁夜蛾斯氏線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲；ニ、在直徑為60mm的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有相同大小的雙層中速定性濾紙，每皿蓋 中放30頭受芫菁夜蛾斯氏線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底，用O. 5ml滅菌水浸潤(rùn)培養(yǎng)皿蓋中的雙層中速定性濾紙，在25°C恒溫培養(yǎng)24天，收集從黃粉蟲體內(nèi)繁殖出的芫菁夜蛾斯氏線蟲；三、取500條繁殖后的芫菁夜蛾斯氏線蟲和500條未經(jīng)低溫處理的黃粉蟲中繁殖出的芫菁夜蛾斯氏線蟲分別放入含水量為5%、過20目篩的5g細(xì)沙中，然后將細(xì)沙放入-20°C冰箱中30分鐘，取出后置于室溫，24小時(shí)后，加IOml水，得懸浮液。 將本實(shí)驗(yàn)所得懸浮液倒入有格的培養(yǎng)皿中，顯微鏡下調(diào)查線蟲存活率。調(diào)查結(jié)果顯示，本實(shí)驗(yàn)方法繁殖出的芫菁夜蛾斯氏線蟲存活率為14.7%。未經(jīng)低溫處理的黃粉蟲中繁殖出的芫菁夜蛾斯氏線蟲存活率為O%。
權(quán)利要求
1.提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，其特征在于提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法按照以下步驟進(jìn)行 一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入8°C 12°c的冰箱中儲(chǔ)存6 8天，然后用昆蟲病原線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲； ニ、將受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲采用White trap培養(yǎng)法進(jìn)行繁殖，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，其特征在于步驟一中所述昆蟲病原線蟲是小卷蛾斯氏線蟲或芫菁夜蛾斯氏線蟲。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，其特征在于步驟ニ中所述White trap培養(yǎng)法如下 一、在直徑為60_的塑料培養(yǎng)皿蓋中墊有相同大小的雙層中速定性濾紙，每皿蓋中放30頭受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲，然后倒扣皿底； ニ、用O. 5ml滅菌水浸潤(rùn)培養(yǎng)皿蓋中的雙層中速定性濾紙，在25°C恒溫培養(yǎng)至受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲全部死亡后，移去直徑為60mm培養(yǎng)皿底，并將直徑為60mm培養(yǎng)皿蓋置于盛有IOml滅菌水、直徑為90mm的玻璃皿內(nèi)，然后在25°C繼續(xù)恒溫20天，收集直徑為90_的玻璃皿內(nèi)的水，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，其特征在于步驟一中將7齡黃粉蟲幼蟲放入9°C 11 °C的冰箱中儲(chǔ)存6 8天。
5.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，其特征在于步驟一中將7齡黃粉蟲幼蟲放入10°C的冰箱中儲(chǔ)存7天。
全文摘要
提高昆蟲病原線蟲耐寒能力的方法，它涉及一種提高病原線蟲耐寒能力的方法。本發(fā)明要解決引進(jìn)的昆蟲病原線蟲不適應(yīng)田間低溫環(huán)境的技術(shù)問題。本方法如下一、將7齡黃粉蟲幼蟲放入8℃～12℃的冰箱中儲(chǔ)存6～8天，然后用昆蟲病原線蟲侵染7齡黃粉蟲幼蟲，得到受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲；二、將受昆蟲病原線蟲感染的7齡黃粉蟲幼蟲采用White trap培養(yǎng)法進(jìn)行繁殖，即得提高了耐寒能力的昆蟲病原線蟲。本發(fā)明方法得到的昆蟲病原線蟲在-20℃的冰箱中30分鐘的存活率從0％提高到12％～15％。
文檔編號(hào)A01K67/033GK102657142SQ201210168059
公開日2012年9月12日 申請(qǐng)日期2012年5月28日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月28日
發(fā)明者李春杰 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院東北地理與農(nóng)業(yè)生態(tài)研究所