專利名稱：從赤霉素A₄與A₇的混合物中分離赤霉素A₄的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種赤霉素A4的分離方法，尤其是一種從赤霉素A4 與A7的混合物中分離赤霉素A4的方法。
背景技術：
赤霉素是一族四環(huán)雙萜羧酸類化合物，其基本結構是赤霉素烷。 由其衍生的同系物所表現(xiàn)的生理活性差別甚大。赤各種赤霉素之間的差別僅在于官能團的多少以及排列位置的差異，通常以Al5 A2， A3….,AN來表示。赤霉素A3(GA3)是目前應用最廣的植物生長激素之一。隨著研究的深入，對該族的其它同系物，特別是赤霉素A4與A7越來越受到重 視，這是由于赤霉素A4與A7對植物具有特殊作用所致，具有提高某些植物的座果率，打破休眠，促進蘋果單性結實等功能。下面是赤霉素A4與A7的分子結構: <formula>formula see original document page 4</formula> GA4, <formula>formula see original document page 4</formula> GA7
赤霉素A4與A7的生理作用除了相同點外，尚有明顯的差異，例 如，使用赤霉素A7可強烈抑制花芽的形成，而赤霉素A4不僅不會抑
制反而起促進作用。在防止蘋果褐變和開裂上，GA4的活性高于GA7。 由于在促進莖伸長方面GA3>GA7> GA4，因此為防果銹等使用赤霉素 時，GA4最優(yōu)。它沒有諸如花芽分化受抑、種子數(shù)減少和細長枝增多
等副作用。因此，研究赤霉素A4與A7的分離具有重要的實際意義。

發(fā)明內容
本發(fā)明要解決的技術問題是針對上述現(xiàn)有技術的不足，提出一種 分子識別的方法從赤霉素A4與A7的混合物GA4+7中分離赤霉素A4， 其工藝路線合理，操作簡便，分離得到產物收率高，純度好。
本發(fā)明所采用的技術方案如下
一種從赤霉素A4與A7的混合物中分離赤霉素A4的方法，所述 的分離方法是將原料赤霉素A4與A7的混合物GA4+7和吡啶類化合物 按照l: 1 2的物質的量比混合，加入有機溶劑，加熱使原料完全溶 解，在-10 3(TC放置足夠長時間直至有無色、透明的晶體析出，所得 晶體為赤霉素A4(GA4)與吡啶類化合物的復合物，而赤霉素A7(GA7) 則留在原溶液中。
本發(fā)明所述赤霉素八4與A7的混合物可以使用市售商品，也可以 通過其他方式得到，其中對于混合物中赤霉素A4的質量百分比沒有 特別的要求，但比較推薦赤霉素八4的質量百分比在20 80。％。本發(fā) 明可以通過NMR， IR， MS等手段確認所得到的復合物。
進一步，所述的吡啶類化合物為下列一種或兩種以上任意比例的
混合2-羥基吡啶、3-羥基吡啶、4-羥基吡啶、2-氨基吡啶、3-氨基 吡啶、4-氨基吡啶。優(yōu)選2-羥基吡啶。
所述的有機溶劑為下列一種或兩種以上任意比例的混合甲醇、 乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亞砜。優(yōu)選下列之一乙醇、 丙酮，更優(yōu)選丙酮。
所使用的有機溶劑質量和赤霉素A4與A7的混合物質量的比值為1-31.
所述原料溶解后推薦在-10 3(TC放置5~10天，優(yōu)選在室溫下放 置6 7天。
具體推薦所述分離方法按照如下步驟進行將赤霉素A4與A7 的混合物GA4+7和2-羥基吡啶按物質的量比1: 1 2混合；加入質量 為赤霉素A4與A7的混合物質量1~3倍的有機溶劑，加熱使原料完全 溶解，在室溫下放置6 7天，有無色、透明的晶體析出，所得晶體為 赤霉素A4與2-羥基吡啶的復合物，而赤霉素A7則留在原溶液中，從 而實現(xiàn)赤霉素A4與A7的分離，所述有機溶劑為乙醇或丙酮。
本發(fā)明所采用的分離GA4+7的方法與以前的分離方法相比較有 以下優(yōu)點
a) 從GA4+7混合物中分離得到的赤霉素A4足夠純，分離后可直接 使用，而不需要再重結晶來提高純度；
b) 用GA4+7與吡啶類化合物進行分子識別的方法分離GA4+7混合 物的產率比其他分離方法所得產率要高。
C)本發(fā)明工藝路線合理，操作簡便。
具體實施方式
下面以具體實施例來進一步說明本發(fā)明的技術方案，但本發(fā)明的 保護范圍不限于此。 實施例1:
在500ml燒杯中加入60gGA4+7原料，原料中GA4與GA7的含 量分別為40%和60%，然后加入17g2-羥基吡啶，在燒杯中加入120 g乙醇，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天，有無色、透 明的晶體析出，通過NMR, IR，MS等手段，得出該晶體結構為GA4 與2-羥基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從而實現(xiàn)了 GA4與 G八7的分離，分離的純度88.2%，產物收率90.7%。
在500ml燒杯中加入卯gGA4+7原料，原料中GA4與GA7的含 量分別為40%和60%，然后加入26g3-羥基吡啶，在燒杯中加入180g 丙酮，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天，有無色、透明 的晶體析出，通過NMR， IR, MS等手段，得出該晶體結構為GA4 與3-羥基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從而實現(xiàn)了 GA4與 GA7的分離，分離的純度84.7%，產物收率86.5%。
實施例3:
在500ml燒杯中加入120g GA4+7原料，原料中GA4與GA7的 含量分別為40%和60%，然后加入35g 4-羥基吡啶，在燒杯中加入 120 g乙酸乙酯，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天，有 無色、透明的晶體析出，通過NMR, IR， MS等手段，得出該晶體結 構為GA4與4-羥基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從而實 現(xiàn)了GA4與GA7的分離，分離的純度83.5%,產物收率87.3%。
實施例4:
在500ml燒杯中加入30gGA4+7原料，原料中GA4與GA7的含 量分別為40%和60%,然后加入9g 2-氨基吡啶，在燒杯中加入180 g 甲醇，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天，有無色、透明 的晶體析出，通過NMR, IR， MS等手段，得出該晶體結構為GA4與 2-硝基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從而實現(xiàn)了GA4與 GA7的分離，分離的純度86.5%，產物收率89.3%。
實施例5:
在500ml燒杯中加入80g GA4+7原料，原料中GA4與GA7的 含量分別為40%和60%，然后加入23g 3-氨基吡啶，在燒杯中加入 200 g乙醚，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天，有無色、 透明的晶體析出，通過NMR， IR, MS等手段，得出該晶體結構為GA4， 與3-硝基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從而實現(xiàn)了 GA4與 GA7的分離，分離的純度85.3%，產物收率89.6%。
在500ml燒杯中加入100gGA"7原料，原料中GA4與GA7的 含量分別為40%和60%，然后加入28g 4-氨基吡啶，在燒杯中加入 200 g二甲基亞砜，加熱后使之溶解呈透明液體，室溫下放置七天， 有無色、透明的晶體析出，通過NMR, IR， MS等手段，得出該晶體 結構為GA4，與3-硝基吡啶的復合物，而GA7則留在原溶液中，從 而實現(xiàn)了 GA4與GA7的分離，分離的純度87.2%,產物收率88.6%。
實施例7:
在六個編號分別為l、 2、 3、 4、 5、 6的100ml燒杯中各加入30 gGA4+7原料，原料中GA4與GA7的含量分別為40%和60%，然后 各加入5 g 2-羥基吡啶，分別在1號到6號燒杯中各加入30 g甲醇、 乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亞砜，加熱使原料完全溶解， 室溫下放置，5天后4號燒杯中析出晶體，6天后2號燒杯中析出晶 體，7到IO天后其余四個燒杯析出晶體，通過NMR,IR,MS等手段， 得出一系列的晶體結構為GA4、四甲基乙二胺與2-羥基吡啶的復合 物，其中，4號燒杯中產物收率90.5%， 2號燒杯中產物收率88.4%， 1、 3、 5、 6號燒杯中產物收率分別為82.4%、 83.8%、 81.3%、 82.6%。
權利要求
1、一種從赤霉素A4與A7的混合物中分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述的分離方法為將原料赤霉素A4與A7的混合物和吡啶類化合物按照1∶1～2的物質的量比混合，加入有機溶劑，加熱使原料完全溶解，在-10～30℃放置足夠長時間后直至有無色、透明的晶體析出，所得晶體即為赤霉素A4和吡啶類化合物的復合物；所述的有機溶劑為下列一種或兩種以上任意比例的混合甲醇、乙醇、乙醚、丙酮、乙酸乙酯、二甲基亞砜；所述的吡啶類化合物為下列一種或兩種以上任意比例的混合2-羥基吡啶、3-羥基吡啶、4-羥基吡啶、2-氨基吡啶、3-氨基吡啶、4-氨基吡啶。
2、 如權利要求1所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述的有機溶劑為下列之一乙醇、丙酮。
3、 如權利要求1所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述的吡 啶類化合物為2-羥基吡啶。
4、 如權利要求1所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所使用的有機溶劑的質量和赤霉素A4與A7的混合物質量的比值為1~3: 1。
5、 如權利要求1所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述原料 溶解后在-10 3(TC放置5~10天。
6、 如權利要求5所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述原料 溶解后在室溫放置6 7天。
7、 如權利要求1所述的分離赤霉素A4的方法，其特征在于所述分離 方法按照如下步驟進行將赤霉素A4與A7的混合物和2-羥基吡啶按物質的量比l: 1~2混合；加入質量為赤霉素A4與A7的混合物質量 1 3倍的有機溶劑，加熱使原料完全溶解，在室溫下放置6 7天，有無色、透明的晶體析出，所得晶體即為赤霉素A4和2-羥基吡啶的復合物，所述的有機溶劑為下列之一乙醇、丙酮。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種從赤霉素A₄與A₇的混合物中分離赤霉素A₄的方法，所述的分離方法為將原料赤霉素A₄與A₇的混合物和吡啶類化合物按照1∶1～2的物質的量比混合，加入有機溶劑，加熱使原料完全溶解，在-10～30℃放置足夠長時間后直至有無色、透明的晶體析出，所得晶體即為赤霉素A₄和吡啶類化合物的復合物。本發(fā)明的分離方法工藝路線合理，操作簡便，分離得到產物收率高，純度好。
文檔編號A01P21/00GK101337954SQ20081006349
公開日2009年1月7日 申請日期2008年8月14日 優(yōu)先權日2008年8月14日
發(fā)明者章莉玲, 磊 許, 金志敏, 陳佳麗, 馬林林 申請人:浙江工業(yè)大學