專利名稱：：用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及一種植物用生物農(nóng)藥，特別是涉及一種用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥。技術(shù)背景據(jù)統(tǒng)計(jì)我國(guó)水稻種植面積2882萬(wàn)公頃(2001)，小麥種植面積2199萬(wàn)公頃(2003)，蘋(píng)果面積230萬(wàn)公頃，蔬菜面積逐年增加。蘋(píng)果腐爛、蘋(píng)果輪紋、水稻稻瘟、水稻紋枯、黃瓜枯萎、小麥赤霉、黃瓜炭疽、辣椒疫霉是上述作物、果蔬生產(chǎn)中常見(jiàn)的植物病害，對(duì)于上述病害的防治主要采用化學(xué)農(nóng)藥，比如50%多菌靈、70%甲基托布津、銀泰等。但因一些常規(guī)品種的長(zhǎng)期使用使病原菌產(chǎn)生抗藥性，致使田間用藥量逐年加大，給人類的生存環(huán)境及健康帶來(lái)了不可逆轉(zhuǎn)的負(fù)面影響。因此，高效、低毒、低殘留、與環(huán)境友善同時(shí)具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)新農(nóng)藥品種的創(chuàng)制迫在眉睫。從豆科植物補(bǔ)骨脂中提取的天然有效成分補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)對(duì)作物、果蔬生產(chǎn)中常見(jiàn)的植物病害，具有優(yōu)異的防治效果，因此，補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)可以開(kāi)發(fā)為具有廣闊前景的植物源生物農(nóng)藥，同時(shí)，可以作為先導(dǎo)化合物創(chuàng)制新藥。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的在于提供一種用補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)抑制常見(jiàn)植物病原菌，如蘋(píng)果腐爛病菌、蘋(píng)果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等。本發(fā)明的目的是通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥，其化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70%工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃?。蝗∫宜嵋阴ポ腿〔课唤?00g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用石油醚一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂定(50mg)(石油醚乙酸乙酯=4:1部分)。所述的用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥，所述的補(bǔ)骨脂定，無(wú)色針晶，mp290292°C;TLC檢查在紫外下為藍(lán)熒光斑點(diǎn)；ESIMS:m/z337.4，[M+H]+，335.3[M-H];H畫(huà)R(COCD3+CDC13):1.83(3H，s，CH3)，1.82(3H，s，CH3)，3.42(2H,d，J=7.2Hz，H-l')，5.41(1H，m，H-2')，6.92(1H，s，H-4)，6.96(1H，dd，J=1.9，8.4Hz，H-8)，7.13(1H，d，J=1.8Hz，H-IO)，7.68(1H，s，H-l)，7.82(1H，d，J=8.4Hz，H-7);補(bǔ)骨脂定結(jié)構(gòu)式本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)與效果是補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)作為農(nóng)用殺菌劑具有以下優(yōu)勢(shì):1.補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)是天然有效成分，本身作為農(nóng)用殺菌劑具有高效、低毒、低殘留、不易產(chǎn)生抗藥性等特點(diǎn)。2.藥效高。補(bǔ)骨脂定、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈5種原藥對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用EC50分別為1.35、8.93、26.18、9.16、1.47mg/L，EC90分別為15.33、128.98、93.37、147.85、26.86mg/L?？梢?jiàn)，補(bǔ)骨脂定的抑菌活性高于防治蘋(píng)果腐爛病菌的其它藥劑。3.殺菌譜廣。補(bǔ)骨脂定對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌、蘋(píng)果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等多種常見(jiàn)植物病害均具有很好的抑制活性。具體實(shí)施方式補(bǔ)骨脂定(Psoralidin)可以作為農(nóng)用殺菌劑用于防治蘋(píng)果腐爛病菌(Valsamali)，蘋(píng)果輪紋病菌(Physalosporapiricola)，水稻稻瘟病菌(Pyriculariaoryzae)，水稻紋枯病菌(RhizoctoniasolaniKuhn)，黃瓜枯萎病菌(Fusariumoxysporum),小麥赤霉病菌(Gibberellazeae)，黃瓜炭疽病菌(Colletotrichumorbiculare)辣椒疫霉病菌(Phytophthoracapsici)等引起的多種植物病害。實(shí)例l:用丙酮或二甲基亞砜將補(bǔ)骨脂定(Psomlidin)溶解配成10g/L的粗提物母液。加入適量粗提物母液于5(TC的PDA培養(yǎng)基中，充分混勻，配成粗提物終濃度分別為0.12mg/L、0.6mg/L、3mg/L、15mg/L、75mg/L的含藥培養(yǎng)基，以等體積的丙酮或二甲基亞砜加入到PDA培養(yǎng)基中作對(duì)照，然后倒入直徑90mm培養(yǎng)皿內(nèi)制成平板，備用。用直徑6mm的打孔器從事先在PDA平板上28'C下培養(yǎng)712d的各供試病菌菌落邊緣處切取菌餅，并移植于上述含不同濃度的粗提物平板和對(duì)照平板中央，每次處理重復(fù)3次，置28"C下培養(yǎng)712d，測(cè)量菌落直徑。每菌落取相交垂直線方向測(cè)其直徑，以其均值減去菌餅直徑即得菌落凈生長(zhǎng)直徑(CK)，相對(duì)抑制率(％)=(對(duì)照凈生長(zhǎng)量一處理凈生長(zhǎng)量)/對(duì)照凈生長(zhǎng)量xlOO。根據(jù)病菌抑制率等有關(guān)指標(biāo)，采用相應(yīng)的數(shù)據(jù)分析軟件，計(jì)算出EC5。值及EQ。值限。補(bǔ)骨脂定對(duì)幾種常見(jiàn)植物病原菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>實(shí)例2:試驗(yàn)方法同實(shí)例l，補(bǔ)骨脂定、福美胂、銀泰、甲基托布津、多菌靈6種原藥對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用如下5種藥劑對(duì)蘋(píng)果腐爛病菌菌絲生長(zhǎng)的抑制作用<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>權(quán)利要求1.用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥，其特征在于化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃??；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用石油醚一乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂定(50mg)(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1部分)。2.根據(jù)權(quán)利要求l所述的用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥，其特征在于所述的補(bǔ)骨脂定，無(wú)色針晶，mp290292。C;TLC檢査在紫外下為藍(lán)熒光斑點(diǎn)；ESIMS:m/z337.4，[M+H]+，335.3[M-H];HNMR(COCD3+CDC13):1.83(3H，s，CH3)，1.82(3H，s，CH3)，3.42(2H，d，J:7.2Hz，H-l')，5.41(1H，m，H-2')，6.92(1H，s，H-4)，6.96(1H，dd，J=1.9，8.4Hz，H-8)，7.13(1H，d，J=1.8Hz，H-IO)，7.68(1H，s，H-l)，7.82(1H，d，J:8.4Hz，H-7);補(bǔ)骨脂定結(jié)構(gòu)式全文摘要用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥，本發(fā)明涉及一種植物用生物農(nóng)藥，特別是涉及一種用補(bǔ)骨脂定防治植物真菌病害的生物農(nóng)藥。化合物是干燥補(bǔ)骨脂種子5Kg，用70％工業(yè)乙醇冷浸提取四次，浸出液減壓濃縮得乙醇提取物，加水混溶，依次用石油醚、乙酸乙酯萃??；取乙酸乙酯萃取部位浸膏100g，經(jīng)反復(fù)硅膠柱層析，用石油醚-乙酸乙酯梯度洗脫，分離得到補(bǔ)骨脂定(50mg)(石油醚∶乙酸乙酯＝4∶1部分)。抑制常見(jiàn)植物病原菌，如蘋(píng)果腐爛病菌、蘋(píng)果輪紋病菌、水稻稻瘟病菌、水稻紋枯病菌、黃瓜枯萎病菌、小麥赤霉病菌、黃瓜炭疽病菌、辣椒疫霉病菌等。文檔編號(hào)A01N65/00GK101213980SQ20081001001公開(kāi)日2008年7月9日申請(qǐng)日期2008年1月2日優(yōu)先權(quán)日2008年1月2日發(fā)明者關(guān)麗杰,李海燕,蔡麗麗,雙邵,紅邵申請(qǐng)人:沈陽(yáng)化工學(xué)院