專(zhuān)利名稱(chēng)：苦草快速繁殖的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種水生植物的組織培養(yǎng)方法，更具體涉及苦草Hydrocharitaceae Vallisnera Linn.的一種快速繁殖方法，屬于生物技術(shù)在水體植被恢復(fù)和水簇箱中水草種苗生產(chǎn)中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
苦草Hydrocharitaceae Vallisnera Linn.屬水鱉科苦草屬，以其葉翠綠或略帶紫紅色供觀賞、而且較抗污染、是生物食物鏈中的重要植物資源，又是水體植被恢復(fù)中的主要先鋒水草。苦草的葉子呈線(xiàn)形或帶形，在清水中栩栩如生，也是水簇箱中的常用品種。在自然界中繁殖系數(shù)低，如利用常規(guī)的分株法繁殖，形成不了規(guī)?；a(chǎn)，難以滿(mǎn)足水體植被恢復(fù)和水簇箱中植物材料的需求。
組織培養(yǎng)作為生物技術(shù)領(lǐng)域中的一種重要手段，利用植物細(xì)胞的全能性，如莖尖、嫩芽等組織，通過(guò)離體培養(yǎng)，產(chǎn)生愈傷組織、分化成苗、誘導(dǎo)生根，從而形成植物的無(wú)性系快速繁殖的植株。雖然組織培養(yǎng)是一種比較成熟的技術(shù)，其基本培養(yǎng)基一般采用MS，但對(duì)不同植物，從產(chǎn)生愈傷組織、分化成苗、誘導(dǎo)生根的不同生長(zhǎng)階段需要不同的營(yíng)養(yǎng)配置，以及不同的生長(zhǎng)條件。因此對(duì)苦草的組織培養(yǎng)，也需要特殊的培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是，提供一種苦草快速繁殖的方法，該方法利用組織培養(yǎng)技術(shù)，將苦草培養(yǎng)物經(jīng)消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化與增殖及生根培養(yǎng)，可快速繁殖苦草，為水體植被恢復(fù)和水簇箱布景提供大量的種苗。
為了達(dá)到上述目的，一種快速繁殖苦草的方法按下列步驟進(jìn)行(1)取長(zhǎng)度為2～3厘米的苦草地下莖尖作為苦草培養(yǎng)物；(2)將苦草培養(yǎng)物用流水沖冼20～30分鐘，再用75％的酒精棉球擦洗苦草培養(yǎng)物的表面，然后用0.1％的氯化汞浸泡5～8分鐘，無(wú)菌水沖洗8～10分鐘；(3)將經(jīng)步驟(2)處理的苦草培養(yǎng)物接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20～30天；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入0.1毫克KT(6-呋喃氨基嘌呤)、0.1毫克2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；其中每升MS基本培養(yǎng)基含NH4NO3(硝酸銨) 1650毫克KNO3(硝酸鉀)1900毫克CaCl2·2H2O(二水氯化鈣)440毫克MgSO4.7H2O(硫酸鎂) 370毫克KH2PO4(磷酸二氫鉀) 170毫克KI(碘化鉀)0.83毫克H3BO3(硼酸)6.2毫克MnSO4·4H2O(硫酸錳)22.3毫克ZnSO4·7H2O(硫酸鋅)8.6毫克
Na2MoO4·2H2O(鉬酸鈉)0.25毫克CuSO4·5H2O(硫酸銅) 0.025毫克CoCl2·6H2O(氯化鈷) 0.025毫克FeSO4·7H2O(硫酸亞鐵) 27.8毫克乙二胺四乙酸二鈉37.3毫克肌醇100毫克煙酸0.5毫克鹽酸吡哆醇 0.5毫克鹽酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者為水；(4)將經(jīng)步驟(3)培養(yǎng)的苦草培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)30～40天長(zhǎng)出許多苦草芽；分化與增殖培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1毫克BA(6-芐基腺嘌呤)、0.1毫克NAA(萘乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；(5)若將步驟(4)的苦草芽分株，可作為新的苦草培養(yǎng)物，重復(fù)步驟(4)可得到大量的苦草芽；(6)若將步驟(4)的苦草芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)25～30天即得到苦草苗；生根培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1升蒸餾水、0.4毫克IBA(吲哚丁酸)、40克蔗糖、12克瓊脂。
本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明的誘導(dǎo)培養(yǎng)基、分化與增殖培養(yǎng)基及生根培養(yǎng)基是最適合苦草三個(gè)不同生長(zhǎng)階段---誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化與增殖及生根培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基配方，一個(gè)苦草地下莖尖經(jīng)反復(fù)增殖，一年可繁殖上萬(wàn)株種苗，為水體植被恢復(fù)和水簇箱布景提供大量的種苗。
具體實(shí)施例方式一種苦草快速繁殖的方法，該方法按下列步驟進(jìn)行(1)取長(zhǎng)度為2～3厘米的苦草地下莖尖作為苦草培養(yǎng)物；(2)將苦草培養(yǎng)物用流水沖冼20～30分鐘，再用75％的酒精棉球擦洗苦草培養(yǎng)物的表面，然后用0.1％的氯化汞浸泡5～8分鐘，無(wú)菌水沖洗8～10分鐘；(3)將經(jīng)步驟(2)處理的苦草培養(yǎng)物接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20～30天，苦草培養(yǎng)物開(kāi)始萌動(dòng)、生長(zhǎng)；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入0.1毫克KT(6-呋喃氨基嘌呤)、0.1毫克2，4-D(2，4-二氯苯氧乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；其中每升MS基本培養(yǎng)基含NH4NO3(硝酸銨) 1650毫克KNO3(硝酸鉀)1900毫克CaCl2·2H2O(二水氯化鈣)440毫克MgSO4.7H2O(硫酸鎂) 370毫克KH2PO4(磷酸二氫鉀) 170毫克KI(碘化鉀)0.83毫克H3BO3(硼酸)6.2毫克MnSO4·4H2O(硫酸錳)22.3毫克ZnSO4·7H2O(硫酸鋅)8.6毫克
Na2MoO4·2H2O(鉬酸鈉) 0.25毫克CuSO4·5H2O(硫酸銅) 0.025毫克CoCl2·6H2O(氯化鈷) 0.025毫克FeSO4·7H2O(硫酸亞鐵)27.8毫克乙二胺四乙酸二鈉 37.3毫克肌醇 100毫克煙酸 0.5毫克鹽酸吡哆醇 0.5毫克鹽酸硫胺素 0.1毫克甘氨酸 2毫克余者為水；(4)將經(jīng)步驟(3)培養(yǎng)的苦草培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)30～40天長(zhǎng)出許多苦草芽；分化與增殖培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1毫克BA(6-芐基腺嘌呤)、0.1毫克NAA(萘乙酸)、30克蔗糖、6克瓊脂；(5)若將步驟(4)的苦草芽分株，可作為新的苦草培養(yǎng)物，重復(fù)步驟(4)可得到大量的苦草芽；(6)若將步驟(4)的苦草芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)25～30天即得到苦草苗；生根培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1升蒸餾水、0.4毫克IBA(吲哚丁酸)、40克蔗糖、12克瓊脂。
實(shí)施本發(fā)明，可在短期內(nèi)得到大量的苦草試管苗。
權(quán)利要求
1.一種苦草快速繁殖的方法，其特征在于，該方法按下列步驟進(jìn)行(1)取長(zhǎng)度為2～3厘米的苦草地下莖尖作為苦草培養(yǎng)物；(2)將苦草培養(yǎng)物用流水沖冼20～30分鐘，再用75％的酒精棉球擦洗苦草培養(yǎng)物的表面，然后用0.1％的氯化汞浸泡5～8分鐘，無(wú)菌水沖洗8～10分鐘；(3)將經(jīng)步驟(2)處理的苦草培養(yǎng)物接入誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，培養(yǎng)20～30天；誘導(dǎo)培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入0.1毫克6-呋喃氨基嘌呤、0.1毫克2，4-二氯苯氧乙酸、30克蔗糖、6克瓊脂；(4)將經(jīng)步驟(3)培養(yǎng)的苦草培養(yǎng)物轉(zhuǎn)接于分化與增殖培養(yǎng)基，培養(yǎng)30～40天長(zhǎng)出許多苦草芽；分化與增殖培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1毫克6-芐基腺嘌呤、0.1毫克萘乙酸、30克蔗糖、6克瓊脂；(5)將步驟(4)的苦草芽分株，作為新的苦草培養(yǎng)物，重復(fù)步驟(4)可得到大量的苦草芽；(6)將步驟(4)的苦草芽轉(zhuǎn)接于生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根，培養(yǎng)25～30天即得到苦草苗；生根培養(yǎng)基為每升MS基本培養(yǎng)基中加入1升蒸餾水、0.4毫克吲哚丁酸、40克蔗糖、12克瓊脂。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了快速繁殖苦草的方法，該方法以苦草的地下莖尖為培養(yǎng)物，將苦草培養(yǎng)物經(jīng)消毒、誘導(dǎo)培養(yǎng)、分化與增殖及生根培養(yǎng)，可快速繁殖苦草，一棵苦草地下莖尖一年可繁殖上萬(wàn)株苦草種苗，為水體植被恢復(fù)和水簇箱布景提供大量的種苗。
文檔編號(hào)A01H4/00GK1586174SQ20041006062
公開(kāi)日2005年3月2日 申請(qǐng)日期2004年7月23日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月23日
發(fā)明者趙家榮, 徐惠珠, 劉艷玲, 徐立銘 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院武漢植物園