生地黃中同時(shí)提取多糖和梓醇的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001 ] 本發(fā)明涉及中藥植物中有效物質(zhì)的提取技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 生地黃，別名地黃、生地、地髓等，為常用的補(bǔ)益中藥之一，臨床應(yīng)用極為廣泛，所 含有效成分主要為多糖和梓醇。多糖是由許多相同或不同的單糖以α -或β -糖苷鍵所 組成的化合物，普遍存在于自然界植物體中，包括淀粉、纖維素、多聚糖、果膠等。由于植物 多糖的來(lái)源廣泛，不同種的植物多糖的分子構(gòu)成及分子量各不相同。相關(guān)研宄指出，地黃多 糖具有提高免疫力、抑制腫瘤、抗衰老、促進(jìn)造血機(jī)能、降血糖等活性。梓醇是一種環(huán)稀醚貓 葡萄糖苷類化合物，具有廣泛的藥理作用，其在抗癌、神經(jīng)保護(hù)、抗炎、利尿、降血糖及抗肝 炎病毒等領(lǐng)域均有特定療效。梓醇為不穩(wěn)定化合物，生地黃中梓醇含量最高，加工炮制過(guò)程 中，所含梓醇大幅下降甚至消失。
[0003] 為了更加方便和有效的獲得地黃的治療作用，已經(jīng)有很多方法用來(lái)分別提取地黃 中的多糖和梓醇，分別獲得地黃多糖和梓醇提取物，再經(jīng)純化后，可以進(jìn)行深加工，依需求 制成各種片劑、粉劑等，供人們選擇使用。如CN 101041675 A提供了一種地黃提取地黃寡 糖、地黃多糖的方法；CN 102863489 A公開(kāi)了一種從地黃莖中提取梓醇的方法，這些方法 均在于獲得純的、高含量的提取產(chǎn)物，提取物適于后期深加工，因而提取成本高、工藝繁瑣、 時(shí)間長(zhǎng)。
[0004] 考慮到地黃的主要有效成分為地黃多糖和梓醇，部分人群有同時(shí)服用地黃多糖和 梓醇的需要，而前述的方法制備出的多糖和梓醇均為分別提取，需要兩次提取過(guò)程，對(duì)于消 費(fèi)者來(lái)說(shuō)，需要承擔(dān)兩次提取的成本，性價(jià)比低。
[0005] CN 101817855Α公開(kāi)了一種從新鮮地黃中制備梓醇和地黃多糖的方法，其通過(guò)一 次提取過(guò)程，提取到多糖和梓醇的混合物再經(jīng)分離純化分別得到相應(yīng)的純品。其采用乙醇 和水作為提取液，分兩次提取，由于多糖和梓醇的最佳提取條件并不相同，甚至相互影響， 其提取過(guò)程中并未考慮到優(yōu)化多糖和梓醇影響各自得率的不同條件，得到混合物中多糖和 梓醇的得率較低，工藝繁瑣，成本較高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題是提供生地黃中同時(shí)提取多糖和梓醇的方法，能夠解決 已有技術(shù)提取多糖和梓醇得率較低、工藝繁瑣、成本較高的問(wèn)題，制得多糖和梓醇混合物中 多糖和梓醇的得率高，具有工藝簡(jiǎn)單安全、提取效率高、成本低的優(yōu)點(diǎn)，經(jīng)濟(jì)效率高，有利于 環(huán)保，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
[0007] 為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是：生地黃中同時(shí)提取多糖和梓 醇的方法，其特征在于：包括如下步驟， 步驟一、樣品前處理，將生地黃干燥至恒重，粉碎，過(guò)篩，篩目大于等于20目； 步驟二、提取，將已處理的生地黃與蒸餾水混合均勻，固液比為1: (8~12) g/ml，加 熱，溫度為90°C~100°C，提取時(shí)間為1~2小時(shí)，提取2~3次，合并提取液； 步驟三、將提取液濃縮，干燥即得成品。
[0008] 優(yōu)選地，所述步驟二中，固液比為1:8 g/ml，加熱溫度為90°C，提取時(shí)間為1. 5小 時(shí)，提取2次。
[0009] 進(jìn)一步地，所述步驟三中，將提取液濃縮后，再置于噴霧干燥機(jī)中，添加麥芽糊精， 經(jīng)噴霧干燥制得粉末狀成品。
[0010] 優(yōu)選地，所述步驟三中，提取液濃縮至比重為I. l〇g/ml，添加5% (質(zhì)量比）的麥芽 糊精，噴霧干燥機(jī)進(jìn)風(fēng)溫度150°C ±2°C，出風(fēng)溫度80°C ±2°C。 toon] 采用上述技術(shù)方案所產(chǎn)生的有益效果在于：本發(fā)明根據(jù)影響多糖和梓醇得率的因 素優(yōu)化了提取方法，如溫度、固液比、提取時(shí)間、提取次數(shù)等，使制得混合物中多糖和梓醇取 得最佳得率，提取效率高。本發(fā)明僅用水作為提取液，提取溫度低于100度，提取方法簡(jiǎn)單， 實(shí)施成本低，適于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明能夠解決已有技術(shù)提取多糖和梓醇得率較低、工藝 繁瑣、成本較高的問(wèn)題，制得產(chǎn)物不需分離，有效保留了提取物，直接制成粉末狀成品，無(wú)污 染，可直接食用或深加工，經(jīng)濟(jì)效益好。
【附圖說(shuō)明】
[0012] 圖1是本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中提取次數(shù)對(duì)得率的影響曲線圖； 圖2是本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中提取時(shí)間對(duì)得率的影響曲線圖； 圖3是本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中提取溫度對(duì)得率的影響曲線圖； 圖4是本發(fā)明【具體實(shí)施方式】中提取固液比對(duì)得率的影響曲線圖；。
【具體實(shí)施方式】
[0013] 下面對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說(shuō)明，其中所用材料與儀器為： Waters高效液相色譜儀（Waters 2998光電二極陣列檢測(cè)器、Breeze色譜工作站)，紫 外分光光度計(jì)（島津UV-1750)，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(上海亞榮生化儀器廠)，HH-W420數(shù)顯三用恒溫 水浴箱(金壇市醫(yī)療儀器廠)，SP-1500實(shí)驗(yàn)型噴霧干燥機(jī)(上海順儀科技公司），TS-NS系列 提取濃縮機(jī)組(上海順儀科技公司），生地黃購(gòu)于河北保定安國(guó)，梓醇標(biāo)準(zhǔn)品（中國(guó)食品藥品 檢定所)，葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品(北京索萊寶科技有限公司)，麥芽糊精（山東西王糖業(yè)有限公司)，乙 腈、甲醇為色譜純，其他均為分析純。
[0014] 一、生地黃中多糖和梓醇提取方法在優(yōu)化前需要先確定多糖和梓醇的含量測(cè)定方 法，及優(yōu)化結(jié)果的測(cè)試對(duì)比指標(biāo)。
[0015] 1.地黃多糖的含量測(cè)定方法 (1)標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制 取葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)品，105°c下干燥至恒重，精密稱取IOmg于50ml容量瓶中，用蒸餾水定容 至刻度。精密吸取上述溶液0. l、〇. 2、0.4、0.6、0.8、1.0 ml置具塞試管中，分別加蒸餾水 至2. 0 ml，加入5%的苯酚試液Iml，搖勻，迅速滴加濃硫酸5ml，快速混勻，靜置5min，沸水 浴中加熱15min，冷卻至室溫。用蒸餾水做空白對(duì)照，在490nm處測(cè)得吸光度。以濃度為橫 坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，Y=〇. 〇〇65x+0. 1136 ( R2=O. 9948)。
[0016] ⑵供試品溶液的制備 精密稱取樣品約IOmg于50ml容量瓶中，蒸餾水定容至刻度，充分溶解后，取0.1 ml于 具塞試管中，加水至2ml，加入5%苯酷試液lml，搖勾，迅速滴加濃硫酸5ml，快速混勾，靜置 5min，沸水浴中加熱15min，冷卻至室溫，即得供試品，測(cè)定吸光度，計(jì)算多糖含量，記為α (%)〇
[0017] 2梓醇的含量測(cè)定方法 (1)色譜條件 色譜柱：XBridge?C18( 5 μL? 4. 6x250mm);柱溫 30°C ;檢測(cè)波長(zhǎng) 210nm ;流動(dòng)相：乙 腈-水（1 : 99);進(jìn)樣體積20 μ 1 ;流速lml/min。
[0018] (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備 稱取梓醇對(duì)照品l〇mg，置于IOOmL容量瓶中，以流動(dòng)相（1%乙腈）溶解稀釋至刻度，搖 勾既得）。配成 10 U g/ml，20 μ g/ml，40 μ g/ml，60 μ g/ml，80 μ g/ml，100 μ g/ml，按 2. I. 1. 2 的色譜條件，分別進(jìn)樣，記錄色譜圖，對(duì)峰積分計(jì)算峰面積，以峰面積為Y，以進(jìn)樣濃度為X， 進(jìn)行線性回歸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，γ=4954. 1Χ+5995. 2 (R2 = 0. 9987 )。
[0019] ⑶供試品溶液的制備 取樣品約l〇〇mg，置于圓底燒瓶中，加入50ml 60%的甲醇，稱定質(zhì)量，加熱回流提取 I. 5h冷卻后再次稱定質(zhì)量，用甲醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，繼續(xù)提取I. 5h。搖勻，過(guò)膜，量取濾液 35ml，減壓濃縮至近干燥，殘?jiān)昧鲃?dòng)相（1%乙腈）溶解，轉(zhuǎn)移定容至IOml量瓶中，搖勻，既 得。在上述色譜條件下測(cè)定，計(jì)算梓醇含量，記為β (%)。
[0020] 3.地黃多糖、梓醇的提取 取生地黃干燥至恒重，粉碎，過(guò)20目篩，取質(zhì)量20. 00g，記為Ml (g)，在不同的時(shí)間、 溫度、固液比下提取，過(guò)濾，提取兩次，合并濾液濃縮，減壓干燥，既得地黃提取物產(chǎn)品，記為 M2 (g)〇
[0021] 4.提取考察指標(biāo) 以地黃多糖和梓醇的得率為考察指標(biāo)，兩物質(zhì)得率的計(jì)算方法如下，
二、單因素實(shí)驗(yàn) 在保持其他因素相同條件下，分別考察不同提取溫度（°C )、固液比（g/ml)、提取時(shí)間 (h)、提取次數(shù)（η)等各因素對(duì)地黃多糖得率的影響。
[0022] L提取次數(shù)的選擇 采用提取溫度80°C，提取時(shí)間2h，提取倍數(shù)8倍水，