的丙酬/正己燒混合溶劑 定容得到10.Oyg/mL標準中間液;將不含氣挫菌酷胺的蘋果空白樣品按上述前處理步驟處 理，取8血空白提取凈化液，濃縮至干后，加入8血體積比為1/1的丙酬/正己燒混合溶劑滿旋 溶解，用該溶液最終配制成1、2、5、10、20、50iig/L基質標準工作溶液。
[0031] (3)氣相色譜串聯(lián)質譜法(GC-MS/MS)測定 將不同濃度梯度的標準工作液分別注入GC-MS/MS，W外標法進行氣挫菌酷胺含量的定 量分析，即W標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準工作曲線;在 相同條件下將樣品提取液注入GC-MS/MS進行測定，測得樣品液中氣挫菌酷胺的色譜峰面 積，代入標準工作曲線，得到樣品液中氣挫菌酷胺含量，然后根據(jù)樣品液所代表試樣的質量 計算得到樣品中氣挫菌酷胺殘留量。
[0032] 其中色譜條件為：
[0033] 色譜柱:HP-5MS毛細管色譜柱，柱長30m，內徑0.25mm，膜厚0.25皿。
[0034] 進樣口溫度:250. (TC，進樣模式:不分流進樣，進樣量:化L。
[00巧]載氣:化，恒流模式，流速1.2mL/min。
[0036] 爐箱升溫程序:初溫60°C保持2min，W每分鐘20°C的速度升至200°C，然后W每分 鐘2°C的速度升至220°C，再W每分鐘20°C的速度升至280°C，保持IOmin;
[0037] 傳輸線溫度:290°C。
[0038] 其中，質譜參數(shù)為：
[0039] 電離模式:電子轟擊電離，目陳模式，能量70eV。
[0040] 離子源溫度:280°C。
[0041] 碰撞氣:氣氣。
[0042] 掃描方式:多反應監(jiān)測(SM)掃描模式。
[0043] MRM檢測參數(shù)見表1。 表1:實施例1的MRM檢測參數(shù)

*為定量離子對。
[0044] 定性鑒定:在相同的條件下，如果樣液中農藥色譜峰保留時間與標準溶液中相應 農藥保留時間相一致，并且在扣除背景后的樣品質譜圖中，所選擇的離子均出現(xiàn)，而且離子 豐度比與標準溶液的離子豐度比相一致，則可判斷樣液中存在運種農藥;若上述兩個條件 不能同時滿足，則判斷不含該種農藥。
[0045] W標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準工作曲線如表 2。 LUU46J 加頓凹收舉和重夏性：
[0047]在不含氣挫菌酷胺的蘋果中加入10、20和20化g/kg3個濃度水平的氣挫菌酷胺標 準溶液，待農藥添加30min后按上述處理步驟進行殘留量測定，200yg/kg添加濃度的樣品待 巧搬用體積比為1/1的丙酬/正己燒混合溶劑稀釋5倍后再用GC-MS/MS測定。將測定濃度與 農藥理論添加濃度進行比較，得到農藥添加回收率，每個添加水平平行測定6次，得其相對 標準偏差，測定結果見表3。由表3可W看出，在3個加標水平上，氣挫菌酷胺的平均回收率為 86.0 %~96.0 %，平均相對標準偏差(RSD)為5.7 %~6.9 %，說明本發(fā)明方法的回收率較 高，重復性好。
[004引表3氣挫菌酷胺的回收率和重復性(n = 6)
[0049] 檢出限：
[0050] 將不同濃度的氣挫菌酷胺基質標準工作溶液注入GC-MS/MS，W最低濃度基質標準 溶液色譜峰的3倍信噪比和樣品處理過程的濃縮倍數(shù)(蘋果的濃縮倍數(shù)為0.5倍)計算檢出 限，氣挫菌酷胺的檢出限為0.06化g/kg。
[0051] 實施例2:黃瓜中氣挫菌酷胺殘留量的檢測
[0化2] (1)樣品前處理 稱取經(jīng)充分混勻的黃瓜10.0 g于50mL離屯、管中，準確加入20mL含1 %乙酸的乙臘溶液， 均質提取Imin,加入3g無水硫酸儀、2g乙酸鋼和2mL水，滿旋Imin后，7000;r/min離屯、5min。 離屯、后，取6mL乙臘提取液轉移至裝有900mg無水硫酸儀、300mg Ci8和150mg PSA的離屯、管 中，滿旋1111111，500化/111111離屯、5111111。取1血上清液于氮吹管中，于40°(：氮氣吹干，加入體積比 為1/1的丙酬/正己燒混合溶劑溶解殘渣，滿旋后混勻后，移入進樣瓶中待GC-MS/MS測定。 [0053] (2)標準工作溶液的配制 將1 OOOiig/mL標準中間液溶液用體積比為1 /1的丙酬/正己燒混合溶劑稀釋成1 Oiig/mL 標準中間液。將不含氣挫菌酷胺的黃瓜空白樣品按上述前處理步驟處理，取8血空白提取凈 化液，濃縮至干后，加入SmL體積比為1/1的丙酬/正己燒混合溶劑滿旋溶解，用該溶劑最終 配制成1、2、5、10、20、50yg/L基質標準工作溶液。
[0054] (3)氣相色譜串聯(lián)質譜法(GC-MS/MS)測定 操作步驟、色譜和質譜條件與上述蘋果樣品中氣挫菌酷胺的測定一致。
[0化日]定性鑒定：
[0056]同上述蘋果樣品中氣挫菌酷胺的測定一致。
[0化7]線性關系：
[0058] W標準工作液的色譜峰面積對其相應濃度進行回歸分析，得到標準工作曲線為Y =37504X+96418，相關系數(shù)為0.9995。
[0059] 加標回收率和重復性：
[0060] 在不含氣挫菌酷胺的黃瓜中加入10、20和20化g/kg 3個濃度水平的氣挫菌酷胺標 準溶液，待農藥添加30min后按上述處理步驟進行殘留量測定，200yg/kg添加濃度的樣品待 巧搬用體積比為1/1的丙酬/正己燒混合溶劑稀釋5倍后再用GC-MS/MS測定。將測定濃度與 農藥理論添加濃度進行比較，得到農藥添加回收率，每個添加水平平行測定6次，得其相對 標準偏差，測定結果見表4。由表4可W看出，在3個加標水平上，氣挫菌酷胺的平均回收率為 89.3%~95.1 %，平均相對標準偏差(RSD)為3.5 %~7.1 %，說明本發(fā)明方法的回收率高， 重復性好。
[0061] 表4氣挫菌酷胺的回收率和重復性(n = 6)
[0062] 檢出限；
[0063] 將不同濃度的氣挫菌酷胺基質標準工作溶液注入GC-MS/MS，W最低濃度基質標準 溶液色譜峰的3倍信噪比和樣品處理過程的濃縮倍數(shù)(黃瓜的濃縮倍數(shù)為0.5倍)計算檢出 限，氣挫菌酷胺的檢出限為0.02化g/kg。
[0064] W上的實施例僅是對本發(fā)明的優(yōu)選實施方式進行描述，并非對本發(fā)明的范圍進行 限定，在不脫離本發(fā)明設計精神的前提下，本領域普通工程技術對本發(fā)明的技術方案作出 的各種變型和改進，均應落入本發(fā)明的權利要求書確定的保護范圍內。
【主權項】
1. 一種GC-MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，其特征在于，所述方法包括以下 步驟： (1) 提取 稱取蔬菜和水果樣品于具塞離心管中，加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈溶液均質提取 lmin，加入氯化鈉或乙酸鈉中的一種和無水硫酸鎂振蕩后離心； (2) 凈化 移取樣品提取液于離心管中，加入基質分散固相萃取劑，渦旋振蕩，離心，取一定量凈 化液氮氣吹干后，用體積比為1/1的丙酮/正己烷混合溶劑溶解定容，過膜后，待氣相色譜串 聯(lián)質譜(GC-MS/MS)檢測； (3) 標準工作溶液的配制 將不含氟唑菌酰胺的同種類基質空白樣品按上述步驟（1)、（2)處理，得樣品提取凈化 殘渣，加入適量溶劑和標準溶液，渦旋混勻，配制成至少3個濃度的氟唑菌酰胺系列混合標 準工作液； (4) 測定和結果計算 將步驟(3)中的各濃度梯度的標準工作液進行GC-MS/MS測定，以標準工作液的色譜峰 面積對其相應濃度進行回歸分析，得到基質標準工作曲線;在相同條件下將步驟(2)中凈化 后的樣品液注入GC-MS/MS進行測定，測得樣品液中氟唑菌酰胺的色譜峰面積，代入基質標 準工作曲線，得到樣品液中氟唑菌酰胺含量，然后根據(jù)樣品液所代表試樣的質量計算得到 樣品中氟唑菌酰胺殘留量;若上機溶液中氟唑菌酰胺殘留量超過線性范圍上限，需用定容 溶劑將上機溶液濃度稀釋至線性范圍之內。2. 根據(jù)權利要求1所述的一種GC-MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，其特征在 于，步驟(1)中蔬菜和水果樣品若為脫水樣品，需降低稱樣量，并加適量水充分浸潤。3. 根據(jù)權利要求1所述的一種GC-MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，其特征在 于，步驟（1)中采用乙腈提取時需加入氯化鈉鹽析，采用含1%乙酸的乙腈溶液提取時需加 入乙酸鈉鹽析。4. 根據(jù)權利要求1所述的一種GC-MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，其特征在 于，步驟⑵中基質分散固相萃取劑由無水硫酸鎂、C 18和PSA組成，每毫升提取液中無水硫酸 鎂、C18和PSA加入量分別為150mg、50mg和25mg。5. 根據(jù)權利要求1所述的一種GC-MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，其特征在 于，步驟(4)中GC-MS/MS分析條件為:色譜柱:HP-5MS毛細管色譜柱，柱長30m，內徑0.25mm， 膜厚0.25μπι;進樣口溫度250.0°C ;載氣:He，不分流模式進樣，進樣量：lyL;恒流模式，流速 1.2mL/min;升溫程序:初溫60°C保持2min，以每分鐘20°C的速度升至200°C，然后以每分鐘2 °C的速度升至220°C，再以每分鐘20°C的速度升至280°C，保持lOmin;傳輸線溫度:290°C ;電 離模式：電子轟擊電離(El，70eV);離子源溫度280°C ;碰撞氣:氬氣；多反應監(jiān)測掃描方式， 監(jiān)測參數(shù)為：
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種GC?MS/MS測定果蔬中氟唑菌酰胺殘留的方法，用乙腈或含1%乙酸的乙腈溶液均質提取樣品中殘留的氟唑菌酰胺，提取液經(jīng)乙二胺?N?丙基硅烷（PSA）和十八烷基硅烷鍵合相（C18）基質分散凈化后，氣相色譜串聯(lián)質譜（GC?MS/MS）檢測，采用不含待測農藥的空白基質溶液建立校正的標準工作曲線，外標法定量。本方法平均回收率為86.0%～96.0%，平均相對標準偏差（RSD）為3.5%～7.1%，檢出限低于0.064μg/kg，具有操作簡便、快速、靈敏度高、重復性好、定性定量準確的優(yōu)點。能滿足美國、歐盟、日本等國家對相應產(chǎn)品安全檢測的技術要求，為保障我國人民食品安全及對外出口貿易健康發(fā)展提供有力的技術支撐。
【IPC分類】G01N27/62, G01N30/02, G01N30/06
【公開號】CN105717212
【申請?zhí)枴緾N201610067303
【發(fā)明人】崔淑華
【申請人】崔淑華
【公開日】2016年6月29日
【申請日】2016年1月30日