一種消癥止痛顆粒中三七的含量測定方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明涉及到的是一種中藥復方質量控制的領域，具體涉及一種消癒止痛顆粒中 的Η走含量測定方法。
【背景技術】
[0002] 消癒止痛顆粒原方來源于名老中醫(yī)驗方，由丹參、川寫、Η走等9味藥材組成，具 有巧癒消癒、行氣止痛的功效。該方不僅能明顯縮減子宮內膜異位癥患者的盆腔包塊，消除 和減輕患者的痛經，同時還能有效緩解胸脅、乳房脹痛，舒緩情志等。
[0003] 復方中Η走的現(xiàn)有測定方法主要采用高效液相色譜梯度洗脫系統(tǒng)，采用紫外檢測 器進行測定，檢測波長在203nm。供試液的制備采用正了醇提取法、甲醇提取結合正了醇 萃取法、己醇提取結合正了醇萃取法、大孔樹脂除雜法、大孔樹脂結合正了醇萃取法等方法 制備供試液，上述送些方法都存在供試液制備方法步驟重復操作，過程兀長的問題，同時， 203nm處為紫外末端吸收，也是雜質和溶劑峰的吸收波長，故上述測定方法重復性、準確度 均較低。
[0004] 《中國藥典》2010年版收載的品種如：S走血傷寧膠囊、云南白藥膠囊、 沈陽紅藥膠囊、乳癖消膠囊、珍黃膠囊和消栓通絡膠囊等，丹義婦康煎膏國家標準 WS-10227狂D0227) 2002中均含有Η走，且均采用了正了醇提取或萃取的樣品制備過程，運 用高效液相色譜-紫外檢測器，在203nm處進行測定，除Η走止血膠囊測定了人參皂巧Rgi 和化1兩個指標，其它品種僅測定了人參皂巧Rgi，表明采用高效液相色譜-紫外檢測器的 測定方法，難W同時測定Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi和人參皂巧化1的含量。
[0005] 本處方藥味多，成分復雜，對上述通用方法進行了認真考察，同時對流動相系統(tǒng)進 行了詳細優(yōu)化，在采用紫外檢測器的條件下，運用高效液相色譜法同時測定上述方法制備 樣品中的Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi和人參皂巧化1的含量，色譜基線起伏較大，雜質和溶 劑對目標峰存在明顯干擾，實驗重復性差，準確度低。表明采用W上方法均不能對本品中的 Η走進行準確測定。
[0006] 蒸發(fā)光散射檢測器是一種新型的通用型檢測器，樣品流入檢測器后，經過霧化、蒸 發(fā)溶劑、激光束檢測后，能消除掉溶劑和部分雜質的紫外吸收影響，基線平整。
[0007] 基于W上情況，本發(fā)明W蒸發(fā)光散射檢測器代替紫外檢測器，對消癒止痛顆粒中 的Η走進行了含量測定研究，對各種供試液制備方法進行了實驗，最終，我們選擇了最簡單 的超聲處理法制備供試液和最簡單的流動相洗脫系統(tǒng)進行測定。該方法簡單，專屬性和重 復性好，準確度高。

【發(fā)明內容】

[0008] 本發(fā)明提供了一種消癒止痛顆粒中Η走的含量測定方法，該方法利用高效液相色 譜-蒸發(fā)光散射檢測器法，同時測定顆粒中的Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi和人參皂巧化1的 含量。本發(fā)明包括W下步驟。
[0009] 1、對照品溶液的制備；精密稱取Η走皂巧Ri對照品、人參皂巧Rgi對照品及人參皂 巧抓1對照品適量，加甲醇制成混合對照品溶液，即得。配置成高低兩種不同濃度的對照品 溶液。
[0010] 2、供試品溶液的制備；取本品適量，研細，取約l.Og，精密稱定，置具塞錐形瓶中， 精密加入30 %己臘25ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用30 %己臘補足 減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0011] 3、色譜條件；W十八烷基娃焼鍵合硅膠為填充劑；W己臘-水為流動相，按表1 中的規(guī)定進行梯度洗脫；應用蒸發(fā)光散射檢測器，漂移管溫度100~11(TC，載氣流速為 2. 0~3.化/min,流速1.0ml/min。優(yōu)選的漂移管溫度106°C，載氣流速為3.化/min。
[0012] 4、樣品分析；分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀， 測定，W外標兩點法對數方程計算結果，即得。
[0013] 有益效果：
[0014] 本發(fā)明采用蒸發(fā)光散射檢測器代替紫外檢測器同時測定本品中有效成分Η走皂 巧Ri、人參皂巧Rgi和人參皂巧化1的含量，可明顯提高測定方法的準確度、顯著縮短檢測時 間等，同時供試液的制備方法更加簡單。兩種方法比較結果見下表。本發(fā)明具有較強的專 屬性和良好的重現(xiàn)性。真正體現(xiàn)了本藥品安全、有效、質量可控。兩種測定方法中的部分圖 譜見圖1~9。
[0015] 表1兩種方法測定本品的結果比較
[0016]

【附圖說明】
[0017] 圖1 Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi、人參皂巧化1對照品的HPLC圖譜（VWD)
[001引圖2缺Η走陰性HPLC圖譜（VWD)-大孔樹脂法制備供試液 [001引圖3樣品HPLC圖譜（VWD)-大孔樹脂法巧[J備供試液
[0020] 圖4 Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi、人參皂巧化1對照品的HPLC圖譜（VWD)
[0021] 圖5缺Η走陰性HPLC圖譜（VWD)-正了醇萃取法制備供試液
[0022] 圖6樣品HPLC圖譜（VWD)-正了醇萃取法制備供試液
[0023] 圖7 Η走皂巧Ri、人參皂巧Rgi、人參皂巧化1對照品的HPLC圖譜巧LSD)
[0024] 圖8缺Η走陰性HPLC圖譜巧LSD)-超聲處理法制備供試液
[002引圖9樣品HPLC圖譜巧LSD)-超聲處理法巧[J備供試液
[0026] 圖10 Η走皂巧Ri線性關系圖
[0027] 圖11人參皂巧帖線性關系圖 [002引圖12人參皂巧抓1線性關系圖
【具體實施方式】
[0029] 實施例1
[0030] 1、儀器、試藥及樣品
[0031] 儀器；Agilentl260高效液相色譜儀，蒸發(fā)光散射檢測器（Alltech ELSD2000E巧。 Sartorius型電子天平；KQ-300E超聲波清洗器（頻率40KHZ，功率300W)，Cis色譜柱（Luna， 250 X 4. 6mm，5 μ m)。
[003引試藥；己臘和甲醇（色譜純，國藥集團化學試劑有限公司），超純水，其余試劑均為 分析純。
[003引對照品；S走皂巧Ri (含量測定化批號：110745-200617)、人參皂巧Rgi(含量測 定用，批號；110703-201027)、人參皂巧化1 (含量測定用，批號；110704-201122)，均由中國 藥品生物制品檢定所提供。
[0034] 樣品；消癒止痛顆粒（120402、120403、120404、120901、120902、120903)
[0035] 2、系統(tǒng)適用性實驗；對流動相系統(tǒng)進行了篩選和優(yōu)化，分別考察了 W甲醇-水、己 臘-水、己臘-磯酸（均采用梯度洗脫方式），最終采用己臘-水系統(tǒng)（系統(tǒng)比例見表2)， 該洗脫條件峰分離度好，時間短。
[0036] 表2 Η屯含量測定的流動相條件
[0037]
[003引 實施例2
[0039] 供試品溶液的制備；取本品顆粒適量，研細，取約l.Og，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入30 %己臘25ml，稱定重量，超聲處理20分鐘，放冷，再稱定重量，用30 %己臘補 足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。
[0040] 實施例3
[0041] 系統(tǒng)適用性實驗；根據表2的流動相條件，對漂移管溫度和載氣流速進行了考察， 漂移管溫度在l〇(TC，載氣流速為3.化/min時，測定本品中Η走的含量取得了良好的測定 效果。
[004引 實施例4
[0043] 系統(tǒng)適用性實驗；根據表2的流動相條件，對漂移管溫度和載氣流速進行了考察， 漂移管溫度在11(TC，載氣流速為2.化/min時，測定本品中Η走的含量取得了良好的測定 效果。