專利名稱:一種治療心腦血管疾病的三七和紅花復(fù)方制劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明屬醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種治療心腦血管疾病的中藥復(fù)方制劑,具體說是由中藥三七和紅花兩味藥材,或從三七、紅花中提取的得到的有效部位或有效成分按照一定的配比制成的組合物。
背景技術(shù):
紅花活血通經(jīng)、化瘀止痛,用于多種血液循環(huán)障礙疾病。臨床上以水煎液入藥,其主要水溶性組分為紅花黃色素。
三七是一味傳統(tǒng)的散瘀止血、消腫定痛的中藥。大量的研究表明,三七的有效成分為三七總皂苷。用傳統(tǒng)的提取方法提取的三七總皂苷含量不高,雜質(zhì)較多,病人用藥后的不良反應(yīng)較多,特別是注射用藥時(shí),該問題就顯得尤為重要。
中風(fēng)、冠心病、心絞痛等心腦血管疾病嚴(yán)重威脅人類的生命和健康,我國13億人口中,心腦血管疾病患者已超過了4000萬。而冠心病已成為我國3大病死原因之一,所以進(jìn)行治療藥物的研究非常必要,也是國內(nèi)外研究的熱點(diǎn)。中醫(yī)認(rèn)為氣滯血瘀是心腦血管病發(fā)病的一個(gè)主要原因,以三七、紅花組成的中藥復(fù)方用于氣滯血瘀心腦血管病,療效顯著。但傳統(tǒng)的中藥復(fù)方存在著成分不清、機(jī)理不明、質(zhì)量難控、療效不穩(wěn)的缺點(diǎn)。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種由中藥三七、紅花兩味藥材或者從二者中提取得到的有效部位或有效成分組成的藥物組合物。
本發(fā)明的中藥組合物,該組合物是由下述重量份的原料藥組成三七 0.1~150份紅花 1份或者由三七和紅花的有效部位以下述重量份組成三七總皂苷0.1-25份,紅花黃色素1份。
有效部位組份的重量配比優(yōu)選為三七總皂苷1-10份,
紅花黃色素1份。
本發(fā)明提出的中藥復(fù)方制劑,可以由二味藥材直接粉碎入藥或者經(jīng)常規(guī)方法提取制得。
上述中藥組合物所治的心腦血管疾病包括腦梗塞、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等。
將上述2種組份按配比再配上相應(yīng)的各種輔劑,即可制得各種復(fù)方制劑。
所述制劑可以是注射劑、輸液、粉針劑、片劑、膠囊劑、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑等。
所述輔助為各種制劑的常規(guī)輔料。
本發(fā)明中三七總皂苷的提取純化工藝如下三七總皂苷可溶于水和乙醇,考慮到三七中含有大量淀粉,不宜采用水和低濃度的乙醇,以免糊化。故選擇濃度為55%~95%乙醇作為提取溶劑,采取以下三種提取方法滲漉法、浸漬法、水煎醇沉法,在此基礎(chǔ)上選定乙醇濃度、提取方法和乙醇用量作為考察的3個(gè)因素,進(jìn)行三因素三水平L9(33)試驗(yàn)。結(jié)果表明影響最大的是提取方法,其次是乙醇濃度,而乙醇用量則影響很小,滲漉法的效果最好。
上述提取液(如滲漉提取液),濃縮到原體積的1/8-1/12左右后,加少量水稀釋,按比吸附量1∶1(樹脂量與藥材量)通過大孔樹脂柱,先以去離子蒸餾水洗脫,再以10倍以上(一般10-15倍)柱體積濃度為20-40%乙醇溶液洗脫,收集洗脫液,濃縮即得。其中,人參皂苷Rg1、Rb1、R1占50%以上。
紅花的有效部位紅花黃色素可按通常方法提取。
三七總皂苷和紅花黃色素組合物的藥效學(xué)試驗(yàn)(一)對(duì)犬心肌梗塞模型的治療作用為了考察不同配比的三七總皂苷和紅花黃色素的藥效,找到最佳療效的組方,設(shè)計(jì)不同試驗(yàn),觀察三七總皂苷和紅花黃色素對(duì)犬冠狀動(dòng)脈結(jié)扎造成心肌梗塞模型的治療作用。實(shí)驗(yàn)選擇的配比(紅花黃色素/三七總皂苷)為25/0、1/1、1/5、1/10、1/15、1/25、0/25,其給藥劑量總的均為2mg/kg;另加陰性對(duì)照生理鹽水組、陽性對(duì)照恬爾心組,共9組。
試驗(yàn)按有關(guān)文獻(xiàn)報(bào)告的方法進(jìn)行。分別在給藥后30min、60min、90min、120min、180min記錄心外膜電圖的變化。心外膜電圖觀察指標(biāo)以ST段升高2mV以上的導(dǎo)聯(lián)數(shù)(NST)和ST段升高值的總和(∑ST)為指標(biāo)觀察給藥前后的變化,并計(jì)算心肌缺血程度(∑ST)和范圍(NST)。以用藥后不同時(shí)間實(shí)測(cè)值與用藥前進(jìn)行比較,以用藥后不同時(shí)間變化百分率(用藥前為100%)進(jìn)行組間比較。
每組動(dòng)物數(shù)為5條,給紅花黃色素/三七總皂苷2mg/kg(臨用前用生理鹽水新鮮配制),陽性對(duì)照藥劑量為0.5mg/kg,陰性對(duì)照組給1ml/kg的生理鹽水,三者均靜脈注射單次給藥。觀察犬心外膜電圖,觀察時(shí)間為給藥后0~3小時(shí)。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下1、對(duì)心肌缺血程度(心外膜電圖∑ST)的影響冠脈結(jié)扎后,心外電圖ST段總和(∑ST)明顯升高。生理鹽水組120min時(shí)∑ST升高達(dá)26.5±12.1%;紅花黃色素和三七總皂苷靜脈給藥后均能減輕心肌缺血程度,其中1/1、1/5、1/10及陽性對(duì)照組∑ST顯著下降(P<0.01),并有一定的劑量關(guān)系。作用從給藥持續(xù)至180min,各時(shí)間點(diǎn)與生理鹽水組比較均有顯著差異(P<0.01)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表1。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,紅花黃色素和三七總皂苷靜脈給藥對(duì)犬冠脈結(jié)扎引起的急性心肌缺血程度有顯著的治療作用,且該作用與藥物配比有關(guān)。
給藥前后變化的統(tǒng)計(jì)檢驗(yàn)用各組不同時(shí)間點(diǎn)變化值與生理鹽水組同一時(shí)間點(diǎn)變化值作組間方差分析檢驗(yàn)。
2、對(duì)心肌缺血范圍(心外膜電圖N-ST)的影響紅花黃色素和三七總皂苷能縮小心肌缺血范圍,降低N-ST值,作用可持續(xù)180min。其中1/1、1/5、1/10組及陽性對(duì)照組與生理鹽水組同時(shí)間點(diǎn)比較,有顯著差異(P<0.05)或極顯著差異(P<0.01),1/10組僅在60min時(shí)差異顯著(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,紅花黃色素和三七總皂苷靜脈注射能顯著降低心肌缺血范圍,且該作用與藥物配比有關(guān)。
3、對(duì)心肌梗塞范圍的定量組織學(xué)檢測(cè)的影響用定量組織學(xué)檢測(cè)心肌梗塞范圍即用N-BT染色顯示紅花黃色素和三七總皂苷對(duì)心肌梗塞范圍的影響與心外膜電圖測(cè)定的結(jié)果一致。紅花黃色素和三七總皂苷靜脈注射均能減少心肌梗塞范圍。其中1/1、1/5、1/10組及陽性對(duì)照組與生理鹽水組比較,有顯著差異(P<0.05)或極顯著差異(P<0.01),1/15組僅對(duì)“梗塞區(qū)/全心”差異顯著(P<0.05)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表3。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,紅花黃色素和三七總皂苷靜脈給藥對(duì)犬冠脈結(jié)扎引起的心肌梗塞范圍有顯著的改善作用,且該作用與藥物配比有關(guān)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證明,紅花黃色素和三七總皂苷靜脈注射能顯著降低冠脈結(jié)扎犬的心肌缺血的程度,縮小心肌缺血范圍,定量組織學(xué)檢測(cè)與心外膜電圖測(cè)定的結(jié)果一致,與生理鹽水對(duì)照組比較,梗塞區(qū)顯著縮小,證明紅花黃色素和三七總皂苷靜脈注射對(duì)犬冠狀動(dòng)脈結(jié)扎引起的心肌梗塞有明顯的治療作用。實(shí)驗(yàn)結(jié)果還證明,紅花黃色素和三七總皂苷的配比對(duì)藥效有影響,從實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析,紅花黃色素和三七總皂苷的最佳配比應(yīng)為1/1~1/10。
(二)對(duì)大鼠腦缺血再灌注損傷的治療作用為了考察不同配比的三七總皂苷和紅花黃色素的藥效,找到最佳療效的組方,設(shè)計(jì)不同試驗(yàn),觀察三七總皂苷和紅花黃色素對(duì)尼龍線栓塞大鼠大腦中動(dòng)脈制備大鼠局灶性腦缺血再灌注模型的治療作用。實(shí)驗(yàn)選擇的配比(紅花黃色素/三七總皂苷)為10/0、1/1、1/5、1/10、1/15、1/25、0/10,其給藥劑量總的均為2mg/kg;另加陰性對(duì)照生理鹽水組、陽性對(duì)照己酮可可堿注射液組,共9組。
將大鼠用10%水合氯醛3ml/kg腹腔注射麻醉,頸正中切口,分離、結(jié)扎右側(cè)頸總動(dòng)脈近心端、頸外動(dòng)脈及其分支動(dòng)脈。分離右側(cè)頸內(nèi)動(dòng)脈,沿頸內(nèi)動(dòng)脈向下分離翼顎動(dòng)脈,根部結(jié)扎該分枝。在頸內(nèi)動(dòng)脈近端備線,遠(yuǎn)端放置動(dòng)脈夾,頸總動(dòng)脈分叉處切口,插入直徑為0.22mm尼龍線,其深度為17~20mm,栓線進(jìn)入頸內(nèi)動(dòng)脈,入顱至大腦前動(dòng)脈,阻斷大腦中動(dòng)脈所有血流來源。撤掉動(dòng)脈夾,扎緊備線,外留1cm長(zhǎng)線頭,縫合皮膚。缺血0.5小時(shí)后尾靜脈注射給藥或尾靜脈注射給溶劑對(duì)照生理鹽水。繼續(xù)缺血1.5小時(shí)后再灌注,勿需再次麻醉和切開皮膚,輕輕提拉所留線頭至有阻力時(shí)提示尼龍線頭端已至頸總動(dòng)脈切口處,血流再通。假手術(shù)組除不插線外,其余步驟同上。存活鼠再灌注24后,觀察大鼠行為變化,進(jìn)行行為評(píng)分。參考Zea Longa的5分制評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)0分,正常,無神經(jīng)損傷癥狀;1分,不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪;2分,向外側(cè)轉(zhuǎn)圈;3分,向?qū)?cè)傾倒;4分,不能自發(fā)行走,意識(shí)喪失。一部分(每組10只)分別稱左右腦半球濕重,置160℃烤箱內(nèi)24小時(shí)后稱干重,按以下公式計(jì)算腦組織含水量腦組織含水量(%)=(濕重-干重)/濕重×100%;一部分(每組10只)快速斷頭取鼠大腦,切下厚約2mm冠狀腦片,立刻置于2%TTC溶液中,37℃孵育30分鐘。梗塞區(qū)呈現(xiàn)白色,非梗塞區(qū)呈現(xiàn)紅色。數(shù)碼相機(jī)拍攝記錄,用Medbrain 2.0軟件(南京美易科技公司)測(cè)定全腦片總體積及梗塞區(qū)體積,并計(jì)算梗塞區(qū)占整個(gè)腦組織的百分比(%);另一部分(每組5只)作組織形態(tài)學(xué)觀察腦組織經(jīng)固定后,冠狀切取大腦,常規(guī)脫水,石蠟包埋制片,HE染色,光鏡檢驗(yàn)。
1、對(duì)大鼠行為的影響假手術(shù)組大鼠均無異常癥狀,行為評(píng)分為0;大鼠局灶性腦缺血2h再灌注24h損傷模型組(腦缺血0.5h尾靜脈注射溶劑),出現(xiàn)不能完全伸展對(duì)側(cè)前爪或向外側(cè)轉(zhuǎn)圈或向?qū)?cè)傾倒的神經(jīng)損傷癥狀,行為評(píng)分為1.8±0.79。腦缺血0.5h后尾靜脈注射紅花黃色素和三七總皂苷藥液1/1、1/5、1/10劑量組均可顯著降低行為評(píng)分,分別為0.8±0.54、0.7±0.19、0.6±0.21,同模型對(duì)照組比較有顯著性差異(P<0.05,P<0.01,P<0.01)。陽性對(duì)照己酮可可堿注射液組行為評(píng)分為0.80±0.79,顯著低于模型對(duì)照組(P<0.01)。
2、對(duì)腦梗塞體積的影響假手術(shù)組腦組織無梗塞,模型對(duì)照組缺血側(cè)腦組織有梗塞現(xiàn)象,梗塞區(qū)占整個(gè)腦組織的百分比為28.7±3.03%,1/1、1/5、1/10、1/15四個(gè)劑量組和陽性對(duì)照己酮可可堿注射液組均可顯著縮小缺血側(cè)腦組織梗塞體積,與模型對(duì)照組相比差異非常顯著(P<0.01),分別降低了36.2%,54.0%,70.0%,46.3%及65.2%。實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表5。
藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果表明紅花黃色素和三七總皂苷的最佳配比為1/1~1/10。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1精密稱取紅花黃色素2g,三七總皂苷2g混合后加適量注射用水溶解,再加入4g甘露醇,溶解后過0.15μm的微孔濾膜,濾液分裝后凍干,即得注射用凍干粉。
實(shí)施例2精密稱取紅花黃色素1g,加適量注射用水溶解;精密稱取三七總皂苷7g,加適量注射用水溶解。合并兩部分溶液,按常規(guī)方法制備成1000ml藥液,過濾,精濾,灌封,滅菌,檢驗(yàn),得20ml/支注射劑共50支。
實(shí)施例3取紅花藥材1kg,粉碎,干燥,過100目篩;取三七藥材0.1kg,粉碎,干燥,過60目篩。將二藥材粉末混合均勻,裝入膠囊殼中,制成5000粒膠囊。
表1 犬冠脈結(jié)扎對(duì)心外膜電圖ST段總和(∑ST)的影響(mV,x±SD,n=5)
與生理鹽水組比較**P<0.05,***P<0.01
表2 犬冠脈結(jié)扎對(duì)心肌梗塞范圍(N-ST)的影響(點(diǎn),x±SD,n=5)
與生理鹽水組比較**P<0.05,***P<0.01
表3 犬冠脈結(jié)扎后的心肌梗塞范圍(x±SD,n=5)
表4 對(duì)大鼠腦缺血2h再灌注24h的神經(jīng)病學(xué)評(píng)分的影響(x±SD)
與模型對(duì)照組比較*P<0.05,**P<0.01,
表5 對(duì)大鼠腦缺血再灌注的腦梗塞體積的影響(%,x±SD)
與模型對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01,
權(quán)利要求
1.一種治療心腦血管疾病的中藥組合物,其特征在于該組合物是由下述重量份的原料藥組成三七 0.1~150份紅花 1份或者是由三七和紅花的有效部位以下述重量份組成三七總皂苷 0.1-25份,紅花黃色素 1份。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的中藥組合物,其特征在于有效部位組份的重量配比為三七總皂苷 1-10份,紅花黃色素 1份。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的中藥組合物,其特征在于加入相應(yīng)輔料,制成注射劑、輸液、粉針劑、片劑、膠囊劑、緩釋片、滴丸、沖劑、微粒劑等。
4.一種如權(quán)利要求1、2或3所述的中藥組合物,其特征在于在制備治療腦梗塞、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明為一種治療心腦血管疾病的中藥復(fù)方制劑和其有效部位的復(fù)方制劑。該復(fù)方制劑由三七和紅花兩味藥材,或者由從三七中提取得到的三七總皂苷與從紅花中提取得到的紅花黃色素按一定的配比組合制成。本發(fā)明的復(fù)方藥物可制成各種制劑,用于治療腦梗塞、腦缺血、冠心病、心絞痛、心肌缺血、心肌梗死、心衰、心律失常等,使用安全、有效、穩(wěn)定、可控、方便。
文檔編號(hào)A61K9/20GK1660284SQ20041008952
公開日2005年8月31日 申請(qǐng)日期2004年12月14日 優(yōu)先權(quán)日2004年12月14日
發(fā)明者李捍雄 申請(qǐng)人:李捍雄