一種苯磺酸左旋氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明藥品分析領(lǐng)域，特別涉及一種苯磺酸左旋氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方 法。
【背景技術(shù)】
[0002] 現(xiàn)有苯磺酸左旋氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)檢測(cè)可以參照的方法包括歐洲藥典（EP)苯 磺酸氨氯地平原料藥有關(guān)物質(zhì)方法，美國(guó)藥典（USP)苯磺酸氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)方法，中 國(guó)藥典（Ch. P. 2015)苯磺酸氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)方法及WSl-(X-020)-2002Z苯磺酸左旋氨 氯地平片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)中有關(guān)物質(zhì)方法。
[0003] 歐洲藥典方法（EP)條件為：色譜柱：C18 (4. 6 X 250mm，5 μ m);流動(dòng)相：甲 醇-2. 3g/L乙酸銨溶液（75 :25);流速：1. 5ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)：237nm ;柱溫：30°C ;進(jìn)樣量： 20 μ 1 ;供試品貯備液：用流動(dòng)相制成含供試品lmg/ml的溶液。供試液：用流動(dòng)相將供試品 IC備液稀釋制成〇. 〇5mg/ml的溶液。對(duì)照液a :用流動(dòng)相將供試品IC備液稀釋制成1 μ g/ ml的溶液。系統(tǒng)適用性溶液：用流動(dòng)相制成含氨氯地平雜質(zhì)B和G各10 μ g/ml的混合溶 液。峰鑒別溶液：稱取氨氯地平峰鑒別對(duì)照品（內(nèi)含主成分、雜質(zhì)D、E及F)5mg，用流動(dòng)相 稀釋至l〇ml。雜質(zhì)A對(duì)照品溶液：用乙腈將氨氯地平雜質(zhì)A制成lmg/ml的溶液后再用流 動(dòng)相稀釋成1 μ g/ml的溶液。對(duì)照品溶液：用流動(dòng)相制成含對(duì)照品0. 05mg/ml的溶液。雜 質(zhì)定位：主峰保留時(shí)間約為20min，各已知雜質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間分別為G ^ 0. 21，B ^ 0. 25， D~0. 5, F~0. 8, E~1. 3。根據(jù)各已知雜質(zhì)相對(duì)保留時(shí)間、系統(tǒng)適用性溶液、峰鑒別溶液 和雜質(zhì)A對(duì)照品溶液來(lái)共同對(duì)各已知雜質(zhì)進(jìn)行定位。系統(tǒng)適應(yīng)性要求：雜質(zhì)B與G的分離 度不低于2.0。限度：雜質(zhì)D(乘以校正因子1.7)不得過(guò)0.3%，雜質(zhì)A不得過(guò)0. 15%，雜 質(zhì)E不得過(guò)0. 15%，雜質(zhì)F(乘以校正因子0.7)不得過(guò)0. 15%，總雜不得過(guò)0.8% (0. 1% 以下雜質(zhì)忽略不計(jì)）。各已知雜質(zhì)化學(xué)名稱如下：雜質(zhì)A S3-ethyl5_methyl(4RS)-4-(2-chlorophenyl)-2-[[2-(I, 3-diox0-l, 3-dihydr0-2H-isoindol-2-yl)ethoxy]methyl]-6-methyl-l, 4-dihydropyridine_3, 5-dicarboxylate，雜質(zhì) B 為 3-ethyl5_methyl (4RS) -4-( 2-chlorophenyI)-6-methyl-2-[[2-[[2-(methylcarbamoyl)benzoyl]amino]-ethoxy]met hyl] -l，4-dihydropyridine-3,5_dicarboxylate，雜質(zhì) D 為 3-ethyl5-methyl2-[(2_amin oethoxy)methyl]-4(2-chlorophenyl)-6-methylpyridine_3, 5-dicarboxylate，雜質(zhì) E 為 diethyl(4RS)-2-[(2-aminoethoxy)methyl]-4-(2-chlorophenyl)-6-methyl-l，4-dihydr opyridine-3, 5-Dicarboxylate，雜質(zhì) F 為 dimethyl(4RS)-2-[(2_aminoethoxy)methyl]-4 -(2-chlorophenyl) -6-methyl-l，4-dihydropyridine_3, 5-dicarboxylate，雜質(zhì) G 為 dime thyl4_(2-chlorophenyl)-2, 6-dimethyl-l, 4-dihydropyridine_3, 5-dicarboxylate 美國(guó) 藥典方法（USP):色譜柱：3. 9X150mm，5ym ODS柱；流動(dòng)相：甲醇-乙腈-0.7%三乙胺溶 液（取三乙胺7. 0ml，加水稀釋至1000ml，用磷酸調(diào)節(jié)pH至3· 0±0· 1) (35 :15 :: 50);流速： 1.0 ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)：237nm ;進(jìn)樣量：50 μ 1。供試品溶液：用流動(dòng)相制成含供試品0. 4mg/ ml的溶液。
[0004] 對(duì)照溶液：用流動(dòng)相制成含苯磺酸氨氯地平0. 02mg/ml和氨氯地平USP雜質(zhì) A0.00 2mg/ml的溶液。系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：同對(duì)照溶液。系統(tǒng)適應(yīng)性要求：主峰保留時(shí)間約為 18min，主峰與氨氯地平USP雜質(zhì)A的分離度不小于8. 5 ;主峰與氨氯地平USP雜質(zhì)A的拖 尾因子均不大于2. 0 ;主峰峰面積的RSD不大于1. 0%，氨氯地平USP雜質(zhì)A峰面積的RSD 不大于5.0%。限度：氨氯地平USP雜質(zhì)A(相對(duì)保留時(shí)間0.50)不得過(guò)1.0%，乳糖加合物 (相對(duì)保留時(shí)間0.80)不得過(guò)0.5%，葡萄糖/半乳糖加合物（相對(duì)保留時(shí)間0.90)不得過(guò) 0· 5 %，其他任意單雜不得過(guò) 0· 20 %。USP 雜質(zhì) A 為 3-Ethyl, 5-methyl [2- (2-aminoethoxy methyl)-4- (2-chlorophenyl)-6-methyl_3, 5-pyridinedicarboxylate]〇
[0005] 中國(guó)藥典方法（Ch. P. 2015):色譜柱為 Phenomenex Luna C18 (4. 6 X 250mm，5 μ m) 或效能相當(dāng)?shù)纳V柱，進(jìn)樣量為20μ1，其他色譜條件同美國(guó)藥典方法（USP)。供試品溶液： 用流動(dòng)相制成含供試品lmg/ml的溶液。對(duì)照溶液：用流動(dòng)相將供試品溶液稀釋制成10 μ g/ ml的溶液。系統(tǒng)適應(yīng)性溶液：取苯磺酸氨氯地平對(duì)照品5mg，加濃過(guò)氧化氫溶液5ml，置 70°C加熱10~30min。系統(tǒng)適應(yīng)性要求：主峰保留時(shí)間約為18min，主峰與氨氯地平雜質(zhì)I 峰（相對(duì)保留時(shí)間約為〇. 5)的分離度應(yīng)大于4. 5,理論板數(shù)按氨氯地平峰計(jì)不低于3000。 限度：氨氯地平雜質(zhì)I (乘以校正因子2)不得過(guò)1.0%，其他任意單雜不得過(guò)0.5%，總雜 不得過(guò)1.5% (0.03%以下雜質(zhì)忽略不計(jì)）。氨氯地平雜質(zhì)I為2-[(2_氨基乙氧基）甲 基]-4-(2-氯苯基）-6-甲基-3, 5-吡啶二羧酸-5-甲酯，3-乙酯。
[0006] 13^^-020)-20022苯磺酸左旋氨氯地平片質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)方法：色譜柱：C18 ;流動(dòng)相： 甲醇-0· 03mol/L磷酸二氫鉀溶液（75 :25);流速：1.0ml/min ;檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm ;進(jìn)樣量： 20 μ 1。供試品溶液：用流動(dòng)相制成含供試品0. 25mg/ml的溶液。系統(tǒng)適應(yīng)性要求：理論 板數(shù)按左旋氨氯地平計(jì)應(yīng)不低于500。限度：除去溶劑峰，按面積歸一化法計(jì)，總雜不得過(guò) 1. 0%〇

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的目的是提供一種苯磺酸左旋氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，主峰與相 鄰雜質(zhì)峰能完全分尚。
[0008] -種苯磺酸左旋氨氯地平片有關(guān)物質(zhì)的檢測(cè)方法，包括：
[0009] 1)高效液相色譜；
[0010] 2)填充劑：十八烷基硅烷鍵合硅膠；
[0011] 3)色譜柱：Welch Ultimatei:. C18 ;
[0012] 4)流動(dòng)相：2. 3g/L乙酸銨溶液為流動(dòng)相A，甲醇為流動(dòng)相B ;
[0013] 5)檢測(cè)波長(zhǎng)：238nm ;
[0014] 6)柱溫：25-30 °C ;
[0015] 7)梯度洗脫程序：
[0016] 0-5分鐘時(shí)間段，流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比由55:45線性變化為40:60,并維 持該體積比20分鐘；
[0017] 20-30分鐘時(shí)間段，流動(dòng)相A與流動(dòng)相B的體積比由40:60線性變化為25:75,并 維持該體積比至50分鐘；
[0018] 50分鐘后流動(dòng)相A與流動(dòng)相B以體積比55:45運(yùn)行10分鐘；
[0019] 8)供試品前處理：取供試品細(xì)粉適量，加溶劑溶解并稀釋制成每1ml中含左旋氨 氯地平0. 5mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液適量，用溶劑稀釋制成每1ml 中含左旋氨氯地平5 μ g的溶液，作為對(duì)照溶液。
[0020] 9)限度：
[0021] 供試品溶液的色譜圖中如有雜質(zhì)峰，雜質(zhì)D校正后峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰 面積的〇. 8倍，其他任一雜質(zhì)峰面積不得大于對(duì)照溶液主峰面積的0. 2倍，各雜質(zhì)峰面積之 和不得大于對(duì)照溶液主峰面積；
[0022] 所述雜質(zhì)D為歐洲藥典苯磺酸氨氯地平原料藥有關(guān)物質(zhì)方法項(xiàng)下的雜質(zhì)D，中國(guó) 藥典苯磺酸氨氯地平有關(guān)物質(zhì)方法項(xiàng)下的雜質(zhì)I，美國(guó)藥典方法苯磺酸氨氯地平片有關(guān)物 質(zhì)方法項(xiàng)下的雜質(zhì)A，四者是同一種物質(zhì)，相對(duì)保留時(shí)間0. 61 ;
[0023] 所述雜質(zhì)D校正后峰面積=峰面積X校正因子2. 3 ;
[0024] 除去相對(duì)保留時(shí)間0. 2之前的色譜峰，供試品溶液色譜圖中任何小于對(duì)照溶液主 峰面積0. 05倍的峰忽略不計(jì)。
[0025] 系統(tǒng)適應(yīng)性理論板數(shù)按左旋氨氯地平峰計(jì)算多4000,左旋氨氯地平峰與相鄰雜質(zhì) 峰的分離度多1. 5。