一種四磨湯口服液的指紋圖譜測定方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物質量控制技術領域，特別涉及一種四磨湯口服液的指紋圖譜檢測 方法，并由此得到其標準指紋圖譜。
【背景技術】
[0002] 四磨湯由木香、檳榔、枳殼、烏藥4味藥材組成。該方主要具有順氣降逆，消積止痛 之功效，常用于嬰幼兒乳食內(nèi)滯證，癥見腹脹、腹痛、啼哭不安、厭食納差、腹瀉或便秘，中老 年氣滯、食積證，癥見脘腹脹滿、腹痛、便秘，以及腹部手術后促進腸胃功能的恢復。在臨床 上應用較為廣泛。
[0003] 四磨湯中的木香乃方中的君藥，主要含有揮發(fā)油類成分，該類成分是木香發(fā)揮行 氣止痛、健脾消食作用的主要成分，同時還具有松弛平滑肌和解痙的作用。
[0004] 四磨湯口服液作為中成藥，其藥效是多種活性成分共同作用的結果。目前四磨 湯口服液現(xiàn)行的質量標準為WS-10040- (ZD-0040)-2002,僅測定單一指標成分柚皮苷的 含量，未對其他有效成分進行監(jiān)測，存在一定局限性，不能全面反映四磨湯口服液的質量水 平。針對四磨湯口服液的質量檢測方法的公開專利只有二個，中國專利201110074548. 7 (公開號CN102221590A)采用HPLC法控制其辛弗林、去甲異波爾定及檳榔堿的含量，中國專 利201110125049. 6 (公開號CN102346177A)采用HPLC法構建指紋圖譜對其質量進行控制。 經(jīng)報道針對四磨湯口服液的質量檢測方法如下，《中國藥事》2014年第28卷第3期《四磨 湯口服液質量標準補充研究》中記錄了用HPLC法測定四磨湯口服液中辛弗林、去甲異波爾 定、檳榔堿、柚皮苷、新城皮苷含量、《醫(yī)藥導報》2009年6月第28卷增刊《高效液相色譜法 測定四磨湯口服液中柚皮苷的含量》、《白求恩軍醫(yī)學院學報》2010年8月第8卷第4期《高 效液相色譜法測定四磨湯口服液中柚皮苷含量方法改進》等文章中記載了一種測定四磨湯 口服液中柚皮苷含量的HPLC方法；《湖南中醫(yī)藥大學學報》2009年8月第29卷第4期《高 效液相色譜法測定四磨湯口服液中檳榔堿的含量》記載了一種測定四磨湯口服液中檳榔堿 含量的HPLC方法；《中國醫(yī)藥導刊》2009年第11卷第1期《HPLC法測定四磨湯口服液中 辛弗林的含量》記載了一種測定四磨湯口服液中辛弗林含量的HPLC方法?，F(xiàn)有技術中，雖 然對四磨湯口服液的多項指標成分進行了控制，但尚無對其揮發(fā)性成分進行有效控制的方 法，因此建立針對揮發(fā)性成分的指紋圖譜檢測方法對控制四磨湯口服液的質量具有非常重 要的意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種四磨湯口服液的指紋圖譜檢測方法，通過該測定方法可 控制四磨湯口服液中的揮發(fā)性成分從而控制其質量，以保證其臨床療效。
[0006] 本發(fā)明為一種四磨湯口服液的指紋圖譜檢測方法，其特征在于采用氣質聯(lián)用的方 法檢測，包括以下步驟： (1)供試品溶液的制備：取四磨湯口服液，用揮發(fā)油提取器提取，即得供試品溶液； (2) 氣相色譜條件：色譜柱為彈性石英毛細管柱；色譜柱程序升溫條件：初始溫度 45-60°C (保持 7min)，以 2-3°C /min 升溫至 65-75°C (保持 lOmin)，再以 2-3°C /min 升溫 至190-2KTC;氣化室溫度245-260°C;載氣為高純度氦氣；載氣流量為I. 53mL/min ;進樣量 為0. 1 μ L ;分流比為1:50 ; (3) 質譜條件：離子源為電噴霧離子源（ΕΙ)，離子源溫度為220~240°C ;電子能量為 70ev ;質量范圍為35_400m/z ; (4) 測定：采用氣質聯(lián)用測定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜-質譜聯(lián)用儀，測定，記 錄70min色譜圖，得到指紋圖譜。
[0007] 本發(fā)明中，所述供試品溶液的制備方法采用揮發(fā)油提取器提取2~4h，優(yōu)選的提取 時間為3h。
[0008] 本發(fā)明中，所述色譜柱為彈性石英毛細管柱，優(yōu)選的色譜柱以交聯(lián)5%苯基甲基聚 硅氧烷為固定相。
[0009] 本發(fā)明中，所述優(yōu)選的色譜柱程序升溫條件為：初始溫度50°C (保持7min)，以 2. 5°C /min 升溫至 70°C (保持 lOmin)，再以 2. 5°C /min 升溫至 200°C。
[0010] 本發(fā)明中，所述的氣化室溫度250°C ;載氣為高純度氦氣；載氣流量I. 53mL/min ; 分流比1:50。
[0011] 本發(fā)明中，精密吸取注入氣相色譜儀的供試品溶液的進樣量為0. 1 μ 1。
[0012] 本發(fā)明中，采用氣質聯(lián)用儀測定；吸取供試品溶液，注入氣相色譜-質譜聯(lián)用儀， 測定，記錄70min色譜圖，根據(jù)譜庫檢索鑒定各峰對應組分的結構，并對色譜峰用面積歸一 法進行計算，求取各組分的百分含量，以5號峰α -松油醇為參照峰，計算相對保留時間。
[0013] 本發(fā)明中，所述的四磨湯口服液的指紋圖譜中單個峰面積均超過總峰面積1%并 確定成分的共有峰有8個，確定的成分如下：1號峰為順-α，α-5-三甲基-5-乙烯基四 氫化呋喃-2-甲醇、2號峰為反式氧化芳樟醇、3號峰為芳樟醇、4號峰為（R)- (-)-4-萜品 醇、5號峰為α-松油醇、6號峰為香葉醇、7號峰為內(nèi)型_1，3, 3-三甲基二環(huán)[2.2.1]庚 烷-2-醇乙酸酯、8號峰為亞麻酸。
[0014] 本發(fā)明中，所述的四磨湯口服液的指紋圖譜中單個峰面積均超過總峰面積1%的 共有峰有8個，以5號峰α -松油醇為參照峰，計算相對保留時間，各峰的相對保留時間分 別為：（1)0. 523~0· 641、（2)0. 564~0· 689、（3)0. 610~0· 789、、（4)0. 825~0· 970、（5)1. 000、 (6) I. 266~1. 548、（7) I. 313~1. 618、（8) 2. 665~3. 035 ;優(yōu)選的各峰相對保留時間分別為： (1) 0· 567~0· 601、（2) 0· 594~0· 641、（3) 0· 621~0· 761、（4) 0· 865~0· 930、（5) 1. 000、（6) L 342~1· 494、（7) L 353~1· 548、（8) 2. 765~2· 914。
[0015] 本發(fā)明優(yōu)點如下： (1)四磨湯口服液中的木香、枳殼含有較多的揮發(fā)性成分，但現(xiàn)有質量標準中未對其進 行控制，以四磨湯口服液中的揮發(fā)性成分為指標建立的氣質聯(lián)用指紋圖譜能有效的表征四 磨湯口服液的質量； (2 )本發(fā)明具有穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性好、精密度高的特點。
[0016] 下面結合最佳實施方式和附圖對本發(fā)明作進一步的解釋說明，對本發(fā)明不構成限 制。
【附圖說明】
[0017] 圖1為10批次樣品圖譜比較，譜圖基本一致表明有效成分含量基本一致。
[0018] 圖2對照指紋圖譜。
[0019]
【具體實施方式】一四磨湯口服液指紋圖譜的構建 下面通過具體實施例對本發(fā)明作進一步說明，該實施例僅用于說明本發(fā)明，并不限制 本發(fā)明的范圍。
[0020] (1)儀器與試藥 島津QP2010UItra型GC/MS氣質聯(lián)用儀及GCMSsolutions工作站； HP-5MS石英毛細管柱（30mX0. 25mmX0. 25μπι)，安捷倫科技有限公司； MEGA-5MS石英毛細管柱（30mΧ0. 25mmΧ0. 25 μ m)，意大利麥格色譜公司； 四磨湯口服液(廠家：湖南漢森制藥股份有限公司、批號=1408210、1408211、1408212、 1408310、1408309、1407205、1404306、1404302、1404309、1404318)。
[0021] (2)色譜條件的選擇。
[0022] 升溫程序的選擇 由于樣品中成分復雜，需對升溫程序進行摸索，當按以下程序進行升溫時，樣品中各組 分均有較好的分離，基線平穩(wěn)，故選用該升溫程序