一種石柑子中阿魏酰酪胺含量的快速測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及中藥質(zhì)量檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種石柑子中阿魏酰酪胺含量的快 速測定方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 石柑子是天南星科石柑屬植物石柑子Pothos chinensis (Raf. )Merr.的干燥全 草，別名萌蘆鉆、柚子楓、石蜈蚣、爬崖香等，是瑤族地區(qū)治療跌打損傷、風(fēng)濕骨痛的常用藥 之一。然而由于瑤族無自身文字，瑤族醫(yī)藥知識的繼承和傳播完全靠耳口相傳，導(dǎo)致瑤藥在 使用過程中存在同名異物和同物異名的混亂狀況，臨床用藥的安全性和有效性難以得到保 證，同時也給瑤藥進一步的開發(fā)利用和質(zhì)量標準的制定帶來了巨大的困難。目前，石柑子僅 收載于《全國中草藥匯編》和各地方植物志。
[0003] 石柑子作為瑤族常用中藥，目前僅以性狀鑒別作為鑒別依據(jù)，缺乏量化指標和手 段，方法十分粗淺，不僅缺乏專屬性，且也難以對藥材的真?zhèn)魏蛢?yōu)劣進行準確的評價。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 本發(fā)明的目的在于提供石柑子中阿魏酰酪胺的含量快速測定方法，利用高效液相 色譜技術(shù)對石柑子中阿魏酰酪胺成分進行含量測定，旨在建立一種石柑子的質(zhì)量評價方 法，該方法滿足制藥過程中石柑子藥材質(zhì)量控制的要求。
[0005] 本發(fā)明為實現(xiàn)上述目的所提供的技術(shù)方案是：
[0006] -種石柑子中阿魏酰酪胺含量的快速測定方法，其特征在于該方法包括以下步驟 和條件：
[0007] (1)色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液 (35 : 65)為流動相；檢測波長為318nm ;
[0008] (2)對照品溶液的制備：取阿魏酰酪胺對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每ImL 含143. 6 μ g的溶液，即得；
[0009] (3)供試品溶液的制備：取本品粉末（過四號篩）約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz) 30分鐘，放冷， 再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0010] (4)含量測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜 儀，測定，即得；
[0011] (5)對阿魏酰酪胺對照品溶液的線性范圍的考察及精密度、穩(wěn)定性、重復(fù)性、加樣 回收試驗：
[0012] (51)線性范圍的考察：精密吸取阿魏酰酪胺對照品溶液1，2,4,6,8,10mL，分別 置于IOmL量瓶中，加甲醇定容至刻度，搖勻，制成濃度分別為14. 36, 28. 72, 57. 44,86. 16， 114. 88,143. 60 μ g/mL的對照品溶液。精密吸取上述對照品溶液各10 μ L，注入液相色譜儀 中，按照步驟（1)色譜條件進行測定；以峰面積積分值為縱坐標（Y)，以進樣量（ng)為橫坐 標（X)進行線性回歸，得回歸方程Y = 3.32X 102X+9. 46X102, r = 0.99998,結(jié)果表明牡 荊苷在143. 6~1436. Ong范圍內(nèi)，其進樣量與峰面積呈良好線性關(guān)系；
[0013] (52)精密度試驗：精密吸取同一對照品溶液（阿魏酰酪胺71. 8 μ g/mL) 10 μ L，注 入液相色譜儀，按照色譜條件重復(fù)進樣6次，記錄色譜圖，結(jié)果表明，阿魏酰酪胺的峰面積 值RSD為0. 29%，表明儀器穩(wěn)定，精密度良好；
[0014] (53)穩(wěn)定性試驗：精密吸取同一供試品溶液（S9)10yL，分別于0，1，2,4,8，12， 24h注入液相色譜儀，按照色譜條件進行測定，記錄色譜圖，結(jié)果表明，阿魏酰酪胺的峰面積 值RSD為0. 24%，表明供試品溶液在24h內(nèi)穩(wěn)定性良好；
[0015] (54)重復(fù)性試驗：取同一批石柑子樣品（S9)，平行精密稱取6份，按照步驟（3) 方法制備供試品溶液，按照色譜條件進行測定，記錄色譜圖，計算供試品中阿魏酰酪胺的含 量，結(jié)果表明阿魏酰酪胺的平均含量為，RSD為0. 85%。表明此方法重現(xiàn)性良好；
[0016] (55)加樣回收試驗：取同一批含阿魏酰酪胺0. 065%的石柑子樣品（S9)9份，每份 lg，精密稱定，分別精密加入一定量的阿魏酰酪胺對照品溶液25mL，按照步驟（3)方法制備 供試品溶液，按照色譜條件進行測定，計算回收率，結(jié)果表明，阿魏酰酪胺的平均回收率為 99. 53%，RSD為1. 31% (η = 9)，表明本測定方法回收率良好，準確度較高。
[0017] 本發(fā)明的優(yōu)點在于：本發(fā)明的測定方法簡單、快速、準確、靈敏度高、精密度、穩(wěn)定 性好，可測定石柑子樣品中阿魏酰酪胺的含量，可用于制藥過程中石柑子藥材質(zhì)量控制
[0018] 下面結(jié)合附圖與【具體實施方式】，對本發(fā)明進一步詳細說明。
【附圖說明】
[0019] 圖1，阿魏酰酪胺全波長掃描圖；
[0020] 圖2，石柑子中阿魏酰酪胺含量測定HPLC色譜圖；
[0021] 圖3,阿魏酰酪胺標準曲線。
【具體實施方式】
[0022] 本發(fā)明提供的石柑子中阿魏酰酪胺含量的快速測定方法，該方法包括以下步驟和 條件：
[0023] (1)色譜條件：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.4%磷酸溶液 (35 : 65)為流動相；檢測波長為318nm ;理論板數(shù)按阿魏酰酪胺峰計算應(yīng)不低于1500 ;
[0024] (2)對照品溶液的制備：取阿魏酰酪胺對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每ImL 含143. 6 μ g的溶液，即得；
[0025] (3)供試品溶液的制備：取本品粉末（過四號篩）約2g，精密稱定，置具塞錐形瓶 中，精密加入甲醇25mL，密塞，稱定重量，超聲處理（功率250W，頻率40kHz) 30分鐘，放冷， 再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；
[0026] (4)含量測定：分別精密吸取對照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜 儀，測定，即得，并記錄色譜圖，見圖2 (Α :阿魏酰酪胺對照品；B :供試品）。
[0027] 其中，儀器選用Waters e2695_2489型高效液相色譜儀（美國）：PAD檢測器，四 元梯度栗，Empower2數(shù)據(jù)處理軟件系統(tǒng)；Millipore Advantage AlO超純水系統(tǒng)（美國）； Mettler Toledo XS205DU型電子分析天平（瑞士）；KQ5200DE型數(shù)控超聲波清洗器（昆山 市超聲儀器有限公司）；HH-8型數(shù)顯恒溫水浴鍋（金壇市科析儀器有限公司）。
[0028] 試劑選用阿魏酰酪胺（自制，純度彡99. 5% );液相用甲醇為色譜純（Merck); 液相用水為超純水；提取用水為廣東省第二中醫(yī)院制劑室自制純化水；其余試劑均為分析 純。
[0029] 步驟（1)中，色譜條件的建立：采用PDA二極管陣列檢測器，對阿魏酰酪胺對照品 進行全波長掃描。結(jié)果表明，阿魏酰酪胺在318nm有最大吸收，見圖1。故選擇318nm作為 含量測定的檢測波長。
[0030] 色譜柱：Thermo 0DS-2 Hypersil 色譜柱（4. 6 X 250mm，5 μ m);流動相：甲 醇-0.4%磷酸（35 : 65);檢測波長：318nm;流速：1.0mL/min