用于向gpc3靶向治療劑療法有效的患者施予的gpc3靶向治療劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】 本發(fā)明提供一種確定GPC3祀向治療劑療法對患者的癌癥的有效性、或確定是否繼續(xù) 對患者實施GPC3祀向治療劑療法的方法，W及用于向已確定GPC3祀向治療劑療法有效的 患者、或已確定繼續(xù)實施GPC3祀向治療劑療法的患者進一步施予的GPC3祀向治療劑或制 劑。
【背景技術(shù)】 有報道稱，由肝細胞癌引起的死亡全年約有60萬，在世界由癌癥引起的死亡中位居第 五位（非專利文獻1)。大部分肝細胞癌患者在診斷為該疾病后1年W內(nèi)死亡。不幸的是， 經(jīng)常出現(xiàn)在能夠治愈的療法不怎么奏效的后期階段被診斷出肝細胞癌的例子。包括化學(xué)療 法、化學(xué)栓塞術(shù)、燒灼和質(zhì)子束療法在內(nèi)的醫(yī)療處置對上述患者的效果依然不充分。大多 數(shù)患者表現(xiàn)出疾病復(fù)發(fā)，該情況伴隨血管浸潤及多部位肝內(nèi)轉(zhuǎn)移迅速發(fā)展到進行階段，其5 年存活率僅為7% (非專利文獻2)?？蓪嵤┚植堪┣谐g(shù)的肝細胞癌患者的預(yù)后較好，但 其5年存活率仍停留在15%~39% (非專利文獻3)。本技術(shù)領(lǐng)域中，要求開發(fā)出針對上述 惡性疾病即肝細胞癌的新型療法。 有報道稱，在日本，肝細胞癌占原發(fā)性肝癌的90 %W上。作為針對如此的肝細胞 癌的內(nèi)科治療方法，例如可W采用TAE(經(jīng)導(dǎo)管動脈栓塞術(shù)（transcatheterarterial embolization))，目P，使用化療劑，將油性造影劑（Lipiodol)、抗癌劑和栓塞物質(zhì) (Gel化am)混和后注入肝動脈（其會成為對腫瘤的營養(yǎng)供給通路），將營養(yǎng)動脈阻塞，由 此選擇性地導(dǎo)致肝細胞癌壞死的治療方法，除此W外，也可W采用經(jīng)皮己醇注入法、經(jīng)皮 微波凝固療法、無線電波燒灼療法等帶有侵害的方法。此外，作為將化療劑單獨使用或與 IFN(干擾素）合并使用進行治療的方法，已進行了全身化學(xué)療法的臨床試驗，所述化療劑 為5-FU(氣尿喀晚）、UFT(尿喀晚和替加氣（Tegafur))、MMC(絲裂霉素C)、DHAD(米托慈 釀）、ADR(阿霉素）、EPI(表阿霉素）、crop(順銷）等（非專利文獻4)。 在上述研究過程中，口服活性型的索拉非巧（Sorafenib) (Nexavar，BAY43-9006)已得 到認可，其在Raf激酶的階段抑制Raf/Mffi/ERK信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，從而阻斷癌細胞的增殖，并且將 VEGFR-2、VEGFR-3及PDGFR- 0酪氨酸激酶作為祀標，從而發(fā)揮抗血管形成效果，與上述化 療劑相比顯示出了更有利的效果。針對索拉非巧的有效性，在兩個W進行性肝細胞癌為對 象的III期多中屯、共同安慰劑對照比較試驗（SHARP試驗及亞洲?太平洋地區(qū)實施的試驗） 中進行了研究。在上述任一試驗中，均確認到了生存期的延長，且皿為0.68。SHARP試驗 中，生存期從7. 9個月延長至10. 7個月。另一方面，在亞洲的試驗中，生存期從4. 2個月延 長至6.5個月。但是，客觀奏效率低，雖然到圖像上的腫瘤發(fā)展之前的期間有所延長（在歐 美的試驗中從2. 8個月延長至5. 5個月，在亞洲的試驗中從1. 4個月延長至2. 8個月），但 并未確認到到癥狀惡化之前的期間的延長。亞洲人群組中的生存延長期短，認為其原因是： 與歐美相比，亞洲地區(qū)在疾病過程的稍晚時期開始治療（非專利文獻5、6)。 通常，伴隨肝癌的進展，可觀察到伴有肝功能障礙的肝癌特有的癥狀，如食欲不振、體 重減少、全身倦怠感、可觸知的右季肋部腫瘤、右季肋部痛、腹部膨滿感、發(fā)熱、黃痘等。然 而，索拉非巧等化療劑存在下述必須克服的問題，即，還會并發(fā)化療劑固有的副作用，如腹 瀉或便秘、貧血、引起（致死性的嚴重程度的）感染及敗血癥程度的免疫系統(tǒng)的抑制、出血、 屯、毒性、肝毒性、腎毒性、食欲不振、體重減少等。 通常，在初期觀察不到肝癌的特別的初期癥狀，但伴隨肝癌的進展，可觀察到伴有肝功 能障礙的肝癌特有的癥狀，如食欲不振、體重減少、全身倦怠感、可觸知的右季肋部腫瘤、右 季肋部痛、腹部膨滿感、發(fā)熱、黃痘等。在臨床上觀察到該些癥狀會因使用上述化療劑而加 劇。例如，關(guān)于檢測出肝癌細胞的患者的食欲不振、及伴隨食欲不振或與其相獨立地產(chǎn)生的 體重減少等癥狀，通過對該患者施予化療劑，與不施予化療劑相比，有時會加劇。出現(xiàn)上述 那樣的癥狀時，有時不得不停止使用該化療劑，上述癥狀的加劇成為妨礙利用化療劑進行 治療的主要原因。因此，從治療效果的提高、接受治療的患者的QOL改善等觀點來看，要求 確立更優(yōu)異的治療方法。 由于磯脂酷肌醇蛋白聚糖3 (GPC3)在肝癌中頻繁地高度表達，所W認為GPC3能用作確 定GPC3在肝癌中的作用的祀標、肝癌治療的祀標或肝癌診斷的祀標。 在上述情況下，開展了對將GPC3作為肝癌治療的祀標的治療劑的開發(fā)。開發(fā)出了一種 含有抗GPC3抗體作為有效成分的肝癌治療劑，所述抗GPC3抗體對表達GPC3的細胞具有抗 體依賴性細胞損傷（Antibody-dependentcellularc}ftotoxicity，W下記為"ADCC"。）活 性和/或補體依賴性細胞損傷（Complement-dependentc}ftotoxicity，W下記為"CDC")活 性（專利文獻1)。此外，開發(fā)出了含有人源化抗GPC3抗體作為有效成分的GPC3祀向治療 劑，所述人源化抗GPC3抗體具有ADCC活性及CDC活性（專利文獻2)。進而，除含有ADCC 活性被增強了的人源化抗GPC3抗體的GPC3祀向治療劑（專利文獻3、4)W外，還開發(fā)出了 含有具有ADCC活性及CDC活性、且血漿中的動態(tài)被改善了的抗GPC3抗體的GPC3祀向治療 劑（專利文獻5)。此外，還表達了通過上述抗GPC3抗體與索拉非巧等化療劑的并用療法， 能夠減弱利用索拉非巧等化療劑的單獨療法所帶來的副作用等，并且顯示出由兩種藥劑產(chǎn) 生的協(xié)同效果（專利文獻6)，從治療效果的提高、接受治療的患者的WL改善等觀點來看， WGPC3祀向治療劑為核屯、的更優(yōu)異的肝癌治療方法不斷確立。 另一方面，還開展了對將GPC3作為肝癌診斷的祀標的診斷方法的開發(fā)。已知GPC3在 向細胞表面表達的過程中或在表達之后，在該特定部位通過轉(zhuǎn)化酶、磯醋酶D、Notum或未 確定的機制受到加工（非專利文獻7、8)。通過利用上述現(xiàn)象，已開發(fā)了含有下述抗體的肝 癌的診斷藥物或診斷方法，所述抗體是存在于患者的血漿中的、與經(jīng)加工后被分泌至血漿 中的可溶型GPC3的表位相結(jié)合的抗體（專利文獻7)。此外，已開發(fā)了含有下述抗體的肝癌 的診斷藥物或診斷方法，所述抗體是存在于從患者分離的組織標本等中的、與經(jīng)加工后仍 存在于細胞表面的錯定型GPC3的表位相結(jié)合的抗體（專利文獻8)。然而，上述診斷藥物或 診斷方法是檢測受試患者中的肝癌的存在的方法，對于確定GPC3祀向治療劑療法在接受 過該療法的患者中的有效性的方法、或確定是否繼續(xù)對該患者實施GPC3祀向治療劑療法 的方法，尚未可知。 本說明書中引用的參考文獻如下所述。該些文獻中記載的內(nèi)容全部通過引用并入本說 明書中。需要說明的是，對于本說明書而言，該些文獻中的任一篇均不是現(xiàn)有技術(shù)。 現(xiàn)有技術(shù)文獻 專利文獻 專利文獻 1 ;W02003/000883 專利文獻 2 ;W02006/006693 專利文獻 3 ;W02006/046751 專利文獻 4 ;W02007/047291 專利文獻 5 ;W02009/041062 專利文獻 6 ;W02009/122667 專利文獻 7 ;W02004/038420 專利文獻 8 ;W02009/116659 非專利文獻 非專利文獻 1;LlovetJM，Burrou曲SA,化uixJ;Lancet(2003)，362, 1907-17 非專利文獻 2;BoschKK,RibesJ,CleriesRgastroenterology(2004), 127,S5-16 非專利文獻 3;TakenakaK,KawaharaN,YamamotoK,KajiyamaK,MaedaT,Itasaka H,ShirabeK,NishizakiT,YanagaK,SugimachiK；ArchSurg(1996), 131, 71-6 非專利文獻 4;YeoW,MokTS,ZeeB,LeungTW,LaiPB,LauWY,KohJ,MoFK,化SC,QianAT,HuiP,MaB,LamKC,HoWM,WongHT,TangA,JohnsonPJ;J化1:1Cancer Inst(2005), 97, 1532-8 非專利文獻5;LlovetJ,RicciS,MazzaferroV,HilgardP,GaneE,etal.Sorafenib inadvancedhepatocellularcarcinoma.NewElng.J.Med. (2008)359, 378-90 非專利文獻6;QiengA^OienZ,TsaoCJ,QinS,KimJS,etal.Efficacyand safetyofsorefanibinpatientsintheAsia-Pacificregionwithadvanced hepatocellularcarcinoma:aphaseIIIrandomized,double-blind,placebo-controll edtrial.LancetOncol. (2009) 10, 非專利文獻 7:DeCatB,MuyldermansS-Y,CoomansC,DegeestG,Vanderschueren B,etal.Processingbyproproteinconvertasesisrequiredfor glypican-Smodulationofcellsurvival,胖ntsignaling,andgastrulation movements.J.Cell.Biol. (2003) 163, 625-635 非專利文獻 8;TraisterA,ShiWandFilmusJ.MammalianNotuminducesthe releaseofglypicansandotherGPI-anchoredproteinsfromthecellsurface. Biochem.J. (2008)410,503-511

【發(fā)明內(nèi)容】
本發(fā)明是鑒于上述情況而完成的，其目的在于提供確定GPC3祀向治療劑療法在接受 過該療法的患者中的有效性的方法、或確定是否繼續(xù)對該患者實施GPC3祀向治療劑療法 的方法。本發(fā)明的目的還在于，一并提供用于向已確定GPC3祀向治療劑療法有效的患者、 或已確定繼續(xù)實施GPC3祀向治療劑療法的患者進一步施予的GPC3祀向治療劑或制劑。 在如上所述的情況下，本申請的發(fā)明人進行了銳意研究，結(jié)果開發(fā)出了下述方法；對從 接受過GPC3祀向治療劑療法的患者分離的生物學(xué)試樣中的游離GPC3濃度進行監(jiān)測，當該 游離GPC3濃度為規(guī)定值時，或在接受過GPC3祀向治療劑療法后該游離GPC3濃度增大時， 確定該GPC3祀向治療劑療法是有效的，或者確定繼續(xù)實施該GPC3祀向治療劑療法的方 法。此外，還開發(fā)出了GPC3祀向治療劑或制劑，用于向已確定GPC3祀向治療劑療法有效 的患者、或已確定繼續(xù)實施GPC3祀向治療劑療法的患者進一步施予?；诂F(xiàn)有知識，也可 推測當GPC3祀向治療劑療法反倒有效時，血漿中檢測到的游離GPC3的濃度將隨著治療的 繼續(xù)而經(jīng)時性地減少。然而，令人驚異的是，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，從表現(xiàn)為穩(wěn)定（St油ledisease) (即，有對GPC3祀向治療劑療法作出反應(yīng)的可能性）的患者分離的血漿中的游離GPC3濃度 穩(wěn)定或有所增加，而非減少。 更具體而言，提供下述發(fā)明。 提供： 〔1)確定GPC3祀向治療劑療法對患者的癌癥的有效性、或確定是否繼續(xù)對患者實施GPC3祀向治療劑療法的方法，所述方法包括監(jiān)測從接受GPC3祀向治療劑療法之前的患者 和/或接受過GPC3祀向治療劑療法的患者分離的生物學(xué)試樣中的游離GPC3濃度，所述方 法中，該游離GPC3濃度為規(guī)定值時，確定為該GPC3祀向治療劑療法是有效的，或者確定為 繼續(xù)實施該GPC3祀向治療劑療法； 〔2)如〔1)所述的方法，其中，所述游離GPC3濃度是從患者分離的全血試樣、血漿試樣 或血清試樣中的濃度； 〔3)如〔2)所述的方法，其中，所述從患者分離的生物學(xué)試樣中的所述游離GPC3濃度是 血漿試樣或血清試樣中的濃度； 〔4)如〔1)~〔3)中任一項所述的方法，其中，所述游離GPC3的規(guī)定值為0.Ing/血~lOOng/mL的范圍； 〔引如〔1)~〔4)中任一項所述的方法，其中，所述游離GPC3濃度采用免疫學(xué)方法進行 測定； 〔6)如〔1)~巧）中任一項所述的方法，其中，所述游離GPC3濃度與在開始GPC3祀向 治療劑療法之前從該患者分離的生物學(xué)試樣中的游離GPC3濃度相比有所增大； 〔7)如〔1)~〔6)中任一項所述的方法，其中，所述患者是GPC3的組織免疫染色評分顯 示高度表達的患者； 〔8)如〔1)~〔7)中任一項所述的方法，其中，所述癌為肝癌； 〔9)如〔1)~〔8)中任一項所述的方法，其中，所述GPC3祀向治療劑W使癌患者的血中 谷值成為200yg/mlW上的方式被施予； 〔10)如〔1)~〔9)中任一項所述的方法，其中，所述GPC3祀向治療劑是包含抗GPC3抗 體作為有效成分的治療劑； 〔11)如〔10)所述的方法，其中，所述抗GPC3抗體是具有抗體依賴性細胞損傷（ADCC) 活性和/或補體依賴性細胞損傷（CDC)活性的抗體； 〔12)如〔10)或〔11)所述的方法，其中，所述抗GPC3抗體為抗GPC3嵌合抗體或人源 化抗GPC3抗體，所述抗GPC3嵌合抗體或人源化抗GPC3抗體包含下述（1)~（5)中的任一 方， (1)序列號4、序列號5、及序列號6各自表示的重鏈CDR1、重鏈CDR2及重鏈CDR3