本發(fā)明屬于醫(yī)藥分析
技術(shù)領(lǐng)域：
，特別涉及一種測定達巴萬星中3-二甲氨基丙胺的分析方法。
背景技術(shù)：
：達巴萬星(dalbavancin，結(jié)構(gòu)式如下)，也稱作道古霉素，它是一種新型半合成糖肽抗生素，為替考拉寧類似物a40926的衍生物。鹽酸達巴萬星是首個也是唯一一個獲批用于absssi治療的雙劑量方案的靜脈注射抗生素。達巴萬星作用機制與萬古霉素和替考拉寧相同，抑制g+菌細胞壁的生物合成，被廣泛用作治療皮膚和軟組織感染的藥物。達巴萬星是第二代、半合成脂糖肽，將一個親脂性側(cè)鏈加入到一種增強的糖肽主鏈，該藥在體外對多種革蘭氏陽性菌(包括mrsa和化膿性鏈球菌)及其他鏈球菌種細菌均表現(xiàn)出殺菌活性。達巴萬星具有獨特的藥動學性質(zhì)，可每周間隔用藥。目前，達巴萬星在治療導(dǎo)管相關(guān)的血源性感染以及皮膚和軟組織感染已取得了良好的效果，其具有優(yōu)良的體內(nèi)抗菌活性和安全性，是理想的第二代糖肽抗生素。達巴萬星合成過程中使用3-二甲氨基丙胺作為原料之一，從而在最終成品可能存在3-二甲氨基丙胺的殘留。3-二甲氨基丙胺(簡稱dmapa)，n,n-二甲基-1,3-丙二胺，英文名為n,n-dimethyl-1,3-propanediamine，cas登記號為109-55-7，分子式是c5h16n2，分子量為104.1928，無色液體，具有氨味。dmapa密度0.8100g/cm2，凝固點-70℃，沸點134℃，分子量102。dmapa化學性能活潑，能溶于水和有機溶劑，具有較強的揮發(fā)性、毒性、腐蝕性，對皮膚和眼睛有較強刺激性，同時含有伯胺基，有產(chǎn)生亞硝胺類或亞硝基化合物的潛在可能。因此，建立合適的達巴萬星中3-二甲氨基丙胺含量檢測方法對其進行嚴格控制就十分必要。中國專利《一種測定兩性表面活性劑中微量n，n-二甲基丙二胺的分析方法》(申請?zhí)?0111015766.1)公開了在測定兩性表面活性劑中微量n，n-二甲基丙二胺的分析方法：采用離子色譜法進行分析，色譜檢測條件如下：色譜柱：陽離子色譜柱；流動相：由體積百分含量為70-100％的無機酸或有機酸酸水溶液和體積百分含量為0-30％的有機溶劑組成，所述無機酸或有機酸水溶液的摩爾濃度為1-10mmol/l；檢測器：采用電導(dǎo)檢測器；流動相流速：0.5-1.5ml/min。有機溶劑為甲醇或乙腈。此專利所公開的離子色譜法，采用陽離子分離柱、電導(dǎo)檢測器分析兩性表面活性劑中3-二甲氨基丙胺的含量，方法討論3-二甲氨基丙胺標準溶液線性情況，沒有對3-二甲氨基丙胺在表面活性劑樣品中的線性和回收進行研究。采用陽離子分離柱和電導(dǎo)檢測器價格昂貴，操作要求高，使用維護成本高。采用液相色譜使用到大量的酸性溶劑和有機溶劑，檢測成本高且不夠環(huán)保。該專利采用酸性溶劑溶解樣品測定n，n-二甲基丙二胺，而鹽酸達巴萬星在酸性溶劑中溶解性差，該專利方法無法適用于鹽酸達巴萬星中的n，n-二甲基丙二胺的測定。本發(fā)明找到一種與其不同原理的氣相色譜法，操作簡單，通用性強，系統(tǒng)耐用性好，穩(wěn)定性良好，適合酸性化合物達巴萬星中3-二甲氨基丙胺含量檢測方法，檢測成本低，環(huán)保。文獻《烷基酰胺丙基甜菜堿中3-二甲氨基丙胺的測定》(夏雄燕等，廣東化，2013，40(19)152-153)公開了采用固相萃取柱預(yù)處理氣相色譜分析方法。這種方法對樣品前處理操作復(fù)雜，對操作人員要求高，通用性差，不同量添加回收率差異大。此外，此法對測定達巴萬星中的3-二甲氨基丙胺不適用，因為達巴萬星在所采乙醇-水溶劑體系中溶解性差，難以滿足測定要求，而且達巴萬星中結(jié)合的3-二甲氨基丙胺無法形成游離胺，不能有效萃取和汽化。因藥品對最終產(chǎn)物純度的高要求，3-二甲氨基丙胺的殘留含量很低，采用常規(guī)分析方法酸堿滴定法測定時，一般滴定法的靈敏度和準確度達不到要求。3-二甲氨基丙胺無紫外吸收波長，有報道采用熒光衍生化液相色譜，熒光檢測器進行檢測，但此法需對3-二甲氨基丙胺進行熒光衍生處理，操作復(fù)雜，前處理繁瑣。3-二甲氨基丙胺顯堿性，而達巴萬星顯較強的酸性，故不能采用常規(guī)的中性或酸性溶劑溶解后，直接進樣氣相色譜法測定。3-二甲氨基丙胺與達巴萬星結(jié)構(gòu)中眾多的酸性基團結(jié)合而不能游離汽化，即使采用三乙胺也無法置換游離。鹽酸達巴萬星及其達巴萬星游離堿在眾多溶劑中溶解性差，限制了溶劑的選擇。達巴萬星易溶于氫氧化鈉溶液，而氫氧化鈉溶液含有大量無機堿，不利于采用氣相色譜法溶液直接進樣測定。由于3-二甲氨基丙胺具有很強的極性，難于選擇合適的溶劑實現(xiàn)有效的液相提取。技術(shù)實現(xiàn)要素：本發(fā)明為了克服現(xiàn)有技術(shù)中達巴萬星溶解性差、達巴萬星中的3-二甲氨基丙胺無法有效游離汽化、不能有效液相提取等技術(shù)缺陷，提供一種簡單通用、檢測靈敏度高的檢測達巴萬星中的3-二甲氨基丙胺的方法。本發(fā)明所提及的達巴萬星，含達巴萬星游離堿及達巴萬星鹽酸鹽。本發(fā)明提供的檢測方法采用強堿溶液對酸性化合物達巴萬星進行溶解，并將結(jié)合成鹽的3-二甲氨基丙胺置換釋放成3-二甲氨基丙胺游離堿。利用強極性溶劑乙腈與堿溶液不互溶產(chǎn)生分層的現(xiàn)象，采用乙腈對達巴萬星強堿溶液中強極性的3-二甲氨基丙胺進行液-液提取，添加飽和的無機鹽增強乙腈的提取效果，采用通用性強的火焰離子化檢測器，采用直接進樣氣相色譜法取乙腈層(上層)進樣，從而避免強堿進入色譜系統(tǒng)損壞系統(tǒng)。具體的說，本發(fā)明通過下述技術(shù)方案得以解決：a、供試品溶液制備：精密稱取達巴萬星，按質(zhì)量體積比1：5～50加入濃度為0.5～5mol/l的強堿溶液；溶解后加入乙腈，乙腈與強堿溶液體積比為1：0.5～10；再加入無機鹽，無機鹽與強堿溶液的質(zhì)量體積比為1：0.5～10(g/ml)；振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為供試品溶液，備用；b、對照品溶液制備：精密稱取3-二甲氨基丙胺，加入濃度為0.5～5mol/l的強堿溶液，定量稀釋制成每1ml中分別含3-二甲氨基丙胺50μg、100μg、150μg的溶液；精密量取上述溶液，加與上述溶液體積比為1：0.5～10的乙腈，加上述溶液質(zhì)量體積比為1：0.5～10(g/ml)的無機鹽，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為對照品溶液(1)～(3)，備用；c、以氣相色譜法進行檢測，按標準曲線法以峰面積計算3-二甲氨基丙胺的含量。其中所述的強堿為氫氧化鈉和/或氫氧化鉀，優(yōu)選為氫氧化鈉。本發(fā)明選擇強堿溶液解決了在其他眾多溶劑中不溶的問題，保證達巴萬星的高溶解性，利于保證高的檢測靈敏度。強堿的堿性優(yōu)于三乙胺，能達到將3-二甲氨基丙胺形成游離堿，從而保證了3-二甲氨基丙胺在氣相色譜中能完全汽化。滿足回收率在80％～120％之間的要求，故能準確定量檢出達巴萬星中可能殘留的3-二甲氨基丙胺。為了保證樣品良好的溶解和3-二甲氨基丙胺良好的游離，強堿的濃度選擇為0.5～5mol/l，優(yōu)選為2～3mol/l。若強堿溶液濃度太低，3-二甲氨基丙胺不能完全游離，平均回收率低，不能準確定量檢出達巴萬星中可能殘留的3-二甲氨基丙胺。其中所述的步驟a中，達巴萬星與強堿溶液的質(zhì)量體積優(yōu)選為1：10。其中所述的步驟a與b中，乙腈與強堿溶液的體積比優(yōu)選為1:0.5～2，更優(yōu)選為1：1。本發(fā)明采用了強堿溶液-乙腈不互溶體系提取，形成水相有機相分層，解決了乙腈-水體系互溶的問題。本發(fā)明采用乙腈提取，解決了其他弱極性溶劑不能有效提取的問題。同時回避了強堿溶液含有大量無機堿及鹽，不利于直接進樣的問題。其中所述的無機鹽為氯化鈉、氯化鉀、無水硫酸鈉中的任一種或多種。優(yōu)選為氯化鈉。其中所述加入的無機鹽與強堿溶液的質(zhì)量體積比為1：2。其中所述加入的乙腈與無機鹽的順序為先加入乙腈或先加入無機鹽。本發(fā)明可以采用各種氣相色譜儀，比如型號為agilent7890b、色譜柱型號為agilentdb-624：可以是以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷為固定液的石英毛細管柱，該石英毛細管柱的柱長30m、內(nèi)徑0.32mm、液膜厚度1.8μm。供試品溶液和對照品溶液分別注入氣相色譜儀，該氣相色譜柱條件為：柱溫：程序升溫；進樣口溫度：230～270℃；火焰離子化檢測器溫度：280～320℃；載氣：氮氣；載氣流速：0.5～2ml/min；分流比：1:1～30:1，注入氣相色譜儀的直接進樣體積為1～3μl。作為優(yōu)選，氣相色譜柱條件為：柱溫：程序升溫方法是初始溫度60℃保持8分鐘，然后以每分鐘20℃的速率升溫至220℃，保持8分鐘；進樣口溫度：250℃；火焰離子化檢測器溫度：300℃；載氣：氮氣；載氣流速：1.5ml/min；分流比：5:1；直接進樣體積為2μl。在檢測時，取對照品溶液連續(xù)進樣5次，3-二甲氨基丙胺峰面積的相對標準偏差不得過2.0％，以取對照品溶液(1)～(3)的濃度-峰面積作圖，計算線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)不得低于0.995。分別精密量取供試品溶液和對照品溶液(1)～(3)注入氣相色譜儀，依次記錄色譜圖。按標準曲線法，以3-二甲氨基丙胺峰面積，計算供試品溶液中3-二甲氨基丙胺的含量。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明選擇直接進樣解決了頂空進樣儀器系統(tǒng)對3-二甲氨基丙胺的吸附殘留問題。達巴萬星中3-二甲氨基丙胺的測定方法，該方法需要方法學驗證，包括空白試驗、精密度試驗、檢出限與定量限、線性試驗和回收試驗，其中所述測定方法中驗證線性試驗，包括如下步驟：1)配制2.5mol/l的氫氧化鈉溶液，備用。2)精密稱取對照品3-二甲氨基丙胺100mg置于100ml容量瓶中，用步驟1)中所述氫氧化鈉溶液稀釋成1000μg/ml的溶液，混勻，備用。3)分別移取0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0ml于10ml量瓶中，用步驟1)中所述氫氧化鈉溶液稀釋定容，搖勻，分別精密量取1ml該溶液，置具塞試管中，加2.5mol/l的氫氧化鈉溶液1ml振搖使溶解，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液，備用。4)分別精密量取步驟3)中樣品各2μl進樣，記錄色譜圖。5)以濃度為x軸，峰面積為y軸，作線性回歸。其中所述測定方法中驗證回收試驗步驟如下：1)分別配制3-二甲氨基丙胺的濃度為80μg/ml、100μg/ml、120μg/ml的氫氧化鈉溶液；所述氫氧化鈉溶液濃度為2.5mol/l；所述3-二甲氨基丙胺的濃度為80μg/ml、100μg/ml、120μg/ml的氫氧化鈉溶液為對照品溶液；2)精密稱取0.1g達巴萬星于具塞試管中，用步驟1)中對照品溶液溶解后，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，量取上層清液2μl進樣，記錄色譜圖；3)另取未加入達巴萬星的對照品溶液，同法測定，記錄色譜圖，按標準曲線法計算回收率。本發(fā)明采用采用直接進樣法，操作簡單，對氣相相關(guān)設(shè)備要求低，規(guī)避了頂空進樣方式原料藥和溶劑消耗量大的缺點，也沒有出現(xiàn)直接進樣帶來的出峰復(fù)雜和損壞柱子的缺陷。本發(fā)明所采用的常規(guī)的毛細管色譜柱和氫火焰氣相色譜法，簡單通用；本發(fā)明提供的測定方法檢測靈敏度高，最低檢出濃度達5.67μg/ml甚至更低濃度；本發(fā)明提供的測定方法具有高回收率，回收率達84.24％。本發(fā)明成功的提供了3-二甲氨基丙胺的檢測方法，從而有助于提高達巴萬星的質(zhì)量及用藥安全。本發(fā)明所提供的方法可用于酸性化合物中堿性溶劑的檢測，如醋酸鹽化合物、鹽酸鹽化合物以及其他各種酸性化合物中的三乙胺、二乙胺、哌嗪、吡啶或其他堿性溶劑。附圖說明圖1為實施例1中3-二甲氨基丙胺對照品溶液色譜圖。圖2為實施例1中達巴萬星樣品檢測色譜圖。圖3為實施例1中空白溶液色譜圖。圖4為實施例1中3-二甲氨基丙胺檢測限色譜圖。圖5為實施例1中3-二甲氨基丙胺定量限色譜圖。圖6為實施例1中3-二甲氨基丙胺的線性關(guān)系圖。具體實施方式1、儀器：分析天平，型號：mettlertoledoabs135-s；氣相色譜儀型號為agilent7890b、色譜柱型號為agilentdb-624：以6％氰丙基苯基-94％二甲基聚硅氧烷為固定液的石英毛細管柱，該石英毛細管柱的柱長30m、內(nèi)徑0.32mm、液膜厚度1.8μm。2、試劑：3-二甲氨基丙胺(試劑純)，氫氧化鈉(分析純)，乙腈(色譜純)。3、樣品：達巴萬星，批號：20161201、20161202、20161203。下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進一步闡述，但這些實施例不對本發(fā)明構(gòu)成任何限制。實施例1色譜條件：柱溫：程序升溫：初始溫度60℃保持8分鐘，然后以每分鐘20℃的速率升溫至220℃，保持8分鐘。進樣口溫度：250℃；火焰離子化檢測器溫度：300℃；載氣：氮氣；載氣流速：1.5ml/min；分流比：5:1。1、檢測a、供試品溶液制備：配制2.5mol/l的氫氧化鈉溶液，備用；取達巴萬星約0.1g，精密稱定，置具塞試管中，加配制好的氫氧化鈉溶液1ml，振搖使溶解，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為供試品溶液，備用；b、對照品溶液制備：精密稱取3-二甲氨基丙胺100mg，置100ml量瓶中，加配制好的氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中分別含1000μg的溶液，再用配制好的氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中分別含50μg、100μg、150μg的溶液，精密量取1ml，置具塞試管中，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為對照品溶液(1)～(3)，備用；c、檢測方法：參照中國藥典2015年版通則0521測定，采用直接進樣氣相色譜儀法，取對照品溶液連續(xù)進樣5次，3-二甲氨基丙胺峰面積的相對標準偏差不得過2.0％，以取對照品溶液(1)～(3)的濃度-峰面積作圖，計算線性回歸方程，相關(guān)系數(shù)不得低于0.995。分別精密量取供試品溶液和對照品溶液(1)～(3)各2μl，注入氣相色譜儀，依次記錄色譜圖，3-二甲氨基丙胺對照品溶液色譜圖如圖1所示，達巴萬星樣品0161201批檢測色譜圖如圖2所示。按標準曲線法，以3-二甲氨基丙胺峰面積，計算供試品溶液中3-二甲氨基丙胺的含量。2、計算公式：線性回歸方程y＝ax+b3-二甲氨基丙胺殘留量(％)＝(yi-b)/a×v/w×100％；其中x：3-二甲氨基丙胺對照品溶液濃度(mg/ml)；y：3-二甲氨基丙胺對照品溶液的主峰面積；a：線性回歸方程斜率；b：線性回歸方程截距；yi：供試品溶液中3-二甲氨基丙胺的峰面積；w：供試品溶液配制時樣品的取樣量(mg)；v：供試品溶液配制體積(ml)；3、測定結(jié)果按照上述測定方法對三批達巴萬星供試品進行檢測，結(jié)果未檢出，見表1。表1：批號3-二甲氨基丙胺含量(％)20161201未檢出20161202未檢出20161203未檢出3、方法學驗證3.1空白試驗精密量取上述配制好的氫氧化鈉溶液1ml，置具塞試管中，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為空白溶液，空白溶液對殘留3-二甲氨基丙胺測定無干擾?？瞻兹芤荷V圖如圖3所示。3.2精密度試驗(1)重復(fù)性精密稱取3-二甲氨基丙胺適量，加上述配制好的氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中100μg的溶液，精密量取1ml該溶液，置具塞試管中，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液。按上述色譜條件試驗測定，連續(xù)進樣6針測定，結(jié)果6針rsd為1.30％，重復(fù)性良好。3-二甲氨基丙胺重復(fù)性試驗結(jié)果見表2。表2：編號1#2#3#4#5#6#平均值rsd峰面積325.94320.95324.56334.83324.33325.54326.031.30(2)重現(xiàn)性精密稱取3-二甲氨基丙胺適量，加上述配制好的氫氧化鈉溶液定量稀釋制成每1ml中約含100μg的溶液，精密量取6份1ml該溶液，置具塞試管中，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液。按上述色譜條件試驗測定，結(jié)果6份rsd為2.80％，重現(xiàn)性良好。3-二甲氨基丙胺重現(xiàn)性試驗結(jié)果見表3。表3：編號1#2#3#4#5#6#平均值rsd峰面積300.56309.98316.08313.56305.59328.22312.332.803.3檢出限與定量限方法：精密稱取3-二甲氨基丙胺100mg，用上述配制好的氫氧化鈉溶液為溶劑，稀釋成7個不同濃度的溶液，見表4。按上述色譜條件試驗，精密量取各濃度下該溶液1ml，置具塞試管中，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液。精密量取各待測溶液溶液2μl，分別注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。表4：編號濃度(μg/ml)1#226.82#170.13#113.44#56.705#28.356#11.347#6.8048#5.670實驗結(jié)果：通過逐級降低濃度法測定，按照s/n＝3計算，測得3-二甲氨基丙胺的檢出限為5.67μg/ml相當樣品中0.0057％的量；檢測限色譜圖如圖4所示。通過逐級降低濃度法測定，按照s/n＝10計算，測得3-二甲氨基丙胺的定量限為6.80μg/ml相當樣品中0.0068％的量；定量限色譜圖如圖5所示。3.4線性試驗精密稱取3-二甲氨基丙胺100mg，置100ml量瓶中，用配制好的氫氧化鈉溶液稀釋制成1000μg/ml的溶液，備用。分別移取0.1、0.25、0.5、1.0、1.5、2.0ml于10ml量瓶中，用配制好的氫氧化鈉溶液稀釋定容，搖勻。分別精密量取1ml該溶液，置具塞試管中，加配制好的氫氧化鈉溶液1ml振搖使溶解，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液。見表5。分別量取2μl進樣，記錄色譜圖。表5：編號溶液濃度(μg/ml)峰面積1#11.3410.202#28.3550.113#56.70119.614#113.4291.305#170.1457.846#226.8670.34結(jié)果：以濃度為x軸，峰面積為y軸，作線性回歸。線性方程為y＝3.0399x-40.8172，相關(guān)系數(shù)r＝0.9979，3-二甲氨基丙胺在11.34～226.8μg/ml濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。線性關(guān)系曲線圖如圖6所示。3.5回收試驗取3-二甲氨基丙胺的濃度為100μg/ml的氫氧化鈉溶液以及其響應(yīng)80％和120％濃度溶液為對照品溶液。精密量取對照品溶液1ml，并加入0.1g樣品，振搖溶解后，加乙腈1ml，加氯化鈉0.5g，振搖充分混合，靜置分層，吸取上層清液，作為待測溶液，量取2μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。另取未加入樣品的對照品溶液，同法測定，按標準曲線法計算回收率。結(jié)果試驗平均回收率為84.24％，rsd為2.10％(n＝9)，回收率在80％～120％之間，rsd小于10％，方法回收率良好。見表6。表6：3-二甲氨基丙胺回收率：實施例2供試品、對照品溶液參照實施例1制備。其區(qū)別為本實施例的氫氧化鈉溶液濃度為2.0mol/l；乙腈為2ml；無機鹽為氯化鉀，加入量為2g。色譜條件：柱溫：程序升溫：初始溫度60℃保持8分鐘，然后以每分鐘20℃的速率升溫至220℃，保持8分鐘。進樣口溫度：230℃；火焰離子化檢測器溫度：280℃；載氣：氮氣；載氣流速：1.0ml/min；分流比：1:1；進樣體積為1μl。按照上述條件，檢測三批供試品溶液，其色譜圖中未檢測出3-二甲氨基丙胺峰，經(jīng)計算，達巴萬星中3-二甲氨基丙胺的殘留量為0％。實施例3供試品、對照品溶液參照實施例1制備。其區(qū)別為本實施例的氫氧化鈉溶液10ml，濃度為3.0mol/l；乙腈為1ml；無機鹽為無水硫酸鈉，加入量為1g。色譜條件：柱溫：程序升溫：初始溫度60℃保持8分鐘，然后以每分鐘20℃的速率升溫至220℃，保持8分鐘。進樣口溫度：270℃；火焰離子化檢測器溫度：320℃；載氣：氮氣；載氣流速：2.0ml/min；分流比：10:1；進樣體積為3μl。按照上述條件，檢測三批供試品溶液，其色譜圖中未檢測出3-二甲氨基丙胺峰，經(jīng)計算，達巴萬星中3-二甲氨基丙胺的殘留量為0％。實施例4色譜條件與實施例1相同。采用二甲基亞砜作溶劑直接進樣氣相色譜法測定3-二甲氨基丙胺回收率試驗：取3-二甲氨基丙胺的濃度為100μg/ml的二甲基亞砜溶液以及其響應(yīng)80％和120％濃度溶液為對照品溶液。精密稱取已知3-二甲氨基丙胺殘留量的達巴萬星0.5g于5ml量瓶中，用3-二甲氨基丙胺對照品溶液溶解并稀釋至刻度，搖勻，量取2μl注入氣相色譜儀，記錄色譜圖。另取未加入樣品的對照品溶液，同法測定，按標準曲線法計算回收率。結(jié)果試驗平均回收率為0％，rsd為0％(n＝9)，結(jié)果表明此法3-二甲氨基丙胺與達巴萬星成鹽無法有效游離并汽化，不能有效測定。見表7。表7：采用二甲基亞砜作溶劑直接進樣氣相色譜法測定3-二甲氨基丙胺回收率試驗：當前第1頁12