本發(fā)明涉及分析檢測技術領域，特別是涉及一種基于毛細管電泳的檢測裝置及方法。

背景技術：

納米金是一種具有極高消光系數(shù)的納米材料，粒徑為13nm的納米金其消光系數(shù)高達10⁸mol/(l·cm)，具有相當高的靈敏度。由于納米金表面呈負電性，所以加入表面呈正電性的待測物后，納米金顆粒會由分散狀態(tài)轉為聚集狀態(tài)，此時納米金顆粒間的等離子體耦合發(fā)生改變，吸收峰發(fā)生紅移，宏觀呈現(xiàn)出可視化的顏色變化，即從酒紅色變?yōu)樽霞t色，再變?yōu)榛宜{色，其顏色變化程度與待測物濃度呈線性相關。

基于此建立的檢測方法可應用于多類物質的定量定性檢測，包括小分子、重金屬離子、蛋白質、核酸等。然而，當待測物為具有結構相似性的混合物時，其對待測物的檢測存在易受干擾、選擇性差的缺陷。毛細管電泳是基于待測物淌度差異的一種高效分離技術，其與基于納米金顆粒的檢測相結合，形成了一種新型檢測方法—毛細管電泳鞘流檢測法。

毛細管電泳鞘流檢測裝置一般如圖1所示，包括：分離緩沖液瓶1、分離毛細管2、電源3、三通閥4、納米金輸入管5、納米金溶液瓶6、反應毛細管9、壓力泵7及檢測器8，其中，電源3的正極浸于分離緩沖液瓶1中盛裝的分離緩沖液中，負極固定于分離毛細管2中；分離毛細管2一端浸入分離緩沖液中，另一端貫穿三通閥4的第一端41和第二端42，插入反應毛細管9內(nèi)；反應毛細管9一端與三通閥4的第二端42相連，另一端與檢測器8連接；納米金輸入管5的一端浸入納米金溶液中，另一端插入三通閥4的第三端43；壓力泵7通過管道與納米金溶液瓶6連通。在檢測過程中，一般采用壓力進樣，待測物在電場作用下移動至反應毛細管9，壓力泵7對納米金溶液施加壓力，使納米金溶液進入納米金輸入管5，進而進入反應毛細管9，與待測物接觸，發(fā)生團聚，顏色發(fā)生變化，納米金顆粒間的等離子體耦合發(fā)生改變，吸收峰發(fā)生變化，由檢測器8捕捉并記錄，進而完成對待測物的定量定性檢測。

在采用上述毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測時，由于納米金表面呈負電性，在電場作用下會從負極向正極遷移，與分離緩沖液的遷移方向相反，會引起電泳過程中電流紊亂，甚至納米金顆粒會進入分離毛細管與待測物接觸發(fā)生團聚，導致分離毛細管阻塞，中斷電流，嚴重影響檢測的精確度。因此，采用上述毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測時穩(wěn)定性差、精確度低。

技術實現(xiàn)要素：

本發(fā)明實施例提供了一種基于毛細管電泳的檢測裝置及方法，以提高檢測的精確度和穩(wěn)定性。具體技術方案如下：

第一方面，本發(fā)明實施例提供了一種基于毛細管電泳的檢測裝置，包括：分離緩沖液瓶、分離毛細管、電源、三通閥、納米金輸入管、納米金溶液瓶、反應毛細管、第一壓力泵及檢測器，其特征在于，所述檢測裝置還包括：安全緩沖液瓶、安全緩沖液輸入管、四通閥、安全毛細管及第二壓力泵，其中，

所述安全緩沖液輸入管的第一端浸入所述安全緩沖液瓶盛裝的安全緩沖液中，所述安全緩沖液輸入管的第二端插入所述四通閥的第一端；所述第二壓力泵通過管道與所述安全緩沖液瓶連通；

所述電源的正極浸入所述分離緩沖液瓶盛裝的分離緩沖液中，負極插入所述四通閥的第二端；

所述安全毛細管的第一端插入所述四通閥的第三端，所述安全毛細管貫穿所述三通閥位于直線上的第一端及第二端，所述安全毛細管的第二端插入所述反應毛細管的第一端；

所述反應毛細管的第一端與所述三通閥的第二端連通，所述反應毛細管的第二端與所述檢測器相連；

所述分離毛細管的第一端浸入所述分離緩沖液中，所述分離毛細管的第二端通過所述四通閥的第四端，從所述安全毛細管的第一端插入所述安全毛細管，且所述分離毛細管的第二端不超出所述安全毛細管的第二端；

所述納米金輸入管的一端浸入所述納米金溶液瓶盛裝的納米金溶液中，另一端插入所述三通閥的第三端；所述第一壓力泵通過管道與所述納米金溶液瓶連通。

可選的，所述檢測器包括：紫外-可見檢測器、化學發(fā)光檢測器、熒光檢測器中的一種或幾種。

第二方面，本發(fā)明實施例還提供了一種基于毛細管電泳的檢測方法，所述方法包括：

將所述分離毛細管的第一端從所述分離緩沖液瓶中取出，將待測物從所述分離毛細管的第一端進入所述分離毛細管中，其中，所述待測物表面呈正電性；

將所述分離毛細管的第一端插入所述分離緩沖液瓶，并浸入所述分離緩沖液中；

開啟所述第二壓力泵，使所述安全緩沖液流動至所述安全毛細管的第二端；

開啟所述第一壓力泵，使所述納米金溶液流動至所述反應毛細管內(nèi)；

開啟所述電源，使所述待測物流動至所述反應毛細管內(nèi)，與所述納米金溶液接觸，產(chǎn)生檢測物；

所述檢測物流經(jīng)所述檢測器，所述檢測器對所述檢測物進行檢測并記錄檢測結果。

可選的，所述分離緩沖液包括：磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液中的一種或幾種，所述安全緩沖液的ph值為2-5。

可選的，所述待測物為聚酰胺-胺，代數(shù)為1-6，優(yōu)選為1、2及3。

可選的，所述分離緩沖液中添加聚氧化乙烯。

可選的，所述安全緩沖液包括：磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液、磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液中的一種或幾種，所述安全緩沖溶液的ph值為1-5。

可選的，所述納米金溶液的濃度為0.2-10nmol/l。

可選的，所述納米金溶液的溶劑為磷酸二氫鈉-檸檬酸溶液，所述納米金溶液的ph值為5-9，優(yōu)選為7。

可選的，所述安全緩沖液與所述納米金溶液的流速之比為0.1-8，所述安全緩沖液與所述納米金溶液的流速之和為5-50μl每分鐘。

本發(fā)明實施例提供的一種基于毛細管電泳的檢測裝置及方法，檢測裝置除包括：分離緩沖液瓶、分離毛細管、電源、三通閥、納米金輸入管、納米金溶液瓶、反應毛細管、第一壓力泵及檢測器以外，還包括：安全緩沖液瓶、安全緩沖液輸入管、四通閥、安全毛細管及第二壓力泵，安全緩沖液輸入管的第一端浸入安全緩沖液瓶盛裝的安全緩沖液中，安全緩沖液輸入管的第二端插入四通閥的第一端，安全毛細管的第一端插入四通閥的第三端，安全毛細管14貫穿三通閥位于直線上的第一端及第二端，安全毛細管的第二端插入反應毛細管的第一端，分離毛細管的第一端浸入分離緩沖液中，分離毛細管的第二端通過四通閥的第四端，從安全毛細管的第一端插入安全毛細管，且分離毛細管的第二端不超出安全毛細管的第二端。在檢測過程中，安全緩沖液在分離毛細管的第二端的出口處形成一充滿安全緩沖液的區(qū)域，阻止納米金溶液進入分離毛細管，納米金不會在反應毛細管內(nèi)與待測物接觸發(fā)生團聚，因此，大大提高了檢測的穩(wěn)定性及精確度。

附圖說明

為了更清楚地說明本發(fā)明實施例或現(xiàn)有技術中的技術方案，下面將對實施例或現(xiàn)有技術描述中所需要使用的附圖作簡單地介紹，顯而易見地，下面描述中的附圖僅僅是本發(fā)明的一些實施例，對于本領域普通技術人員來講，在不付出創(chuàng)造性勞動的前提下，還可以根據(jù)這些附圖獲得其他的附圖。

圖1為一種毛細管電泳鞘流檢測裝置的結構示意圖；

圖2為本發(fā)明實施例所提供的一種基于毛細管電泳的檢測裝置的結構示意圖；

圖3(a)為未加入pamamg1.0的納米金溶液的透射電子顯微鏡圖；

圖3(b)為加入pamamg1.0的納米金溶液的透射電子顯微鏡圖；

圖4(a)為未加入pamamg1.0的納米金溶液的紫外-可見吸收光譜圖；

圖4(b)為加入pamamg1.0的納米金溶液的紫外-可見吸收光譜圖；

圖5為一種紫外檢測裝置的結構示意圖；

圖6(a)采用圖5所示紫外檢測裝置對濃度為10mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖6(b)采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置對濃度為10mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖7采用圖1所示毛細管電泳鞘流檢測裝置對濃度為10mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖8(a)采用圖5所示紫外檢測裝置對濃度為1mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖8(b)采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置對濃度為1mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖9(a)采用圖5所示紫外檢測裝置對濃度為30mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖；

圖9(b)采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置對濃度為30mg/l的待測物進行檢測得到的強度-時間圖。

具體實施方式

下面將結合本發(fā)明實施例中的附圖，對本發(fā)明實施例中的技術方案進行清楚、完整地描述，顯然，所描述的實施例僅僅是本發(fā)明一部分實施例，而不是全部的實施例?；诒景l(fā)明中的實施例，本領域普通技術人員在沒有做出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其他實施例，都屬于本發(fā)明保護的范圍。

為了提高檢測的精確度和穩(wěn)定性，本發(fā)明實施例提供了一種基于毛細管電泳的檢測裝置及方法，可以對表面呈正電性的待測物進行定性定量檢測。下面首先對本發(fā)明實施例提供的一種基于毛細管電泳的檢測裝置進行介紹。

一種基于毛細管電泳的檢測裝置，如圖2所示(圖2中虛線框內(nèi)為四通閥13和三通閥04部分結構的放大圖)，可以包括：分離緩沖液瓶01、分離毛細管02、電源03、三通閥04、納米金輸入管05、納米金溶液瓶06、反應毛細管09、第一壓力泵07及檢測器08，該檢測裝置還可以包括：安全緩沖液瓶11、安全緩沖液輸入管12、四通閥13、安全毛細管14及第二壓力泵10，其中，

所述安全緩沖液輸入管的第一端121浸入所述安全緩沖液瓶11盛裝的安全緩沖液中，所述安全緩沖液輸入管的第二端122插入所述四通閥的第一端131；所述第二壓力泵10通過管道與所述安全緩沖液瓶11連通；

所述電源03的正極浸入所述分離緩沖液瓶01盛裝的分離緩沖液中，負極插入所述四通閥的第二端132；

所述安全毛細管的第一端141插入所述四通閥的第三端133，所述安全毛細管14貫穿所述三通閥04位于直線上的第一端041及第二端042，所述安全毛細管的第二端142插入所述反應毛細管的第一端091；

所述反應毛細管的第一端091與所述三通閥的第二端042連通，所述反應毛細管的第二端092與所述檢測器08相連；

所述分離毛細管的第一端021浸入所述分離緩沖液中，所述分離毛細管的第二端022通過所述四通閥的第四端134，從所述安全毛細管的第一端141插入所述安全毛細管14，且所述分離毛細管的第二端022不超出所述安全毛細管的第二端142；

所述納米金輸入管05的一端浸入所述納米金溶液瓶06盛裝的納米金溶液中，另一端插入所述三通閥的第三端043；所述第一壓力泵07通過管道與所述納米金溶液瓶06連通。

在上述檢測裝置中，分離緩沖液瓶01、納米金溶液瓶06及安全緩沖液瓶11均可以采用離心管、試管、燒瓶等常見的實驗容器，在此不做具體限定。上述分離毛細管02、安全毛細管14及反應毛細管09均可以采用可用于毛細管電泳的各種毛細管，在此不做具體限定，例如，可以采用石英毛細管等。

對于各毛細管及輸入管與對應的溶液瓶的固定方式而言，可以通過橡膠塞進行固定，具體來說，可以在橡膠塞上開設通孔，將各毛細管及輸入管插入通孔中，進而浸入對應緩沖液或納米金溶液中。

需要說明的是，由于安全緩沖液需要通過第二壓力泵10施加的壓力進入安全緩沖液輸入管12，納米金溶液需要通過第一壓力泵07施加的壓力進入納米金輸入管05，所以安全緩沖液瓶11及納米金溶液瓶06需要具有良好的氣密性，所以可以在安全緩沖液瓶11插入安全緩沖液輸入管12的位置進行密封，同樣的，在納米金溶液瓶06插入納米金輸入管05的位置也可以進行密封，具體密封方式可以采用本領域常見的密封方式，例如可以采用密封樹脂等方式進行密封，在此不做具體限定。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，上述檢測器08可以包括：紫外-可見檢測器、化學發(fā)光檢測器、熒光檢測器中的一種或幾種。具體采用何種檢測器，本領域技術人員可以根據(jù)待測物的化學性質及物理性質確定，在此不做具體限定。

基于上述檢測裝置實施例，本發(fā)明實施例還提供了一種基于毛細管電泳的檢測方法，下面首先對本發(fā)明實施例提供的一種基于毛細管電泳的檢測方法進行介紹。

一種基于毛細管電泳的檢測方法，所述方法包括以下步驟：

將所述分離毛細管的第一端從所述分離緩沖液瓶中取出，將待測物從所述分離毛細管的第一端進入所述分離毛細管中，其中，所述待測物表面呈正電性；

將所述分離毛細管的第一端插入所述分離緩沖液瓶，并浸入所述分離緩沖液中；

開啟所述第二壓力泵，使所述安全緩沖液流動至所述安全毛細管的第二端；

開啟所述第一壓力泵，使所述納米金溶液流動至所述反應毛細管內(nèi)；

開啟所述電源，使所述待測物流動至所述反應毛細管內(nèi)，與所述納米金溶液接觸，產(chǎn)生檢測物；

所述檢測物流經(jīng)所述檢測器，所述檢測器對所述檢測物進行檢測并記錄檢測結果。

在利用上述檢測裝置進行檢測時，首先可以將分離毛細管的第一端從分離緩沖液瓶中取出，將待測物從分離毛細管的第一端注入分離毛細管中?？梢岳斫獾氖?，待測物表面一般呈正電性，這樣與表面呈負電性的納米金顆粒接觸后，便可以使納米金顆粒發(fā)生團聚。

在一種實施方式中，可以采用壓力進樣的方式使待測物從分離毛細管的第一端進入分離毛細管中。具體來說，可以將分離毛細管的第一端相對于分離毛細管的第二端抬高20厘米，將待測物從分離毛細管的第一端加入分離毛細管，持續(xù)10秒左右，使待測物進入分離毛細管中?？梢岳斫獾氖?，待測物一般是溶解在溶劑中的，該溶劑可以為水等不影響納米金顆粒與待測物發(fā)生團聚的溶劑。

進樣完畢后，便可以將分離毛細管的第一端插入分離緩沖液瓶，并浸入分離緩沖液中，然后開啟第二壓力泵，安全緩沖液在壓力作用下進入安全緩沖液輸入管中，進而流入四通閥，進入安全毛細管中，在壓力作用下繼續(xù)流動至安全毛細管的第二端。

開啟第一壓力泵后，納米金溶液在壓力作用下會進入納米金溶液輸入管中，進而流入三通閥中，進入反應毛細管內(nèi)。當開啟電源后，待測物在電場作用下在分離毛細管中流動，在一定時間后流動至反應毛細管內(nèi)，與納米金溶液接觸，納米金顆粒發(fā)生團聚，即形成檢測物。

檢測物隨著安全緩沖液及分離緩沖液流動，經(jīng)過檢測器，檢測器對檢測物進行檢測并記錄檢測結果，進而完成對待測物的定性定量檢測。

可以理解的是，在實際檢測過程中，可以先用標準樣品進行檢測，記錄從開啟電源開始，到檢測物流動至檢測器的時間，然后再對實際樣品(實際樣品中含有待測物)進行檢測，同樣記錄從開啟電源開始，到檢測物流動至檢測器的時間，根據(jù)兩次檢測時間的對比，確定實際樣品中所存在的目標檢測物，即待測物。對于待測物的定量分析，可以根據(jù)不同檢測器采用相應計算處理得到。例如，如果檢測器為紫外-可見檢測器，那么便可以根據(jù)檢測器測得的強度-時間圖，采用線性擬合的方法確定強度-時間圖中峰的面積與待測物濃度的線性關系，進而確定待測物濃度。由于根據(jù)檢測器的檢測結果計算待測物濃度的方式為本領域常見方式，在此不做具體限定及說明。

可見，在檢測過程中，安全緩沖液可以在分離毛細管的第二端的出口處形成一充滿安全緩沖液的區(qū)域，阻止納米金溶液進入分離毛細管，納米金顆粒不會在反應毛細管內(nèi)與待測物接觸發(fā)生團聚，因此，大大提高了檢測的穩(wěn)定性及精確度。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，分離緩沖液可以包括：磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液中的一種或幾種，安全緩沖液的ph值可以為2-5。這樣，分離緩沖液不會影響納米金顆粒與待測物接觸后發(fā)生團聚。當然，分離緩沖液也可以采用不會影響納米金顆粒與待測物接觸后發(fā)生團聚，且不會與待測物發(fā)生化學反應的其他緩沖液，在此不做具體限定。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，上述檢測方法可以用來檢測聚酰胺-胺樹狀大分子(pamam)，優(yōu)選代數(shù)為1-6的整代的聚酰胺-胺樹狀大分子，更優(yōu)選代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，采用上述檢測方法來檢測代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子，其檢測精確度非常高，且檢測過程的穩(wěn)定性好。

對于檢測物為聚酰胺-胺樹狀大分子的情況而言，為了進一步提高檢測的精確度，可以在分離緩沖液中加入聚氧化乙烯(peo)，聚氧化乙烯可以抑制聚酰胺-胺樹狀大分子表面氨基與分離毛細管內(nèi)壁的吸附作用，提高毛細管電泳的分離效果，進而提高檢測的精確度。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，安全緩沖液可以包括：磷酸氫二鈉-檸檬酸緩沖液、鄰苯二甲酸-鹽酸緩沖液、乙酸-乙酸鈉緩沖液中的一種或幾種，安全緩沖溶液的ph值可以為1-5。這樣，安全緩沖液不會影響納米金顆粒與待測物接觸后發(fā)生團聚。當然，安全緩沖液也可以采用不會影響納米金顆粒與待測物接觸后發(fā)生團聚，且不會與待測物發(fā)生化學反應的其他緩沖液，在此不做具體限定。

在一種優(yōu)選實施方式中，安全緩沖液與分離緩沖液可以使用溶質成分相同的緩沖液，例如，分離緩沖液采用ph值為2-5的磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液，那么安全緩沖液便可以采用ph值為1-5的磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液，這樣可以避免二者在反應毛細管中接觸時發(fā)生反應而影響檢測精確度。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，納米金溶液的濃度可以為0.2-10nmol/l。發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，納米金溶液的濃度為0.2-10nmol/l時，納米金顆粒與待測物接觸后的團聚效果更好，進而，檢測的精確度和穩(wěn)定性也更高。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，納米金溶液的溶劑可以為磷酸二氫鈉-檸檬酸溶液，納米金溶液的ph值可以為5-9，在實際檢測過程中，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)，納米金溶液的ph值為7時，納米金顆粒與待測物接觸后的團聚效果更佳。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，安全緩沖液與納米金溶液的流速之比為0.1-8，安全緩沖液與納米金溶液的流速之和為5-50μl每分鐘?？梢岳斫獾氖牵踩彌_液的流速和納米金溶液的流速可以分別通過第二壓力泵及第一壓力泵控制，壓力泵的壓力加大，則流速提高，壓力泵的壓力減小，則流速降低。當安全緩沖液與納米金溶液的流速之比為0.1-8，安全緩沖液與納米金溶液的流速之和為5-50μl每分鐘時，納米金溶液中的納米金顆?？梢猿浞峙c待測物接觸，并發(fā)生團聚，檢測精度高，安全緩沖液也可以穩(wěn)定地在分離毛細管的第二端的出口處形成一充滿安全緩沖液的區(qū)域，阻止納米金溶液進入分離毛細管，使檢測穩(wěn)定性更高。

在本發(fā)明實施例的一種實施方式中，納米金溶膠可以通過檸檬酸鈉-氯金酸還原法制得，具體如下：

將50ml質量百分數(shù)為0.01％的氯金酸在磁力攪拌下加熱至沸騰，快速加入1ml質量百分數(shù)為1％檸檬酸鈉，溶液顏色逐漸由淺黃色變?yōu)榛宜{色，最后至酒紅色，繼續(xù)加熱3-5分鐘后，停止加熱，繼續(xù)攪拌至溶液冷卻至室溫，得到為澄清透亮的酒紅色溶液，即納米金溶膠，將其于4℃保存在冰箱中即可。

除上述制備方式外，也可以采用其他制備納米金溶膠的方式制備納米金溶膠，在此不做具體限定。當然，也可以采用市售的納米金溶膠，例如，可以為北京百靈威公司的球形金納米顆粒(粒徑為10-30nm)、上海邁瑞爾公司的金納米粒子(粒徑為10-30nm)、上海阿拉丁公司的金納米粒子(粒徑為10-30nm)等。

需要說明的是，在進行檢測時，可以將上述納米金溶膠取出，對其進行離心處理，然后取出上層清液，分散至ph值為5-9的磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中，形成納米金溶液，放置于納米金溶液瓶中，以供檢測時使用。

下面以代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子作為檢測物為例，對本發(fā)明實施例所提供的檢測方法進行說明。

首先，對代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子的可檢測性進行說明，如圖3所示的透射電子顯微鏡圖，可以看出，如圖3(a)所示，未加入pamamg1.0(代數(shù)為1的聚酰胺-胺樹狀大分子)的納米金溶液中的納米金顆粒呈球形，分散性良好，納米金顆粒的平均粒徑約為20nm。如圖3(b)所示，加入pamamg1.0后，納米金顆粒聚集成簇。由此可知，聚酰胺-胺樹狀大分子可以使納米金顆粒發(fā)生團聚，因此可以采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置及檢測方法進行檢測。

如圖4所示，對加入pamamg1.0前后的納米金溶液分別進行紫外-可見吸收光譜測試，可以看出，如圖4(a)所示，分散態(tài)納米金顆粒的最大吸收波長為520nm，加入pamamg1.0后，如圖4(b)所示，波長為520nm處的吸光度下降，且最大吸收波長紅移至675nm。由此可知，聚酰胺-胺樹狀大分子對納米金顆粒的團聚作用，隨著pamamg1.0的加入，納米金溶液的顏色由澄清透亮的酒紅色逐漸變?yōu)樽霞t色，然后變?yōu)榛宜{色，此過程肉眼可見。因此，在檢測過程中可以采用紫外-可見檢測器記錄檢測結果。

在檢測過程中，由于毛細管外一般具有聚酰胺涂層，為了保證分離毛細管外的保護層不會因浸泡在安全毛細管中而脫落對檢測造成不良影響，可以通過灼燒的方式去除聚酰胺涂層。為了方便毛細管的連接，可以將分離毛細管插入安全毛細管中的部分由氫氟酸進行腐蝕，使其外徑變小，利于將分離毛細管插入安全毛細管中。

采用如圖2所示的檢測裝置對代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測，其中，分離毛細管內(nèi)徑75μm，長度為60cm，分離毛細管的第二端距離安全毛細管的第二端5mm。安全毛細管內(nèi)徑320μm，長度為12cm，安全毛細管的第二端插入反應毛細管中，距離反應毛細管的第二端1cm。反應毛細管內(nèi)徑530μm，長度為15cm。

分離緩沖液為：離子強度為25mm、ph值為3的磷酸二氫鈉-磷酸緩沖液，其中加入質量百分數(shù)為0.2％的聚氧化乙烯。安全緩沖液同樣為離子強度為25mm、ph值為3的磷酸二氫鈉-磷酸緩沖液。第二壓力泵的壓力3.5kpa，安全緩沖液輸入管的內(nèi)徑100μm，長度為30cm。

納米金溶液為：將上述檸檬酸鈉-氯金酸還原法制得納米金溶膠進行離心濃縮處理，取出全部上層清液，分散至ph值為7、離子強度為10mm的磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中。第一壓力泵的壓力3.0kpa，納米金溶液輸入管的內(nèi)徑200μm，長度為30cm。電源提供的分離電壓為20kv。檢測器為紫外-可見檢測器。

為了說明采用本發(fā)明實施例提供的檢測裝置進行檢測的效果，采用如圖1及圖5所示的現(xiàn)有檢測裝置進行對比實驗。其中，圖5所示檢測裝置為紫外檢測裝置，兩個分離緩沖液瓶001之間通過分離毛細管002相連，電源003的正極和負極分別插入兩個分離緩沖液瓶001盛裝的分離緩沖液中，將分離毛細管002的檢測窗口固定于紫外檢測器004上。當待測物在電場作用下由正極移動至負極過程中，流經(jīng)紫外檢測器004，紫外檢測器004可對待測物的紫外吸收強度進行記錄，完成檢測。

采用紫外檢測裝置進行檢測的條件為：分離毛細管內(nèi)徑75μm，長度為60cm，分離緩沖液為：離子強度為25mm、ph值為3的磷酸二氫鈉-磷酸緩沖液，其中加入質量百分數(shù)為0.2％的聚氧化乙烯，電源提供的分離電壓為20kv，紫外檢測器的檢測波長為214nm。

采用如圖1所示的毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測的條件為：分離毛細管內(nèi)徑75μm，長度為60cm，分離毛細管的第二端距離反應毛細管上的檢測窗口1cm。反應毛細管內(nèi)徑530μm，長度為15cm。分離緩沖液為：離子強度為25mm、ph值為3的磷酸二氫鈉-磷酸緩沖液，其中加入質量百分數(shù)為0.2％的聚氧化乙烯。納米金溶液為：將上述檸檬酸鈉-氯金酸還原法制得納米金溶膠進行離心濃縮處理，取出全部上層清液，分散至ph值為7、離子強度為10mm的磷酸二氫鈉-檸檬酸緩沖液中。第一壓力泵的壓力3.0kpa，納米金溶液輸入管的內(nèi)徑200μm，長度為30cm。電源提供的分離電壓為20kv。檢測器為紫外-可見檢測器。

采用上述三種裝置在上述條件下，分別對待測物濃度為1mg/l、10mg/l及30mg/l，代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測。

待測物濃度為10mg/l時的檢測結果圖6所示，從圖6(a)中可以看出，采用紫外檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中不存在吸收峰，無法檢測出待測物。從圖6(b)中可以看出，采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中存在三個吸收峰，圖6(b)中的峰1、峰2及峰3分別為代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子對應的峰。從圖7中可以看出，采用毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中電流出現(xiàn)多次斷流，無法得到檢測結果。

待測物濃度為1mg/l時的檢測結果圖8所示，從圖8(a)中可以看出，采用紫外檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中不存在吸收峰，無法檢測出待測物。從圖8(b)中可以看出，采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中存在三個吸收峰，圖8(b)中的峰1、峰2及峰3分別為代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子對應的峰。采用毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測得到的檢測結果與圖7類似，在此不做贅述。

待測物濃度為30mg/l時的檢測結果圖9所示，從圖9(a)中可以看出，采用紫外檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中存在三個吸收峰，圖9(a)中的峰1、峰2及峰3分別為代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子對應的峰，但是峰并不明顯。從圖9(b)中可以看出，采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置進行檢測得到的檢測結果中存在三個吸收峰，圖9(b)中的峰1、峰2及峰3分別為代數(shù)為1、2及3的聚酰胺-胺樹狀大分子對應的峰。采用毛細管電泳鞘流檢測裝置進行檢測得到的檢測結果與圖7類似，在此不做贅述。

綜上可見，采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置對聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測與采用紫外檢測裝置對聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測，檢出限分別為1mg/l和30mg/l。采用本發(fā)明實施例所提供的檢測裝置對聚酰胺-胺樹狀大分子的檢測相較于采用紫外檢測裝置對聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測的靈敏度提高了1個數(shù)量級。與采用毛細管電泳鞘流檢測裝置對聚酰胺-胺樹狀大分子進行檢測相比，檢測穩(wěn)定性高，精確度也大大提高。

需要說明的是，在本文中，諸如第一和第二等之類的關系術語僅僅用來將一個實體或者操作與另一個實體或操作區(qū)分開來，而不一定要求或者暗示這些實體或操作之間存在任何這種實際的關系或者順序。而且，術語“包括”、“包含”或者其任何其他變體意在涵蓋非排他性的包含，從而使得包括一系列要素的過程、方法、物品或者設備不僅包括那些要素，而且還包括沒有明確列出的其他要素，或者是還包括為這種過程、方法、物品或者設備所固有的要素。在沒有更多限制的情況下，由語句“包括一個……”限定的要素，并不排除在包括所述要素的過程、方法、物品或者設備中還存在另外的相同要素。

以上所述僅為本發(fā)明的較佳實施例而已，并非用于限定本發(fā)明的保護范圍。凡在本發(fā)明的精神和原則之內(nèi)所作的任何修改、等同替換、改進等，均包含在本發(fā)明的保護范圍內(nèi)。