本發(fā)明涉及一種卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法，屬于煙草檢驗(yàn)
技術(shù)領(lǐng)域：
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背景技術(shù)：
：甲醛是一種原生質(zhì)毒素，進(jìn)入人體后可使蛋白質(zhì)凝固，破壞細(xì)胞蛋白質(zhì)，損害肝臟腎臟。在我國有毒化學(xué)品優(yōu)先控制名單上高居第二位。甲醛已被國家癌癥研究機(jī)構(gòu)確定為致癌物質(zhì)，10g即可引起死亡，是煙草添加劑禁用物質(zhì)，是世界衛(wèi)生組織(WHO)提出的卷煙主流煙氣中重點(diǎn)關(guān)注的有害成分之一。乙醛又名醋醛，為無色易流動(dòng)液體，有刺激性氣味，具有一定毒性，也是世界衛(wèi)生組織提出的卷煙主流煙氣中重點(diǎn)關(guān)注的有害成分之一。授權(quán)公告號為CN104076108B的中國發(fā)明專利公開了一種電子煙煙氣中低分子醛酮的測定方法，對電子煙煙氣中的低分子醛酮進(jìn)行測定。卷煙濾嘴爆珠是在煙用濾棒中添加的一種帶有香味的且當(dāng)受到一定外來作用力時(shí)能夠釋放香味的圓形囊狀物。卷煙濾嘴爆珠作為一種新型卷煙濾嘴增香技術(shù)，目前在全球被廣泛使用。但是，如何測定卷煙濾嘴爆珠(包括壁材和芯材)中甲醛和乙醛殘留量，目前未見相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道。因此，開發(fā)一種卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的測定方法迫在眉睫。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明的目的在于提供一種卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案是：一種卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法，包括以下步驟：1)將陶瓷均質(zhì)子和卷煙濾嘴爆珠置于乙腈中進(jìn)行渦旋震蕩使爆珠破碎，然后進(jìn)行衍生化處理，過濾，得待測液；2)采用高效液相色譜對待測液進(jìn)行測定。步驟1)中每0.2g的卷煙濾嘴爆珠對應(yīng)10～12mL乙腈。優(yōu)選的，每0.2g的卷煙濾嘴爆珠對應(yīng)10mL乙腈。將陶瓷均質(zhì)子和卷煙濾嘴爆珠置于乙腈中進(jìn)行渦旋震蕩使爆珠破碎進(jìn)而對爆珠中的甲醛和乙醛進(jìn)行萃取。采用乙腈作為卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的提取劑，不容易提取基質(zhì)中的染料色素和蠟質(zhì)、脂肪等非極性物質(zhì)；采用惰性陶瓷均質(zhì)子渦旋震蕩對爆珠進(jìn)行破壁，有效地避免了爆珠樣品在外力擠壓破碎時(shí)的成分損失以及外界環(huán)境的污染，同時(shí)也能夠提高萃取效率。步驟1)中渦旋震蕩為脈沖形式渦旋振蕩。步驟1)中渦旋震蕩的時(shí)間為8～15min。所述渦旋震蕩時(shí)間優(yōu)選10min。步驟1)中衍生化處理所用衍生化試劑為2,4-二硝基苯肼衍生化試劑。萃取液通過2,4-二硝基苯肼衍生化試劑后形成甲醛-2,4-二硝基苯腙和乙醛-2,4-二硝基苯腙。步驟1)中衍生化處理的具體步驟為：移取1.0mL萃取液上清液于10mL容量瓶中，加入4mL衍生化試劑后用乙腈定容，搖勻后室溫放置30min進(jìn)行衍生化。所述2,4-二硝基苯肼衍生化試劑的配制方法為：向0.01g凈化后的2,4-二硝基苯肼中加入5mL磷酸，用乙腈定容至100mL，即得。所述2,4-二硝基苯肼的凈化方法為：向11.8～12.2g2,4-二硝基苯肼中加入180～250mL乙腈，120～150℃加熱溶解并回流2～3h，后靜置過夜，過濾、洗滌、干燥即得。所述過濾為采用有機(jī)相濾膜過濾。所述有機(jī)相濾膜的孔徑優(yōu)選0.22μm或0.45μm。步驟2)中高效液相色譜測定的條件為：色譜柱：C18色譜柱；流速：1.2mL/min；進(jìn)樣量：10μL；檢測波長：365nm；柱溫：30℃。步驟2)中高效液相色譜測定的流動(dòng)相為：流動(dòng)相A為乙腈、流動(dòng)相B為水；流動(dòng)相梯度洗脫程序?yàn)椋撼跏糀為60％，B為40％；8minA為60％，B為40％；9minA為90％，B為10％；14minA為90％，B為10％；15minA為60％，B為40％；20minA為60％，B為40％。本發(fā)明的有益效果是：(1)本發(fā)明首次建立了卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法；(2)本發(fā)明首次采用惰性陶瓷均質(zhì)渦旋方式使卷煙濾嘴爆珠破壁，同時(shí)提取卷煙濾嘴爆珠壁材和芯材中游離的甲醛和乙醛，該方法避免了爆珠樣品在外力擠壓破碎時(shí)的成分損失以及外界環(huán)境的污染；(3)本發(fā)明的樣品前處理過程簡單、快速，大大節(jié)省了分析時(shí)間，便于批量樣品分析；(4)本發(fā)明分析方法靈敏度和準(zhǔn)確性高，重復(fù)性好，適合于卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的殘留量檢測。附圖說明圖1為實(shí)施例1中卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法的流程圖；圖2為實(shí)施例1中卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的萃取示意圖；圖3為實(shí)施例1中標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜圖；圖4為實(shí)施例1中的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，其中a為實(shí)施例1中甲醛的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，b為實(shí)施例1中乙醛的標(biāo)準(zhǔn)工作曲線；圖5為卷煙濾嘴爆珠樣品的色譜圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖對本發(fā)明的實(shí)施方式作進(jìn)一步說明。實(shí)施例1本實(shí)施例的卷煙濾嘴爆珠中甲醛和乙醛的高效液相色譜測定方法，如圖1所示，包括以下步驟：1)2,4-二硝基苯肼衍生化試劑的配制2,4-二硝基苯肼的凈化：稱取12g2,4-二硝基苯肼于250mL圓底燒瓶中，加入200mL乙腈，在130℃加熱溶解并回流2h，后轉(zhuǎn)移至燒杯中密封靜置過夜，所得結(jié)晶進(jìn)行抽濾洗滌后放在真空干燥箱里進(jìn)行干燥，最后密封在棕色瓶中保存?zhèn)溆谩?,4-二硝基苯肼衍生化試劑的配制：稱取0.01g凈化后的2,4-二硝基苯肼于100mL棕色容量瓶中，加入5mL磷酸，用乙腈定容，即得。2)待測液制備如圖2所示，將0.2g的卷煙濾嘴爆珠4和一個(gè)陶瓷均質(zhì)子3置于含有10mL乙腈2的離心管1中，以脈沖形式渦旋振蕩10min直至所有爆珠樣品破碎，進(jìn)行萃取，靜置2min。準(zhǔn)確移取1.0mL萃取液的上清液于10mL容量瓶中，加入4mL凈化后的2,4-二硝基苯肼衍生化試劑后用乙腈定容，搖勻后室溫放置30min進(jìn)行衍生化。經(jīng)0.45μm有機(jī)相濾膜過濾，得待測液。3)混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制a、單一標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液的配制分別準(zhǔn)確稱取10mg(精確至0.1mg)的甲醛-2,4-二硝基苯腙和乙醛-2,4-二硝基苯腙于兩個(gè)100mL容量瓶中，用乙腈溶解并定容，配制成濃度為0.1mg/mL的單一標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液；b、混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制分別準(zhǔn)確移取1mL單一標(biāo)準(zhǔn)品儲備溶液于10mL容量瓶中，用乙腈定容，配制成濃度為0.01mg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液。4)系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的配制分別準(zhǔn)確移取0μL、100μL、200μL、500μL、1000μL、4000μL混合標(biāo)準(zhǔn)溶液至10mL容量瓶中，用乙腈定容，現(xiàn)配現(xiàn)用，得系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。按照摩爾分子量換算，最終所配制的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中甲醛的濃度為0mg/L、0.014mg/L、0.028mg/L、0.071mg/L、0.142mg/L和0.569mg/L；乙醛的濃度為0mg/L、0.020mg/L、0.039mg/L、0.098mg/L、0.196mg/L和0.783mg/L。5)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線繪制將步驟4)中所得的系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液分別采用高效液相色譜進(jìn)行測定，高效液相色譜分析條件為：色譜柱：C18柱(EclipseXDB-C18150mm×4.6mm，5μm)；流速：1.2mL/min；進(jìn)樣量：10μL；檢測波長：365nm；柱溫：30℃；流動(dòng)相：流動(dòng)相A：乙腈，流動(dòng)相B：水；洗脫梯度見表1。表1流動(dòng)相洗脫梯度時(shí)間(min)流動(dòng)相A/％流動(dòng)相B/％060408604099010149010156040206040所得標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的色譜圖如圖3所示，圖中縱坐標(biāo)為豐度(abundance)，橫坐標(biāo)為時(shí)間(time，min)，圖3中5為甲醛-2,4-二硝基苯腙，6為乙醛-2,4-二硝基苯腙。根據(jù)系列標(biāo)準(zhǔn)工作溶液的高效液相色譜分析結(jié)果，分別以甲醛和乙醛濃度與響應(yīng)峰面積繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(如圖4所示)。分別按照公式(1)和(2)計(jì)算獲得檢測方法定性檢出限和定量檢測限，如表2所示。LOD＝3.3(sb/m)公式(1)LOQ＝10(sb/m)公式(2)式中，sb為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率的標(biāo)準(zhǔn)差或空白基質(zhì)重復(fù)測定儀器響應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)差；m為標(biāo)準(zhǔn)工作曲線斜率。表2標(biāo)準(zhǔn)工作曲線與檢測限結(jié)果表明，甲醛和乙醛分別在0～0.6μg/mL和0～1.1μg/mL內(nèi)線性關(guān)系良好(R2>0.9999)，LOQ分別為4.0mg/kg和2.5mg/kg。6)待測液的測定采用高效液相色譜對步驟2)所得待測液進(jìn)行測定，紫外檢測器進(jìn)行檢測，外標(biāo)法定量。高效液相色譜分析條件同步驟5)。卷煙濾嘴爆珠樣品中甲醛和乙醛的含量按式(3)計(jì)算：式中：X—試樣中甲醛或乙醛的含量，單位為毫克每千克(mg/kg)；C—由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的甲醛或乙醛濃度，單位為毫克每升(mg/L)；C0—由標(biāo)準(zhǔn)曲線得出的空白值，單位為毫克每升(mg/L)；∫—試樣溶液的稀釋因子；V—萃取液體積，單位為升(L)；m—試料質(zhì)量，單位為千克(kg)。實(shí)驗(yàn)例按照實(shí)施例1的方法對卷煙濾嘴爆珠樣品進(jìn)行分析，所得色譜圖如圖5所示，其中圖5中6處的色譜峰為乙醛-2,4-二硝基苯腙的色譜峰。以3水平加標(biāo)方法進(jìn)行回收率和精密度實(shí)驗(yàn)，每個(gè)加標(biāo)水平重復(fù)測定5次，檢測方法回收率與重復(fù)性結(jié)果如表3。從表3可以看出，回收率、重復(fù)性數(shù)據(jù)理想，3個(gè)加標(biāo)水平的回收率在81.1～107.8％之間，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)為0.7～1.3％，可以滿足定量分析需要。表3檢測方法回收率與重復(fù)性在本發(fā)明其它實(shí)施例中，待測液的制備還可以為：將0.2g的卷煙濾嘴爆珠和一個(gè)陶瓷均質(zhì)子置于含有12mL乙腈的離心管中，以脈沖形式渦旋振蕩15min直至所有爆珠樣品破碎，進(jìn)行萃取，靜置2min。準(zhǔn)確移取1.0mL萃取液的上清液于10mL容量瓶中，加入4mL凈化后的2,4-二硝基苯肼衍生化試劑后用乙腈定容，搖勻后室溫放置30min進(jìn)行衍生化。經(jīng)0.22μm有機(jī)相濾膜過濾，得待測液。其它步驟同實(shí)施例1。當(dāng)前第1頁1 2 3