本發(fā)明屬于分析檢測
技術(shù)領(lǐng)域：
，涉及一種分析大米內(nèi)香氣成分的方法，具體來說是一種對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法。
背景技術(shù)：
：京山橋米，湖北省京山縣特產(chǎn)，中國國家地理標(biāo)志產(chǎn)品。因原產(chǎn)于京山縣孫橋鎮(zhèn)而得名，其顆粒細(xì)長、光潔透明、可口不膩、噴香味美，早在明代就被御定為“貢米”。京山橋米的特點(diǎn)是干，整，熟，白，青梗如玉，腹白極小。并且其顆粒細(xì)長、光潔透明，是水稻中不可多得的珍品。用橋米做的飯松軟略糍，噴香撲鼻，可口不膩，營養(yǎng)豐富。而橋米中的極品是“洋西早”品種，但由于自然環(huán)境的限制，產(chǎn)量很低。通過儀器分析檢測到的大米揮發(fā)性物質(zhì)已有200種，然而揮發(fā)性物質(zhì)與風(fēng)味對(duì)應(yīng)關(guān)系上只有很少一部分為人所了解。大米中的己醛(具有葡萄酒味)、壬醛(具有果香味)等香氣成分主要由不飽和脂肪酸(亞麻酸和亞油酸等)氧化產(chǎn)生，因而含量較多，可以用來表征大米新鮮度。傳統(tǒng)檢測大米風(fēng)味物質(zhì)的方法主要為采集、濃縮、分離、定量，操作步驟繁瑣、且分離和定量分析存在一定的困難。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中的上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法，所述的這種對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法要解決現(xiàn)有技術(shù)中測定京山橋米中的香氣成分步驟繁瑣、且定量不準(zhǔn)確等技術(shù)問題。本發(fā)明提供了一種對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行分離鑒定的方法，包括以下步驟：1)一個(gè)利用頂空固相微萃取技術(shù)分離和富集京山橋米中風(fēng)味物質(zhì)的步驟，將京山橋米用粉粹機(jī)粉粹，過80目篩，準(zhǔn)確稱取京山橋米樣品5g于20ml的頂空瓶中，加入10μl10μg/ml的2,4,6-三甲基吡啶內(nèi)標(biāo)物后立即用硅膠墊片密封，并在恒溫水浴溫度80℃下平衡10min，用于頂空固相微萃取，頂空固相微萃取條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度80℃下萃取30～40min，隨后迅速將萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸5～6min；2)一個(gè)利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測分析上述所得到的京山橋米風(fēng)味物質(zhì)，并對(duì)其中香氣成分進(jìn)行定性定量分析的步驟；a)氣相色譜條件為：采用rtx-wax石英毛細(xì)柱，所述的rtx-wax石英毛細(xì)柱的參數(shù)為30m×0.25mm×0.25μm，載氣為氦氣，流量為1ml/min，分流進(jìn)樣，進(jìn)樣口溫度為260℃，升溫程序：初始溫度為40℃，保持2min，以5℃/min升至240℃，保持3min；b)質(zhì)譜條件為：電子轟擊離子源，電子能量70ev，離子源溫度為250℃，采用全掃描模式，掃描范圍m/z：40–400，接口溫度250℃；四級(jí)桿溫度180℃；3)在對(duì)檢出的香氣成分進(jìn)行定性分析的過程中，未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索同時(shí)與nist14和nist14s譜庫相匹配，匹配度大于80％的成分作為定性；4)在定量的過程中，化合物含量按內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，即以各種化合物的峰面積除以tmp的峰面積的比值乘以tmp的濃度作為樣品中化合物的濃度。進(jìn)一步的，所述的分析檢測儀器為氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。進(jìn)一步的，所述的定量方法為內(nèi)標(biāo)法定量。本發(fā)明的方法包括一個(gè)利用頂空固相微萃取技術(shù)分離和富集京山橋米中香氣成分(醛類、酮類和醇類)的步驟；一個(gè)利用氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測分析上述所得到的京山橋米香氣成分(醛類、酮類和醇類)，并對(duì)其中香氣成分進(jìn)行定性定量分析的步驟。本發(fā)明和已有技術(shù)相比，其技術(shù)進(jìn)步是顯著的。本發(fā)明采用頂空固相微萃取結(jié)合氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)分析京山橋米中香氣成分，形成一套京山橋米中香氣成分的定性定量分析方法，該鑒定方法具有操作簡便、快速、準(zhǔn)確、適用性廣泛等優(yōu)點(diǎn)。附圖說明圖1是實(shí)施例1采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行分析的色譜圖。具體實(shí)施方式下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行闡述，但并不限制本發(fā)明。為進(jìn)一步闡釋采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)快速檢測并定性定量京山橋米中的香氣成分的方法，下面結(jié)合實(shí)例作更詳盡的說明。實(shí)施例1本方法主要采用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)京山橋米中的香氣成分進(jìn)行定性定量，具體步驟如下：1)提取京山橋米中的香氣成分：首先將京山橋米用粉粹機(jī)粉粹，過80目篩，準(zhǔn)確稱取京山橋米樣品5g于20ml的頂空瓶中，加入10μl10μg/ml的2,4,6-三甲基吡啶(tmp)內(nèi)標(biāo)物后立即用硅膠墊片密封，并在恒溫水浴溫度80℃下平衡10min，用于頂空固相微萃取。頂空固相微萃取條件為：將萃取頭插入到頂空瓶中，并使萃取頭處于樣品之上2cm，恒溫水浴溫度80℃下萃取30～40min，隨后迅速將萃取頭插入氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀進(jìn)樣口，于250℃下解吸5～6min，進(jìn)行g(shù)c-ms分析。2)用頂空固相微萃取-氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測分析步驟1)所得到的京山橋米中的香氣成分進(jìn)行定性定量分析：氣相色譜條件：采用rtx-wax石英毛細(xì)柱(30m×0.25mm×0.25μm)，載氣為氦氣(99.999％)，流量為1ml/min，分流進(jìn)樣，分流比設(shè)為20:1，進(jìn)樣口溫度為260℃，升溫程序：初始溫度為40℃，保持2min，以5℃/min升至240℃，保持3min。質(zhì)譜條件：電子轟擊離子源，電子能量70ev，離子源溫度為250℃，采用全掃描模式，掃描范圍m/z：40–400，接口溫度250℃；四級(jí)桿溫度180℃。3)檢出物質(zhì)的定性與定量：gc-ms數(shù)據(jù)處理由島津軟件系統(tǒng)完成，未知化合物經(jīng)計(jì)算機(jī)檢索同時(shí)與nist14和nist14s譜庫相匹配，匹配度大于80％的成分作為鑒定結(jié)果，化合物含量按內(nèi)標(biāo)法進(jìn)行計(jì)算，即以各種化合物的峰面積除以tmp的峰面積的比值乘以tmp的濃度作為樣品中化合物的濃度。表1本發(fā)明方法京山橋米中的香氣成分檢測結(jié)果。序號(hào)物質(zhì)名稱保留時(shí)間峰面積峰面積％含量ng12-丁酮2.6991885900.122.012己醛6.64991567925.99100.243對(duì)二甲苯9.82811679080.7612.724tmp11.02091352675.01100.0052-戊基呋喃11.64422343391.4624.466甲基吡嗪12.40115870091.0417.377棕櫚醇13.32933775262.2136.9882-甲基-1-癸醇14.33924898401.6327.269壬醛16.344140474139.19153.7710反式-2-壬烯醛19.97433571602.2036.75當(dāng)前第1頁12