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鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒、其制備及使用方法與流程

文檔序號(hào):11913454閱讀:670來(lái)源:國(guó)知局

本發(fā)明屬于醫(yī)療衛(wèi)生技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒、其制備及使用方法。



背景技術(shù):

目前基于膠體金法或第一代熒光法的檢測(cè)試劑,在定量檢測(cè)精密度和準(zhǔn)確性以及操作便利性方面還存在嚴(yán)重的缺陷。第一代熒光檢測(cè)法的鐵蛋白試劑大部分都是利用普通的熒光物質(zhì)進(jìn)行標(biāo)記。普通的熒光物質(zhì)Stokes位移小,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜常有重疊,相互干擾,影響檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性;普通熒光物質(zhì)的熒光壽命非常短,激發(fā)光消失,熒光也消失。而且在生物流體和血清中的許多復(fù)合物和蛋白本身就可以發(fā)熒光,對(duì)檢測(cè)結(jié)果產(chǎn)生嚴(yán)重的干擾。1942年Wissman發(fā)現(xiàn),某些β-二酮與銪配合后可吸收紫外光,發(fā)出強(qiáng)烈的銪離子的特征熒光。1979年,芬蘭SoiniHemmia提出時(shí)間分辨熒光免疫分析理論;2003年,上海新波生物技術(shù)有限公司應(yīng)用該技術(shù)推出了首個(gè)體外診斷產(chǎn)品。目前,也有少數(shù)公司利用時(shí)間分辨免疫分析理論,做出了鐵蛋白定量檢測(cè)試劑,但是,這些鐵蛋白定量檢測(cè)試劑均需要加樣、孵育、洗滌等步驟,操作復(fù)雜,檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng),而且需要專業(yè)人士操作,還不能做到即時(shí)檢測(cè)。

綜上,為了解決傳統(tǒng)鐵蛋白檢測(cè)存在的易受本底熒光干擾、靈敏度低、特異性差、操作復(fù)雜、檢測(cè)時(shí)間長(zhǎng)并且不能做到即時(shí)檢測(cè)等不足,一種新的鐵蛋白定量檢測(cè)技術(shù)亟待開發(fā)。



技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:

為了解決現(xiàn)有技術(shù)存在的上述問(wèn)題,本發(fā)明提供了一種操作簡(jiǎn)便、能夠?qū)崿F(xiàn)即時(shí)檢測(cè)、并且靈敏度高、特異性好的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒。本發(fā)明還相應(yīng)提供了所述鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的制備方法,所述制備方法能夠進(jìn)一步提升所制得的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒用于檢測(cè)鐵蛋白的靈敏度和特異性。同時(shí),本發(fā)明還相應(yīng)的提供了所述鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的使用方法,該使用方法能夠消除試劑盒的本底熒光干擾,進(jìn)一步提升檢測(cè)結(jié)果的靈敏度和特異性。

本發(fā)明的設(shè)計(jì)思路:非常少的稀土金屬(Eu、Tb、Sm、Dy)的熒光壽命較長(zhǎng),可達(dá)1~2ms,能夠滿足測(cè)量要求,因此而產(chǎn)生了時(shí)間分辨熒光分析法,即使用長(zhǎng)效熒光標(biāo)記物,在關(guān)閉激發(fā)光后再測(cè)定熒光強(qiáng)度的分析方法。鑭系元素的熒光光譜有較大的Stokes位移,最大可達(dá)290nm,激發(fā)光譜和發(fā)射光譜間不會(huì)相互重疊,加上其發(fā)射的光譜信號(hào)峰很窄,熒光壽命長(zhǎng),銪的熒光壽命可達(dá)730μs,檢測(cè)中只要在每個(gè)激發(fā)光脈沖過(guò)后采用延緩測(cè)量時(shí)間的方式,待短壽命的背景熒光衰變消失后,再打開取樣門儀器記錄長(zhǎng)壽命銪鰲合物發(fā)射的特異性熒光,可以避免本底熒光干擾,提高檢測(cè)的精密度。

本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為:

本發(fā)明首先提供一種鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒,包括襯板,所述襯板的上表面依次搭接設(shè)置有樣品墊、結(jié)合墊、NC膜以及吸收墊,所述NC膜上設(shè)置有檢測(cè)線和質(zhì)控線,所述NC膜的檢測(cè)線處包被第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體,所述NC膜的質(zhì)控線包被羊抗雞IgY多抗抗體;所述結(jié)合墊處設(shè)置有第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球和雞IgY標(biāo)記的熒光微球。

相應(yīng)的,本發(fā)明還提供了前述本發(fā)明的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的制備方法,該制備方法中“將各個(gè)預(yù)制好的部件按照結(jié)構(gòu)要求組裝在一起”的具體方式是本領(lǐng)域技術(shù)人員根據(jù)行業(yè)通用知識(shí)可以輕松實(shí)現(xiàn)的,并且該部分并不是本發(fā)明的創(chuàng)新點(diǎn)所在,因此不再詳細(xì)贅述。本發(fā)明的制備方法中,結(jié)合墊以及NC膜的包被是至關(guān)重要的。

結(jié)合墊中的所述第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球通過(guò)以下步驟制備:S1、取熒光微球并用硼酸緩沖液稀釋,獲得熒光微球稀釋液;S2、向所得熒光微球稀釋液內(nèi)加入EDC溶液進(jìn)行活化,獲得熒光微球活化液;S3、將所得熒光微球活化液離心,去除上清液,取下層沉淀;S4、向下層沉淀內(nèi)加入硼酸緩沖液進(jìn)行復(fù)溶,然后加入第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的稀釋液,搖床反應(yīng),即得到第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球溶液。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例,進(jìn)一步的特征優(yōu)化,結(jié)合墊中的所述第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球通過(guò)以下具體步驟制備實(shí)現(xiàn):s1、取熒光微球并用50mmol/L的硼酸緩沖液稀釋10倍,得到熒光微球稀釋液;s2、每1000μL熒光微球稀釋液內(nèi)加入20~50μL的10mg/ml的EDC溶液,4℃條件下以80rpm/min旋轉(zhuǎn)搖床,搖勻活化15min,獲得熒光微球活化液;s3、將所得熒光微球活化液在4~10℃條件下,以14000rpm/min離心10min,去除上清液,取下層沉淀;s4、向下層沉淀內(nèi)加入硼酸緩沖液進(jìn)行復(fù)溶,然后加入第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的稀釋液得到標(biāo)記反應(yīng)體系,并使第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體在標(biāo)記反應(yīng)體系中的濃度為25μg/ml;將標(biāo)記反應(yīng)體系置于搖床,4℃條件下以80rpm/min搖勻1h,再繼續(xù)搖床標(biāo)記反應(yīng)1h,即得到第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球溶液。

結(jié)合墊中的所述雞IgY標(biāo)記的熒光微球通過(guò)以下步驟制備:P1、取熒光微球并用硼酸緩沖液稀釋,獲得熒光微球稀釋液;P2、向所得熒光微球稀釋液內(nèi)加入EDC溶液進(jìn)行活化,獲得熒光微球活化液;P3、將所得熒光微球活化液離心,去除上清液,取下層沉淀;P4、向下層沉淀內(nèi)加入硼酸緩沖液進(jìn)行復(fù)溶,然后加入雞IgY的稀釋液,搖床反應(yīng),即得到雞IgY標(biāo)記的熒光微球溶液。

根據(jù)本發(fā)明的實(shí)施例,進(jìn)一步的特征優(yōu)化,結(jié)合墊中的所述雞IgY標(biāo)記的熒光微球通過(guò)以下具體步驟制備實(shí)現(xiàn):p1、取熒光微球并用50mmol/L的硼酸緩沖液稀釋10倍,得到熒光微球稀釋液;p2、每1000μL熒光微球稀釋液內(nèi)加入20~50μL的10mg/ml的EDC溶液,4℃條件下以80rpm/min旋轉(zhuǎn)搖床,搖勻活化15min,獲得熒光微球活化液;p3、將所得熒光微球活化液在4~10℃條件下,以14000rpm/min離心10min,去除上清液,取下層沉淀;p4、向下層沉淀內(nèi)加入硼酸緩沖液進(jìn)行復(fù)溶,然后加入雞IgY的稀釋液得到標(biāo)記反應(yīng)體系,并使雞IgY在標(biāo)記反應(yīng)體系中的濃度為25μg/ml;將標(biāo)記反應(yīng)體系置于搖床,4℃條件下以80rpm/min搖勻1h,再繼續(xù)搖床標(biāo)記反應(yīng)1h,即得到雞IgY標(biāo)記的熒光微球溶液。

第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球和雞IgY標(biāo)記的熒光微球分別制備獲取后,即可將兩者混合用于結(jié)合墊的制備,具體過(guò)程步驟為:將所得第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球溶液和雞IgY標(biāo)記的熒光微球溶液混合得混合液,將混合液在乳膠墊上噴膜得到微球乳膠結(jié)合墊,將微球乳膠結(jié)合墊在37℃條件下烘干24h后即得所述結(jié)合墊。

根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施例,所述NC膜的制備方法為:向10mmol/L的PBS緩沖液中加入5wt%的蔗糖得到包被稀釋液,使用所述包被稀釋液分別稀釋第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體和羊抗雞IgY多抗抗體得到第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體稀釋液和羊抗雞IgY多抗抗體稀釋液,然后使用第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體稀釋液和羊抗雞IgY多抗抗體稀釋液分別在硝酸纖維素膜上的T線和C線處劃線,依次分別形成包被第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的檢測(cè)線和包被羊抗雞IgY多抗抗體的質(zhì)控線,然后將硝酸纖維素膜在37℃條件下干燥4~6h即得所述NC膜。

出于消除本底熒光,降低本底干擾的角度考慮,本發(fā)明還提供了前述本發(fā)明的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的使用方法,包括如下步驟:將待測(cè)樣品置于樣品墊,待測(cè)樣品由樣品墊向吸收墊層析,待測(cè)樣品經(jīng)過(guò)結(jié)合墊進(jìn)入NC膜的檢測(cè)線和質(zhì)控線進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后用紫外光源對(duì)NC膜的檢測(cè)線和質(zhì)控線進(jìn)行掃描,并通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值即T/C值,分析折算出樣品中待測(cè)物的濃度。

結(jié)合本發(fā)明提供的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒及其制備方法,其原理是采用熒光微球雙抗體夾心免疫層析法定量檢測(cè)血清或血漿中的SF濃度。具體的:本產(chǎn)品檢測(cè)線包被有第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體,質(zhì)控線包被有羊抗雞IgY多抗抗體;待測(cè)樣品中的SF與結(jié)合墊中的納米熒光微球標(biāo)記的第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體結(jié)合并通過(guò)毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測(cè)區(qū)后,與檢測(cè)線上固定的第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體結(jié)合,形成熒光微球-第一鼠抗SF單抗-SF-第二鼠抗SF單抗夾心復(fù)合物并被固定在檢測(cè)線上。而雞IgY標(biāo)記的熒光微球繼續(xù)向前層析,與固定在質(zhì)控線的羊抗雞IgY多抗結(jié)合并固定。反應(yīng)結(jié)束后,用紫外光源(365nm)對(duì)檢測(cè)區(qū)(即檢測(cè)線和質(zhì)控線區(qū)域)掃描,檢測(cè)線和質(zhì)控線上熒光納米微球發(fā)出高強(qiáng)度的熒光(615nm),且衰變時(shí)間也較長(zhǎng)。延緩測(cè)量時(shí)間,待樣品基質(zhì)中自然發(fā)生的短壽命熒光(1-10ns)全部衰變后,再測(cè)量銪元素的特異性熒光,完全排除非特異本底熒光的干擾。通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值即T/C值,分析出樣品中待測(cè)物的濃度,排除熒光強(qiáng)度隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰減對(duì)定量造成的影響。

本發(fā)明的有益效果為:

本發(fā)明的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒適用于體外定量檢測(cè)人血清、血漿以及全血中的鐵蛋白(SF)含量??捎糜谌辫F性貧血的輔助診斷。鐵蛋白作為身體組織中主要貯存鐵質(zhì)的一種蛋白,是維持鐵質(zhì)平衡中不可缺少的一種重要蛋白。SF濃度代表體內(nèi)儲(chǔ)存鐵的水平,因此,檢測(cè)SF濃度,可判定體內(nèi)鐵儲(chǔ)存狀況。

本發(fā)明的提供的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒,基于時(shí)間分辨熒光免疫層析法的理論基礎(chǔ)及前述設(shè)計(jì)思路,將長(zhǎng)衰減壽命的標(biāo)記物與時(shí)間分辨熒光技術(shù)相結(jié)合,使瞬時(shí)熒光干擾減到最小化。并且通過(guò)一步加樣,10分鐘即可讀取檢測(cè)結(jié)果,實(shí)現(xiàn)了更為方便快捷。

結(jié)合本發(fā)明的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒及其使用方法,用于鐵蛋白檢測(cè),可達(dá)到2.5ng/ml的靈敏度,不僅高于傳統(tǒng)的膠體金檢測(cè)法,而且高于目前市面上行業(yè)內(nèi)的其他熒光免疫定量產(chǎn)品。進(jìn)一步的,本發(fā)明的線性范圍寬,準(zhǔn)確度、精密度優(yōu)于膠體金免疫層析,CV值比膠體金免疫層析小,因而檢測(cè)值更準(zhǔn)確可靠。在檢測(cè)耗時(shí)方便,一次加樣、10min即可讀取檢測(cè)結(jié)果,實(shí)現(xiàn)了POCT即時(shí)檢測(cè)。通過(guò)干法工藝、一步即實(shí)現(xiàn)了鐵蛋白的檢測(cè),方便快捷。

附圖說(shuō)明

圖1是本發(fā)明的鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的結(jié)構(gòu)示意圖。

圖中:1為樣品墊;2為結(jié)合墊;3為NC膜;4為吸收墊;5為襯板;“T”線為檢測(cè)線,“C”線為質(zhì)控線。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合附圖以及具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步闡釋。

本發(fā)明中的熒光微球?yàn)橄⊥龄B熒光微球,采購(gòu)自南京基蛋生物科技有限公司。本發(fā)明中的其他試劑及儀器同樣皆為常見普通市售產(chǎn)品,此處不再一一贅述其各自來(lái)源。本發(fā)明中的第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體和第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體分別指代兩種不同結(jié)合位點(diǎn)的鐵蛋白單抗抗體。

實(shí)施例1:

如圖1所示,本實(shí)施例提供了一種鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒,包括襯板5,所述襯板5的上表面依次搭接設(shè)置有樣品墊1、結(jié)合墊2、NC膜3以及吸收墊4,所述NC膜3上設(shè)置有檢測(cè)線和質(zhì)控線,所述NC膜3的檢測(cè)線處包被第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體,所述NC膜3的質(zhì)控線包被羊抗雞IgY多抗抗體;所述結(jié)合墊2處設(shè)置有第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球和雞IgY標(biāo)記的熒光微球。

實(shí)施例2:

結(jié)合附圖1,本實(shí)施例提供前述實(shí)施例1所述鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的具體制備方法,步驟如下:

1、取熒光微球并用50mmol/L的硼酸緩沖液稀釋10倍,得到熒光微球稀釋液。向熒光微球稀釋液內(nèi)加入10mg/ml的EDC溶液每1000μL熒光微球稀釋液添加20~50μL的EDC溶液,然后置于搖床,并在4℃條件下以80rpm/min旋轉(zhuǎn)搖床,搖勻活化15min,獲得熒光微球活化液。將所得熒光微球活化液在4~10℃條件下,以14000rpm/min離心10min,去除上清液,取下層沉淀。向下層沉淀內(nèi)加入硼酸緩沖液進(jìn)行復(fù)溶。

2a、向步驟1所得下層沉淀的硼酸緩沖液復(fù)溶液中加入第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的稀釋液得到標(biāo)記反應(yīng)體系,通過(guò)控制第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的稀釋液的添加量使第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體在標(biāo)記反應(yīng)體系中的濃度為25μg/ml。將標(biāo)記反應(yīng)體系置于搖床,4℃條件下以80rpm/min搖勻1h,再繼續(xù)搖床標(biāo)記反應(yīng)1h,即得到第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球溶液。

2b、向步驟1所得下層沉淀的硼酸緩沖液復(fù)溶液中加入雞IgY的稀釋液得到標(biāo)記反應(yīng)體系,通過(guò)控制雞IgY的稀釋液的添加量使雞IgY在標(biāo)記反應(yīng)體系中的濃度為25μg/ml。將標(biāo)記反應(yīng)體系置于搖床,4℃條件下以80rpm/min搖勻1h,再繼續(xù)搖床標(biāo)記反應(yīng)1h,即得到雞IgY標(biāo)記的熒光微球溶液。

3、將2a所得第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體標(biāo)記的熒光微球溶液和2b所得雞IgY標(biāo)記的熒光微球溶液按照1:1的比例混合均勻得到混合液。使用混合液在乳膠墊上進(jìn)行噴膜得到微球乳膠結(jié)合墊,噴膜時(shí)混合液的用量為8μl/cm,然后將微球乳膠結(jié)合墊豎立放在試管架上,放入電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱在37℃條件下烘干24h即得所述結(jié)合墊2,為了保證干燥,干燥后的結(jié)合墊2應(yīng)在濕度≤20%的環(huán)境下取出,取出后裁剪成30cm×0.8cm的長(zhǎng)條備用。

4、取硝酸纖維素膜并將其裁剪成30cm/段,將片段硝酸纖維素膜貼在襯板5的中間位置,襯板5為PVC板。向10mmol/L的PBS緩沖液中加入蔗糖得到包被稀釋液,蔗糖的加入量為所述PBS緩沖液的5wt%。使用所述包被稀釋液分別稀釋第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體和羊抗雞IgY多抗抗體得到第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體稀釋液和羊抗雞IgY多抗抗體稀釋液。然后使用第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體稀釋液和羊抗雞IgY多抗抗體稀釋液分別在硝酸纖維素膜上的T線和C線處劃線,依次分別形成包被第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體的檢測(cè)線和包被羊抗雞IgY多抗抗體的質(zhì)控線。然后將包被好的硝酸纖維素膜放入電熱恒溫鼓風(fēng)干燥箱,在37℃條件下干燥4~6h即得所述NC膜3。

5、將步驟3所得結(jié)合墊2設(shè)置在所述襯板5上,并搭接設(shè)置在所述NC膜3的左側(cè)。將樣品墊1設(shè)置在所述襯板5上,并搭接設(shè)置在結(jié)合墊2的左側(cè)。將吸收墊4設(shè)置在所述襯板5上,并搭接設(shè)置在所述NC膜3的右側(cè)。即得所述鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒。

實(shí)施例3:

本實(shí)施例提供實(shí)施例1所得鐵蛋白定量檢測(cè)試劑盒的使用方法,具體為:將待測(cè)樣品置于樣品墊1,待測(cè)樣品由樣品墊1向吸收墊4層析,待測(cè)樣品經(jīng)過(guò)結(jié)合墊2進(jìn)入NC膜3的檢測(cè)線和質(zhì)控線進(jìn)行反應(yīng),反應(yīng)結(jié)束后用紫外光源對(duì)NC膜3的檢測(cè)線和質(zhì)控線進(jìn)行掃描,并通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值即T/C值,分析折算出樣品中待測(cè)物的濃度。

本實(shí)施例3具體使用時(shí):檢測(cè)線包被有第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體,質(zhì)控線包被有羊抗雞IgY多抗抗體;待測(cè)樣品中的SF與結(jié)合墊中的納米熒光微球標(biāo)記的第一鼠抗鐵蛋白單克隆抗體結(jié)合并通過(guò)毛細(xì)作用向前層析,當(dāng)達(dá)到檢測(cè)區(qū)后,與檢測(cè)線上固定的第二鼠抗鐵蛋白單克隆抗體結(jié)合,形成熒光微球-第一鼠抗SF單抗-SF-第二鼠抗SF單抗夾心復(fù)合物并被固定在檢測(cè)線上。而雞IgY標(biāo)記的熒光微球繼續(xù)向前層析,與固定在質(zhì)控線的羊抗雞IgY多抗結(jié)合并固定。反應(yīng)結(jié)束后,用紫外光源(365nm)對(duì)檢測(cè)區(qū)(即檢測(cè)線和質(zhì)控線區(qū)域)掃描,檢測(cè)線和質(zhì)控線上熒光納米微球發(fā)出高強(qiáng)度的熒光(615nm),且衰變時(shí)間也較長(zhǎng)。延緩測(cè)量時(shí)間,待樣品基質(zhì)中自然發(fā)生的短壽命熒光(1-10ns)全部衰變后,再測(cè)量銪元素的特異性熒光,完全排除非特異本底熒光的干擾。通過(guò)檢測(cè)線和質(zhì)控線熒光強(qiáng)度的強(qiáng)弱及其比值即T/C值,分析出樣品中待測(cè)物的濃度,排除熒光強(qiáng)度隨時(shí)間延長(zhǎng)而衰減對(duì)定量造成的影響。

結(jié)合本發(fā)明實(shí)施例1~3,在進(jìn)一步的跟蹤測(cè)試中,所述實(shí)施例在鐵蛋白檢測(cè)方面具有操作簡(jiǎn)便、能夠?qū)崿F(xiàn)即時(shí)檢測(cè)、并且具有靈敏度高、特異性好的特點(diǎn)。采用干式檢測(cè)法能夠?qū)崿F(xiàn)一步加樣,10分鐘即可讀取檢測(cè)結(jié)果,排除了本底熒光干擾,靈敏度可達(dá)到2.5ng/ml。

本發(fā)明不局限于上述最佳實(shí)施方式,任何人在本發(fā)明的啟示下都可得出其他各種形式的產(chǎn)品,但不論在其形狀或結(jié)構(gòu)上作任何變化,凡是具有與本申請(qǐng)相同或相近似的技術(shù)方案,均落在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。

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