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一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELISA芯片及其檢測(cè)方法與流程

文檔序號(hào):12453866閱讀:來(lái)源:國(guó)知局

技術(shù)特征:

1.一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,其設(shè)有多個(gè)水相腔和油相腔,該水相腔和油相腔交替排列為一行,且前后的腔體互相連通,水相腔設(shè)有水相進(jìn)口,油相腔設(shè)有油相進(jìn)口,行末的水相腔和一染料腔連接,該染料腔另設(shè)有第三進(jìn)口;染料腔和一染料氣柱通道連通,染料氣柱通道旁設(shè)有刻度。

2.一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,水相腔的數(shù)量和油相腔的數(shù)量分別為5-15個(gè)。

3.一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,水相腔中至少包括過(guò)氧化氫溶液,PtNPs溶液,鏈霉親和素溶液和生物素化抗體溶液,每種溶液獨(dú)立設(shè)于一水相腔內(nèi)。

4.一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,油相腔中含有礦物油。

5.如權(quán)利要求1所述的一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,該芯片包括上層(1)、中層(2)和下層(3),其中,中層(2)中間設(shè)有一行由圓形孔和橢圓形孔交替設(shè)置的腔,其中圓形孔為水相腔(21),橢圓形孔為油相腔(22),且相鄰的孔互相連通;在最左側(cè)的圓形孔側(cè)面設(shè)有染料腔(23),該最左側(cè)的圓形孔和染料腔(23)連通;該中層設(shè)有S形彎折排列的染料氣柱通道(24),染料氣柱通道(24)的側(cè)面設(shè)刻度(25);染料氣柱通道(24)的起點(diǎn)和染料腔(23)連通,終點(diǎn)為出氣孔(26);中層的右上角設(shè)多個(gè)水相通孔(27);

上層左上角設(shè)有多個(gè)水相進(jìn)樣孔(12),該每個(gè)水相進(jìn)樣孔(12)分別和一水相槽(11)連接,每條油相槽(11)設(shè)于上層的下表面,起點(diǎn)位于水相進(jìn)樣孔(12),終點(diǎn)位于中層圓形水相腔(21)的對(duì)應(yīng)位置;上層的右上角設(shè)有多個(gè)油相進(jìn)樣孔(17),其位置和數(shù)量分別和中層右上角的油相通孔(27)的位置和數(shù)量對(duì)應(yīng);

下層上表面設(shè)有多道油相槽(37),每個(gè)油相槽(37)起點(diǎn)分別為中層的油相通孔(27)對(duì)應(yīng)的位置,終點(diǎn)為中層的橢圓形油相腔(22)對(duì)應(yīng)的位置。

6.如權(quán)利要求5所述的一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的集成化ELSIA芯片,其特征在于,上層的油相通孔(27)數(shù)量不少于中層的油相腔(21)的數(shù)量。

7.一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的方法,采用權(quán)利要求1至6任一項(xiàng)所述的集成化ELSIA芯片,包括如下步驟:

1)根據(jù)要檢測(cè)的抗原選擇相對(duì)應(yīng)的捕獲抗體及檢測(cè)抗體;

2)對(duì)信號(hào)放大分子進(jìn)行修飾,使其與檢測(cè)抗體分子偶聯(lián)結(jié)合,或使其能夠特異性的與檢測(cè)抗體結(jié)合;

3)在磁珠或微球表面進(jìn)行包被,加入捕獲抗體使其結(jié)合于包被后的固相表面,之后進(jìn)行封閉液封閉;

4)將以下試劑載入芯片:檢測(cè)抗原與捕獲抗體包被的磁珠,檢測(cè)抗體、信號(hào)放大分子,洗去多余試劑的洗滌緩沖液,底物以及染料;其中,水相從水相進(jìn)口進(jìn)入水相腔;油相從油相進(jìn)口進(jìn)入各油相腔,染料加入染料腔,磁珠和樣品加入第一個(gè)水相腔;

5)密封加樣孔,磁移動(dòng),利用磁鐵對(duì)磁珠拉動(dòng),將磁珠和樣品從第一個(gè)水相腔拉至最后一個(gè)水相腔,完成每一步反應(yīng),信號(hào)放大分子催化底物分子,生成大量氣體分子,氣體推動(dòng)染料前進(jìn)產(chǎn)生距離信號(hào);

6)根據(jù)距離信號(hào),記錄數(shù)據(jù),進(jìn)而建立標(biāo)準(zhǔn)曲線,實(shí)現(xiàn)未知樣品中靶標(biāo)分子的定量檢測(cè)。

8.如權(quán)利要求7所述的一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的方法,其特征在于:所述的分子識(shí)別包括,利用具有特異性識(shí)別功能的分子對(duì)所述靶標(biāo)進(jìn)行識(shí)別或標(biāo)記,并通過(guò)將該識(shí)別分子將信號(hào)放大分子或粒子引入檢測(cè)體系中。

9.如權(quán)利要求7所述的一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的方法,其特征在于:利用分子識(shí)別技術(shù)對(duì)所述靶標(biāo)進(jìn)行識(shí)別或標(biāo)記,所述靶標(biāo)包括蛋白、核酸、肽鏈、糖類(lèi)、脂類(lèi)、有機(jī)小分子、無(wú)機(jī)離子、細(xì)胞、細(xì)菌或病毒等可以進(jìn)行免疫反應(yīng)的至少一種。

10.如權(quán)利要求7所述的一種基于距離檢測(cè)靶標(biāo)的方法,其特征在于:所述信號(hào)放大分子包括能夠催化底物產(chǎn)生氣體的催化劑或酶,其催化底物為受催化后產(chǎn)生氣體分子的物質(zhì),氣體分子為底物受催化后的產(chǎn)物。

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