本發(fā)明涉及一種檢測技術(shù)，具體是一種溴布特羅檢測方法及其試劑盒。

背景技術(shù)：

鹽酸溴布特羅，又名為瘦肉精，是一種人工合成的β2腎上腺素受體激動劑，常用于防治哮喘及肺氣腫等肺部疾病。當(dāng)其使用劑量達(dá)到治療量的5-10倍時，具有調(diào)節(jié)營養(yǎng)物質(zhì)流向和重新分配的作用，可使機(jī)體肌肉合成增加，脂肪沉積減少。若在畜牧生產(chǎn)中大劑量使用可明顯提高飼料轉(zhuǎn)化率和瘦肉率，但同時也會造成動物性食品中瘦肉精的殘留，食用后會對肝腎等內(nèi)臟器官產(chǎn)生毒理作用，出現(xiàn)心悸、頭痛、目眩及肌肉振顫等癥狀，從而引起人類中毒事件的發(fā)生，嚴(yán)重時甚至?xí)斐伤劳?。因此，世界各國政府普遍都禁止用鹽酸克倫特羅作為畜牧動物的飼料添加劑。我國農(nóng)業(yè)部在2002年12月24日發(fā)布的第235號公告中也明確禁止在飼料中添加鹽酸溴布特羅，并規(guī)定在動物性食品中鹽酸溴布特羅殘留量為不得檢出。因此，有效的檢測方法是控制鹽酸溴布特羅濫用的關(guān)鍵之一，有必要研究高靈敏度快速檢測鹽酸溴布特羅的方法。

目前，常用檢測鹽酸溴布特羅的方法主要有氣相色譜-質(zhì)譜法、高效液相色譜法、酶聯(lián)免疫法及膠體金免疫層析法等。其中，膠體金免疫層析法基于免疫層析技術(shù)理論，通過制備免疫金標(biāo)試劑卡，對動物尿液或組織樣本中的鹽酸溴布特羅進(jìn)行檢測，以此來定性判斷動物性肉食品中是否存在鹽酸溴布特羅殘留。該試劑卡具有操作簡便、檢測快速及費用低的優(yōu)點，因而，在現(xiàn)場檢測或樣本初篩階段被廣泛使用。

不過，現(xiàn)有的利用膠體金免疫層析法的鹽酸溴布特羅檢測試劑卡具有檢測靈敏度不高及不能應(yīng)用于定量檢測裝置的缺點。其原因在于，由于試劑卡顯色部分直接暴露于空氣中，因而極易造成環(huán)境因素對試劑卡的影響，從而造成試劑卡上檢測線的顏色不穩(wěn)定，造成在極深色與極淺色時憑借肉眼判定可能出現(xiàn)假陽性及假陰性的情況發(fā)生，造成誤判，從而影響人民群眾的食品安全；此外，當(dāng)需要對鹽酸溴布特羅殘留進(jìn)行定量檢測時，由于目前的鹽酸溴布特羅膠體金檢測試劑卡存在的上述缺陷，造成環(huán)境因素對試劑卡檢測線顏色的影響，使得試劑卡檢測線顏色的不穩(wěn)定及失真情況加劇，基于此試劑卡檢測線顏色的光電傳感器在讀取數(shù)據(jù)時會進(jìn)一步放大失真的效果，最終反映在定量判定的數(shù)值上，就會存在嚴(yán)重的不準(zhǔn)確性，因而造成目前普遍使用的鹽酸溴布特羅檢測試劑卡無法應(yīng)用于定量檢測裝置或定量檢測效果不佳。

技術(shù)實現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的在于提供一種溴布特羅檢測方法及其試劑盒，以解決上述背景技術(shù)中提出的問題。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：

一種溴布特羅檢測方法及其試劑盒，包含測試紙和盒體，所述測試紙包括底板、樣本吸收層、膠體金層、保護(hù)層、硝酸纖維素膜和吸水層，所述底板設(shè)置了最下部，底板上面最左邊設(shè)有樣本吸收層，樣本吸收層的右側(cè)設(shè)有膠體金墊，膠體金墊的右側(cè)設(shè)有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜的右側(cè)設(shè)有吸水層，所述盒體包括上蓋、側(cè)壁和底座，測試紙插在底座的中間，所述保護(hù)膜設(shè)于所述硝酸纖維素膜的一側(cè)表面，所述膠體金墊包被有抗鹽酸溴布特羅抗體，所述硝酸纖維素膜設(shè)有檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線包被有鹽酸溴布特羅蛋白質(zhì)偶聯(lián)物并靠近所述膠體金墊設(shè)置，所述質(zhì)控線包被有羊或兔抗鼠抗體并靠近所述吸水墊。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述底座上設(shè)有溫度計探頭，上蓋內(nèi)側(cè)設(shè)有濕度計，側(cè)壁外側(cè)設(shè)有顯示溫度和濕度的顯示器，檢測盒設(shè)有干燥腔，干燥腔橫截面為環(huán)形，干燥腔的外側(cè)壁為側(cè)壁。

作為本發(fā)明進(jìn)一步的方案：所述樣本吸收層包括設(shè)于其一端的凹槽，所述膠體金層一端夾設(shè)于所述樣本吸收墊的凹槽內(nèi)。

作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述膠體金層包括設(shè)于其一端的插槽，所述硝酸纖維素膜一端夾設(shè)于所述膠體金墊的插槽內(nèi)。

作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述吸水層包括設(shè)于其一端的插口，所述硝酸纖維素膜另一端夾設(shè)于所述吸水墊的插口內(nèi)。

作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述保護(hù)膜為空氣隔離防氧化聚乙烯保護(hù)膜。

作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述檢測盒為外部材料為透明材質(zhì)。

作為本發(fā)明再進(jìn)一步的方案：所述上蓋與側(cè)壁之間設(shè)有密封墊。

一種溴布特羅檢測方法，包含以下步驟，A、樣本檢測，取所需數(shù)量的微孔，置于微孔板上；向每個微孔中依次加入2mL樣品稀釋液和2mL待測樣品，混勻；向每孔中插入試紙條，等待3分鐘觀察結(jié)果，15分鐘后結(jié)果無效；B、結(jié)果判斷：陰性：檢測線和質(zhì)控線均顯色，且無論顯色深淺都判斷為陰性，表示樣品中溴布特羅濃度低于200ppb或不含溴布特羅殘留；陽性：質(zhì)控線顯色，同時質(zhì)控線顯色而檢測線不顯色，說明樣品的溴布特羅的殘留超過200ppb，但不高于400ppb；當(dāng)質(zhì)控線顯色，而兩條檢測線均不顯色時，說明樣品中的溴布特羅含量超過400ppb；無效：質(zhì)控線未顯色，無論檢測線有無顯色，均表明不正確的操作過程或檢測條已失效。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：本發(fā)明通過在硝酸纖維素膜的一側(cè)表面增設(shè)保護(hù)膜，使得硝酸纖維素膜可有效避免空氣環(huán)境因素對硝酸纖維素膜上檢測線的顯色影響，從而使得顯色更穩(wěn)定，效果更佳，方便準(zhǔn)確定性判定檢測結(jié)果；并使得鹽酸克倫特羅檢測試劑卡還能應(yīng)用于定量檢測，定量判定數(shù)據(jù)更真實可靠，同時設(shè)有具有干燥腔的檢測盒，橫截面為環(huán)形的干燥腔解決了檢測卡打開后放置一會會影響檢測結(jié)果的技術(shù)問題，使檢測卡免收空氣中水分、空氣酸堿度的影響。

具體實施方式

下面結(jié)合具體實施方式對本專利的技術(shù)方案作進(jìn)一步詳細(xì)地說明。

一種溴布特羅檢測方法及其試劑盒，包含測試紙和盒體，所述測試紙包括底板、樣本吸收層、膠體金層、保護(hù)層、硝酸纖維素膜和吸水層，所述底板設(shè)置了最下部，底板上面最左邊設(shè)有樣本吸收層，樣本吸收層的右側(cè)設(shè)有膠體金墊，膠體金墊的右側(cè)設(shè)有硝酸纖維素膜，硝酸纖維素膜的右側(cè)設(shè)有吸水層，所述盒體包括上蓋、側(cè)壁和底座，測試紙插在底座的中間，所述保護(hù)膜設(shè)于所述硝酸纖維素膜的一側(cè)表面，所述膠體金墊包被有抗鹽酸溴布特羅抗體，所述硝酸纖維素膜設(shè)有檢測線和質(zhì)控線，所述檢測線包被有鹽酸溴布特羅蛋白質(zhì)偶聯(lián)物并靠近所述膠體金墊設(shè)置，所述質(zhì)控線包被有羊或兔抗鼠抗體并靠近所述吸水墊。

底座上設(shè)有溫度計探頭，上蓋內(nèi)側(cè)設(shè)有濕度計，側(cè)壁外側(cè)設(shè)有顯示溫度和濕度的顯示器，檢測盒設(shè)有干燥腔，干燥腔橫截面為環(huán)形，干燥腔的外側(cè)壁為側(cè)壁。樣本吸收層包括設(shè)于其一端的凹槽，所述膠體金層一端夾設(shè)于所述樣本吸收墊的凹槽內(nèi)。膠體金層包括設(shè)于其一端的插槽，所述硝酸纖維素膜一端夾設(shè)于所述膠體金墊的插槽內(nèi)。吸水層包括設(shè)于其一端的插口，所述硝酸纖維素膜另一端夾設(shè)于所述吸水墊的插口內(nèi)。保護(hù)膜為空氣隔離防氧化聚乙烯保護(hù)膜。檢測盒為外部材料為透明材質(zhì)。上蓋與側(cè)壁之間設(shè)有密封墊。

本發(fā)明的工作原理是：檢測方法包含以下步驟，A、樣本檢測，取所需數(shù)量的微孔，置于微孔板上；向每個微孔中依次加入2mL樣品稀釋液和2mL待測樣品，混勻；向每孔中插入試紙條，等待3分鐘觀察結(jié)果，15分鐘后結(jié)果無效；B、結(jié)果判斷：陰性：檢測線和質(zhì)控線均顯色，且無論顯色深淺都判斷為陰性，表示樣品中溴布特羅濃度低于200ppb或不含溴布特羅殘留；陽性：質(zhì)控線顯色，同時質(zhì)控線顯色而檢測線不顯色，說明樣品的溴布特羅的殘留超過200ppb，但不高于400ppb；當(dāng)質(zhì)控線顯色，而兩條檢測線均不顯色時，說明樣品中的溴布特羅含量超過400ppb；無效：質(zhì)控線未顯色，無論檢測線有無顯色，均表明不正確的操作過程或檢測條已失效。

對于本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，顯然本發(fā)明不限于上述示范性實施例的細(xì)節(jié)，而且在不背離本發(fā)明的精神或基本特征的情況下，能夠以其他的具體形式實現(xiàn)本發(fā)明。因此，無論從哪一點來看，均應(yīng)將實施例看作是示范性的，而且是非限制性的，本發(fā)明的范圍由所附權(quán)利要求而不是上述說明限定，因此旨在將落在權(quán)利要求的等同要件的含義和范圍內(nèi)的所有變化囊括在本發(fā)明內(nèi)。

此外，應(yīng)當(dāng)理解，雖然本說明書按照實施方式加以描述，但并非每個實施方式僅包含一個獨立的技術(shù)方案，說明書的這種敘述方式僅僅是為清楚起見，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)將說明書作為一個整體，各實施例中的技術(shù)方案也可以經(jīng)適當(dāng)組合，形成本領(lǐng)域技術(shù)人員可以理解的其他實施方式。