1.一種利格列汀異構(gòu)體的檢測(cè)方法,其中所述利格列汀包括8-[(3R)-3-氨基-1-哌啶基]-7-(2-丁炔-1-基)-3,7-二氫-3-甲基-1-[(4-甲基-2喹唑啉基)甲基]-1H-嘌呤-2,6-二酮,該方法是采用高效液相色譜法進(jìn)行的,其特征在于,包括下述步驟:
(1)配制利格列汀樣品溶液,所述利格列汀樣品溶液包括供試品溶液,和對(duì)照品溶液;
(2)將步驟(1)所得樣品溶液注入高效液相色譜儀,采用流動(dòng)相作為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫,并記錄色譜圖;
其中,所述供試品溶液的制備方法包括下述步驟:精密稱取利格列汀樣品;
加稀釋液溶解并稀釋至利格列汀樣品的濃度為0.1mg/ml,得到供試品溶液;
所述高效液相色譜法的色譜柱固定相用直鏈淀粉-三(3,5-二甲苯基氨基甲酸酯)為填充劑;
流動(dòng)相:正己烷-無(wú)水乙醇-甲醇-二乙胺(80∶30∶4:0.1)。
2.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述高效液相色譜法的洗脫順序如下:
0-40 分鐘時(shí)流動(dòng)相為: 100 體積%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述流動(dòng)相的流速為0.9ml/min,優(yōu)選流動(dòng)相的流速為0.9ml/min。
4.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為25 ~ 40℃,檢測(cè)波長(zhǎng)為225nm。
5.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述利格列汀樣品溶液還包括對(duì)照品溶液;取利格列汀與利格列汀異構(gòu)體各適量,置量瓶中,用無(wú)水乙醇溶解定量稀釋制成每1ml各約含0.1mg的溶液,即得對(duì)照品溶液;所述對(duì)照品溶液的濃度為0.1mg/ml。
6.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述利格列汀樣品供試品溶液的濃度為0.1mg/ml。
7.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,在高效液相色譜法檢測(cè)步驟(2)中,首先將樣品對(duì)照溶液注入液相色譜儀,調(diào)節(jié)檢測(cè)器靈敏度,使主成分色譜峰的峰高為記錄儀滿量程的80% ;再將供試品溶液和對(duì)照品溶液分別注入液相色譜儀,采用流動(dòng)相進(jìn)行等度洗脫,并記錄色譜圖;優(yōu)選地,注入液相色譜儀中樣品溶液的量均為10μl。
8.根據(jù)權(quán)利要求1 所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述高效液相色譜法的色譜柱柱溫為30℃ 。