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血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒及其制備方法與流程

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技術(shù)特征:

1.一種血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,包括:血清透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白包被的羧基化的磁微粒和透明質(zhì)酸標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述血清透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白包被的羧基化的磁微粒中,所述血清透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白與所述羧基化的磁微粒的比例為1:25~35。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述透明質(zhì)酸標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物中,所述血清透明質(zhì)酸與所述化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物的比例為50:1~10。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述羧基化的磁微粒的粒徑為0.05μm~1μm。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物為魯米諾、異魯米諾、三聯(lián)吡啶釕或吖啶酯。

6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,還包括化學(xué)發(fā)光底物液,所述化學(xué)發(fā)光底物液包括A液和B液。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述A液為H2O2溶液,所述B液為NaOH溶液。

8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,包括血清透明質(zhì)酸定標(biāo)品。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒,其特征在于,所述血清透明質(zhì)酸定標(biāo)品為濃度分別為0pg/mL、50pg/mL、200pg/mL、500pg/mL、1000pg/mL和1600pg/mL的血清透明質(zhì)酸的溶液。

10.一種根據(jù)權(quán)利要求1~9中任一項(xiàng)所述的血清透明質(zhì)酸化學(xué)發(fā)光免疫檢測(cè)試劑盒的制備方法,其特征在于,包括如下步驟:

取羧基化的磁微粒的懸浮液,磁分離去上清后用MES緩沖液重懸,接著加入EDC水溶液,活化羧基化的磁微粒的表面羧基,接著加入透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白,室溫下混懸2h~10h,磁分離去除上清后用Tris緩沖液重懸,得到透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白包被的羧基化的磁微粒;以及

取透明質(zhì)酸,加入碳酸鹽緩沖液后混勻,然后加入化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物后混勻,室溫下避光反應(yīng)1h~2h后除雜,得到透明質(zhì)酸標(biāo)記的化學(xué)發(fā)光標(biāo)記物。

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