本發(fā)明涉及一種中藥復方制劑的檢測方法，特別涉及一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，屬于醫(yī)藥
技術領域：
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背景技術：
：小兒解感片收載于中國藥典2015年版一部。具有清熱解表，利咽止咳。用于感冒發(fā)燒，頭痛鼻塞，咳嗽噴嚏，咽喉腫痛。小兒解感片是由如下重量配比的原料制成的：大青葉830克、柴胡415克、黃芩415克、荊芥415克、桔梗250克、甘草165克。小兒解感顆粒未收載于任何藥典，配方同小兒解感片，小兒解感顆粒由于效果良好，經(jīng)臨床驗證，療效顯著，在臨床上備受患者青睞。目前小兒解感顆粒質(zhì)量標準收載了大青葉中靛玉紅成分、黃芩中靛玉紅成分、柴胡、桔梗和甘草的鑒別試驗；含量測定項下僅收載了靛玉紅的含量測定方法。中國藥典2015年版小兒解感片除收載上述檢測方法及限度外，增加了甘草中甘草酸的含量測定。中國專利文獻CN102114075A一種治療小兒感冒系列中藥制劑及其制備工藝和質(zhì)控方法，公開了大青葉、柴胡、黃芩、桔梗、甘草的鑒別方法，及靛玉紅含量測定方法。除上述外，現(xiàn)有技術中未發(fā)現(xiàn)對于小兒解感制劑的其他質(zhì)量檢測方法。因此，造成小兒解感制劑產(chǎn)品質(zhì)量檢測不精準，質(zhì)量標準有待提高。中國專利文件CN101732392A一種中藥大青葉的質(zhì)量檢測方法，提供了一種中藥大青葉的質(zhì)量檢測方法，經(jīng)水提取，乙醇處理，乙酸乙酯和水飽和正丁醇依次萃取、濃縮、定容等樣品前處理手段將中藥大青葉處理后，通過電噴霧質(zhì)譜得到中藥大青葉的指紋圖譜；利用高效液相色譜法測定中藥大青葉中核苷和嘌呤類成分的含量；利用紫外—可見分光光度法測定中藥大青葉中總黃酮的含量，綜合其指紋圖譜及含量測定數(shù)據(jù)，可以對中藥大青葉的質(zhì)量進行評價。該方法操作繁瑣，且針對單味大青葉藥材進行測定，小兒解感制劑中含有6種藥味，且配方量較大，此專利中的處理方法不能完全排除其他藥味中各成分對測定的干擾。中國專利文件CN101904890A桔梗活性部位的制備、應用及質(zhì)量控制檢測方法，提供了以桔梗皂苷D、遠志皂苷D2、桔梗皂苷D3、去芹菜糖桔梗皂苷D3、桔梗皂苷D2、去芹菜糖桔梗皂苷D2、去芹菜糖桔梗皂苷E、桔梗皂苷E對桔梗質(zhì)量控制的檢測方法。該方法采用蒸發(fā)光散射檢測器測定，其普及性較紫外檢測器差，此檢測方法重現(xiàn)性較差。該方法針對桔梗單味藥材含量測定進行研究，小兒解感制劑中含有6種藥材，且各味配方比例相當，對桔梗藥材含量測定有較大干擾。綜上所述，現(xiàn)有技術中無能夠準確測定小兒解感制劑大青葉、桔梗成分含量的方法，而對其他藥材中的大青葉、桔梗的含量測定方法也并不適用于小兒解感制劑。技術實現(xiàn)要素：針對現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的是提供一種中藥小兒解感制劑的檢測方法。發(fā)明概述本發(fā)明使用高效液相色譜法對一種中藥小兒解感制劑中的大青葉、桔梗進行了含量測定，該方法操作簡便，分析數(shù)據(jù)準確，確保產(chǎn)品質(zhì)量安全、穩(wěn)定、可控。術語說明：小兒解感片：收載于中國藥典2015年版一部。由如下重量配比的原料制成的：大青葉830克、柴胡415克、黃芩415克、荊芥415克、桔梗250克、甘草165克。小兒解感制劑：包括小兒解感片及用小兒解感片原料藥配方制備的任何藥學上可接受的制劑。本發(fā)明的技術方案如下：一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，包括如下含量測定方法中的一種或兩種：(1)大青葉的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比50-60:15-25:20-30甲醇-乙腈-水為流動相，檢測波長為290-300nm；對照品溶液的制備：取靛玉紅對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含1-2μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感制劑，研細，取混勻粉末2-3g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加三氯甲烷50-60mL，浸泡12-15小時，80-90℃超聲處理1-1.5小時，取濾液，濾渣在加入三氯甲烷50-60mL，80-90℃超聲處理1-1.5小時，合并濾液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至量瓶中，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：取上述對照品溶液、供試品溶液各5μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。(2)桔梗的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以質(zhì)量濃度0.1％三氟乙酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：0→10分鐘，流動相A的體積比例為73％→70％，流動相B的體積比例為27％→30％；10→20分鐘，流動相A的體積比例為70→62％，流動相B的體積比例為30％→38％，保持5分鐘；25→30分鐘，流動相A的體積比例為62％→20％，流動相B的體積比例為38％→80％；30→31分鐘，流動相A的體積比例為20％→73％，流動相B的體積比例為80％→27％，保持9分鐘；檢測波長為210-220nm；對照品溶液的制備：取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含0.2-0.3mg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感制劑，研細，取混勻粉末12g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入體積濃度70-90％甲醇50mL，浸泡3-4小時，密塞，45-50℃超聲30-40分鐘，濾過，濾渣置具塞錐形瓶中，精密加入體積濃度70-90％甲醇50mL，密塞，45-50℃超聲30-40分鐘，濾過，合并濾液，于70～90℃水浴，蒸干，用甲醇定容至10mL，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖，即得。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的(1)大青葉的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗中流動相為體積份數(shù)比55:20:25甲醇-乙腈-水。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的(1)大青葉的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗中流動相流速為1.0mL/min。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的(2)桔梗的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗中流動相流速為0.5mL/min。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的(1)大青葉的含量測定供試品溶液的制備中供試品先浸泡12小時，再超聲處理1小時，超聲溫度80℃。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的，所述的(2)桔梗的含量測定供試品溶液的制備中提取溶劑甲醇溶液的體積濃度為70％，提取溫度45℃，提取時間30min。根據(jù)本發(fā)明進一步優(yōu)選的，一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，包括如下含量測定方法中的一種或兩種：(1)大青葉的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比55:20:25甲醇-乙腈-水為流動相，檢測波長為290nm，流速1.0mL/min；對照品溶液的制備：取靛玉紅對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含1μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末2.2g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加三氯甲烷50mL，浸泡12小時，80℃超聲處理1小時，取濾液，濾渣再加入三氯甲烷50mL，80℃超聲處理1小時，合并濾液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。(2)桔梗的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積濃度0.1％三氟乙酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：0→10分鐘，流動相A的體積比例為73％→70％，流動相B的體積比例為27％→30％；10→20分鐘，流動相A的體積比例為70→62％，流動相B的體積比例為30％→38％，保持5分鐘；25→30分鐘，流動相A的體積比例為62％→20％，流動相B的體積比例為38％→80％；30→31分鐘，流動相A的體積比例為20％→73％，流動相B的體積比例為80％→27％，保持9分鐘；檢測波長為210nm，流速0.5mL/min。對照品溶液的制備：取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含0.24mg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末12g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入體積濃度70％甲醇50mL，浸泡3小時，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，濾渣置具塞錐形瓶中，精密加入體積濃度70％甲醇50mL，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，合并濾液，70～90℃水浴，蒸干，用甲醇定容至10mL，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。本發(fā)明的有益效果：本發(fā)明的檢測方法操作簡便、快速、檢測成本低、測定結(jié)果準確，重現(xiàn)性好、且能較全面的反映小兒解感制劑的配方組成。本發(fā)明可用于對小兒解感制劑進行含量測定。附圖說明圖1是靛玉紅對照品高效液相色譜圖；圖2是小兒解感顆粒中大青葉含量測定樣品高效液相色譜圖；圖3是小兒解感顆粒大青葉含量測定陰性對照高效液相色譜圖；圖4是大青葉中靛玉紅含量測定線性圖；圖5是桔梗皂苷D對照品高效液相色譜圖；圖6是小兒解感顆粒中桔梗含量測定樣品高效液相色譜圖；圖7是小兒解感顆粒桔梗含量測定陰性對照高效液相色譜圖；圖8是桔梗皂苷D含量測定線性圖；其中，圖1-圖3，圖5-圖7中，縱坐標為電壓，單位：微伏，橫坐標為時間，單位：分鐘；圖4、圖8中，縱坐標為峰面積，單位：mAu*s，橫坐標為濃度，單位：μg/mL。具體實施方式下面結(jié)合實驗例和實施例對本發(fā)明做進一步的說明，但不限于此。實驗例1：大青葉的含量測定1.儀器、試藥和供試樣品儀器：高效液相色譜儀：安捷倫1260，G1311C輸液泵，G1329B自動進樣系統(tǒng)，G1315D二極管陣列檢測器，WatersEmpower3工作站；METTLERTOLEDOXPE205電子天平。對照品：靛玉紅對照品(中國藥品生物制品檢定研究院)，批號：110717-200204。供試樣品：小兒解感顆粒(山東明仁福瑞達制藥股份有限公司)，批號：16105009、16105010、16105011。2.色譜條件照高效液相色譜法(中國藥典2015年版通則0512)測定。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比55:20:25甲醇-乙腈-水為流動相，檢測波長為290nm，流速1.0mL/min。3.對照品的制備：取靛玉紅對照品適量，精密稱定，置量瓶中，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含1μg的溶液，即得。(見圖1)4.供試品溶液制備：取小兒解感顆粒20袋，內(nèi)容物研細，取混勻粉末2.2g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加三氯甲烷50mL，浸泡12小時，80℃超聲處理1小時，取濾液，濾渣在加入三氯甲烷50mL，80℃超聲處理1小時，合并濾液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。(見圖2)5.提取方法選擇試驗表1提取方法選擇表方法浸泡超聲浸泡后超聲靛玉紅含量(μg/g)38.2640.2566.31結(jié)果表明：浸泡后再處理樣品有助于有效成分的提取。6.浸泡時間選擇實驗表2浸泡時間選擇表浸泡時間(h)101215靛玉紅含量(μg/g)62.1265.2368.22結(jié)果表明：浸泡后再處理樣品有助于有效成分的提取，通過上述實驗，選擇浸泡12小時后進行加熱超聲處理供試品。7.超聲溫度選擇實驗表3超聲溫度選擇表結(jié)果表明：超聲時溫度對靛玉紅提取有影響，通過上述實驗，選擇超聲溫度為80℃。8.提取時間選擇實驗表4提取時間選擇表結(jié)果表明：靛玉紅在60min與80min時，提取程度基本一致，說明靛玉紅在60min時已經(jīng)基本提取完畢，故選擇60min為提取時間。9.系統(tǒng)適用性試驗及陰性干擾試驗在上述色譜條件下，分別精密量取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μl，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品色譜圖中靛玉紅與其相鄰色譜峰的分離度大于1.5，且陰性對照無干擾。(見圖1～圖3)10.標準曲線的制備和線性關系考察精密量取靛玉紅對照品貯備溶液(119.2μg/mL)0.2mL、0.6mL、1mL、1.4mL、1.8mL，分別置50mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，搖勻，各精密進樣10μL，以峰面積(A)對對照品濃度(C)線性關系良好。(見圖4)表5標準曲線結(jié)果表序號濃度(μg/mL)峰面積(A)10.23841720020.71525241231.19208788441.668812156452.1456159960回歸方程：y＝74386x-864相關系數(shù)：R＝0.9998。11.精密度試驗分別精密量取靛玉紅對照品溶液10μL，注入液相色譜儀，各連續(xù)測定6次，記錄峰面積并計算相對標準偏差，RSD＝0.72％。結(jié)果表明，儀器精密度良好。表6精密度數(shù)據(jù)表12.穩(wěn)定性試驗供試品溶液制備完成后，精密吸取10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以后每隔2小時測定一次，考察8小時，計算峰面積的相對標準偏差，RSD＝0.89％。結(jié)果表明，供試品中靛玉紅在8小時內(nèi)溶液穩(wěn)定性良好。表7穩(wěn)定性數(shù)據(jù)表13.重復性試驗取本品，重復測定6次，計算樣品中靛玉紅的含量，RSD＝1.62％。結(jié)果表明，分析方法重復性良好。表8重復性數(shù)據(jù)表14.回收率試驗精密稱取同一批樣品6份，精密加入靛玉紅對照品，此功能定其含量，計算回收率，靛玉紅平均回收率為95.10％，RSD＝2.11％。表明該測定方法測定結(jié)果準確。表9回收率數(shù)據(jù)表15.樣品測定取小兒解感顆粒3批，測定并計算靛玉紅的含量，結(jié)果如下。表10含量數(shù)據(jù)表批號含量(mg/g)1610500967.221610501063.151610501162.92綜上：本發(fā)明含量測定的方法通過檢測小兒解感顆粒中主藥大青葉芩中靛玉紅的含量，從而控制制劑的質(zhì)量。本法比較了不同處理方法、不同提取時間、不同提取溫度等供試品處理方法，同時研究發(fā)現(xiàn)了以體積份數(shù)比55:20:25甲醇-乙腈-水為流動相的檢測方法。實驗例2：桔梗的含量測定1.儀器、試藥和供試樣品儀器：高效液相色譜儀：安捷倫1260，G1311C輸液泵，G1329B自動進樣系統(tǒng)，G1315D二極管陣列檢測器，WatersEmpower3工作站；METTLERTOLEDOXPE205電子天平。對照品：桔梗皂苷D對照品(中國藥品生物制品檢定研究院)批號：11851-201406。供試樣品：小兒解感顆粒(山東明仁福瑞達制藥股份有限公司)批號：16105009、16105010、16105011。2.色譜條件照高效液相色譜法(中國藥典2015年版通則0512)測定。以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積百分比0.1％三氟乙酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：0→10分鐘，流動相A的體積比例為73％→70％，流動相B的體積比例為27％→30％；10→20分鐘，流動相A的體積比例為70→62％，流動相B的體積比例為30％→38％，保持5分鐘；25→30分鐘，流動相A的體積比例為62％→20％，流動相B的體積比例為38％→80％；30→31分鐘，流動相A的體積比例為20％→73％，流動相B的體積比例為80％→27％，保持9分鐘；檢測波長為210nm，流速0.5mL/min。3.對照品的制備：取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，置量瓶中，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含0.24mg的溶液，即得。4.供試品溶液制備：取小兒解感顆粒適量，內(nèi)容物研細，取混勻粉末約12g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入70％(v/v)甲醇50mL，浸泡3小時，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，濾渣置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，合并濾液，水浴，蒸干，用甲醇定容至10mL，濾過，取續(xù)濾液，即得。5.提取方法選擇實驗表11提取方法選擇表結(jié)果表明：浸泡后超聲提取更加充分，故選擇浸泡后超聲為供試品的處理方法。6.浸泡時間的選擇實驗表12提取時間選擇表結(jié)果表明：浸泡3小時與4小時后處理供試品，測得桔梗皂苷D含量結(jié)果基本一致，故選擇處理前浸泡時間為3小時。7.提取溶劑選擇實驗表13提取溶劑選擇表結(jié)果表明：70％甲醇與90％甲醇提取效果基本一致，為了保證本品種桔梗皂苷能被充分提取，且考慮環(huán)保及成本，選擇70％甲醇為提取溶劑。8.提取時間選擇實驗表14提取時間選擇表結(jié)果表明：靛玉紅在20min、30min與40min時，提取程度基本一致，為保證桔梗皂苷D能夠充分提取，故選擇30min為提取時間。9.提取溫度選擇實驗表15提取溫度選擇表結(jié)果表明：靛玉紅在45℃與50℃超聲30分鐘時，提取程度基本一致，故選擇45℃為提取溫度。10.系統(tǒng)適用性試驗及陰性干擾試驗在上述色譜條件下，分別精密量取對照品溶液、供試品溶液及陰性對照溶液各10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖。結(jié)果表明，供試品色譜圖中桔梗皂苷D與其相鄰色譜峰的分離度大于1.5，且陰性對照無干擾。(見圖5～圖7)11.標準曲線的制備和線性關系考察精密量取桔梗皂苷D對照品貯備溶液(1.1020mg/mL)0.4mL、1.2mL、2mL、2.8mL、3.6mL，分別置10mL容量瓶中，用70％甲醇稀釋至刻度，搖勻，各精密進樣10μL，以峰面積(A)對對照品濃度(C)線性關系良好。(見圖8)表16標準曲線結(jié)果表回歸方程：y＝3E+06x+12067相關系數(shù)：R＝0.9995。12.精密度試驗分別精密量取桔梗皂苷D對照品溶液10μL，注入液相色譜儀，各連續(xù)測定6次，記錄峰面積并計算相對標準偏差，RSD＝0.69％。結(jié)果表明，儀器精密度良好。表17精密度數(shù)據(jù)表13.穩(wěn)定性試驗供試品溶液制備完成后，精密吸取10μL，注入液相色譜儀，記錄色譜峰面積，以后每隔2小時測定一次，考察8小時，計算峰面積的相對標準偏差，RSD＝1.49％。結(jié)果表明，供試品中桔梗皂苷D在8小時內(nèi)溶液穩(wěn)定性良好。表18穩(wěn)定性數(shù)據(jù)表14.重復性試驗取本品，重復測定6次，計算樣品中桔梗皂苷D的含量，RSD＝2.36％。結(jié)果表明，分析方法重復性良好。表19重復性數(shù)據(jù)表15.回收率試驗精密稱取同一批樣品6份，精密加入桔梗皂苷D對照品，此功能定其含量，計算回收率，桔梗皂苷D平均回收率為95.23％，RSD＝1.62％。表明該測定方法測定結(jié)果準確。表20回收率數(shù)據(jù)表16.樣品測定取小兒解感顆粒3批，測定并計算桔梗皂苷D的含量，結(jié)果如下。表21含量數(shù)據(jù)表批號含量(μg/g)16105009106.861610501098.2216105011102.58綜上：本發(fā)明含量測定的方法通過控制小兒解感顆粒中主藥桔梗中桔梗皂苷D的含量，從而控制制劑的質(zhì)量。本法比較了不同溶劑、不同提取時間、不同提取方法等供試品處理方法，同時研究發(fā)現(xiàn)了以0.1％三氟乙酸為流動相A，以乙腈為流動相B，進行梯度洗脫，用紫外檢測器測定桔梗中桔梗皂苷D的檢測方法。以下實施例1-3中所檢測的小兒解感顆粒購自山東明仁福瑞達制藥股份有限公司。實施例1：一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，包括如下含量測定方法：(1)大青葉的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比55:20:25甲醇-乙腈-水為流動相，檢測波長為290nm，流速1.0mL/min；對照品溶液的制備：取靛玉紅對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含1μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末2.2g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加三氯甲烷50mL，浸泡12小時，80℃超聲處理1小時，取濾液，濾渣在加入三氯甲烷50mL，90℃超聲處理1小時，合并濾液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取上述對照品溶液與供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。(2)桔梗的含量測定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以質(zhì)量濃度0.1％三氟乙酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：0→10分鐘，流動相A的體積比例為73％→70％，流動相B的體積比例為27％→30％；10→20分鐘，流動相A的體積比例為70→62％，流動相B的體積比例為30％→38％，保持5分鐘；25→30分鐘，流動相A的體積比例為62％→20％，流動相B的體積比例為38％→80％；30→31分鐘，流動相A的體積比例為20％→73％，流動相B的體積比例為80％→27％，保持9分鐘；檢測波長為210nm，流速0.5mL/min。對照品溶液的制備：取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含0.24mg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末12g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入70％(v/v)甲醇50mL，浸泡3小時，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，濾渣置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，合并濾液，70～90℃水浴，蒸干，用甲醇定容至10mL，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。實施例2：一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，包括如下含量測定方法：大青葉的含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積份數(shù)比50:20:30甲醇-乙腈-水為流動相，檢測波長為290nm，流速1.0mL/min；對照品溶液的制備：取靛玉紅對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含1μg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末2.2g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，加三氯甲烷50mL，浸泡12小時，80℃超聲處理1小時，取濾液，濾渣在加入三氯甲烷50mL，90℃超聲處理1小時，合并濾液，蒸干，用甲醇溶解并轉(zhuǎn)移至100mL量瓶中，用甲醇定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。實施例3：一種中藥小兒解感制劑的檢測方法，包括如下含量測定方法：桔梗的含量測定：色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗：照中國藥典2015年版四部0512高效液相色譜法測定：以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以體積濃度0.1％三氟乙酸溶液為流動相A，以乙腈為流動相B，按如下條件進行梯度洗脫：0→10分鐘，流動相A的體積比例為73％→70％，流動相B的體積比例為27％→30％；10→20分鐘，流動相A的體積比例為70→62％，流動相B的體積比例為30％→38％，保持5分鐘；25→30分鐘，流動相A的體積比例為62％→20％，流動相B的體積比例為38％→80％；30→31分鐘，流動相A的體積比例為20％→73％，流動相B的體積比例為80％→27％，保持9分鐘；檢測波長為210nm，流速0.5mL/min。對照品溶液的制備：取桔梗皂苷D對照品適量，精密稱定，用甲醇溶解并稀釋制成每1mL含0.24mg的溶液，即得；供試品溶液的制備：取小兒解感顆粒，內(nèi)容物研細，取混勻粉末12g，精密稱定，置具塞的錐形瓶中，精密加入70％(v/v)甲醇50mL，浸泡3小時，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，濾渣置具塞錐形瓶中，精密加入70％甲醇50mL，密塞，45℃超聲30分鐘，濾過，合并濾液，70～90℃水浴，蒸干，用甲醇定容至10mL，濾過，取續(xù)濾液，即得；測定法：精密量取對照品溶液及供試品溶液各10μL，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。當前第1頁1 2 3