TP53基因編碼一種在癌癥發(fā)生期間的保護(hù)中起關(guān)鍵作用的腫瘤抑制蛋白。P53在多細(xì)胞生物體中是至關(guān)重要的，其中它調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，并因此作為參與預(yù)防癌癥的腫瘤抑制物起作用。而且，它是調(diào)節(jié)參與細(xì)胞周期控制，諸如凋亡，DNA修復(fù)和衰老的多種基因的轉(zhuǎn)錄因子。在非應(yīng)激條件下，p53蛋白的水平經(jīng)由負(fù)反饋環(huán)受到MDM2(MurineDoubleMinute2)控制，其中MDM2轉(zhuǎn)錄由p53驅(qū)動。MDM2蛋白結(jié)合TP53蛋白并阻斷其反式激活域。MDM2還能作為p53泛素連接酶發(fā)揮功能，其標(biāo)記p53用于泛素依賴性降解。在過表達(dá)MDM2的細(xì)胞中，P53滅活，導(dǎo)致無效的生長停滯和凋亡。阻斷P53--MDM2相互作用可能恢復(fù)P53功能，而且可能是癌癥治療的一種新穎辦法。用MDM2拮抗劑處理腫瘤細(xì)胞應(yīng)能夠使p53介導(dǎo)其下游功能，包括激活基因轉(zhuǎn)錄和誘導(dǎo)細(xì)胞周期停滯和凋亡。TP53突變在急性骨髓性白血病(AML)中是罕見的，而且通常不認(rèn)為在這些惡性腫瘤的發(fā)生中是最重要的。然而，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)MDM2在AML中頻繁過表達(dá)，而且能經(jīng)由消除p53功能增強(qiáng)致瘤潛力和對凋亡的抗性。已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，具有野生型p53的AML細(xì)胞系和16份原代aAML樣品通過誘導(dǎo)p53依賴性凋亡響應(yīng)MDM2拮抗劑(抑制劑)。這些發(fā)現(xiàn)支持靶向p53-MDM2相互作用作為AML的治療策略的原理。基于所提出的藥物作用機(jī)制，功能性p53蛋白和相關(guān)途徑效應(yīng)分子的存在對于這類藥物是有效的是需要的。并非所有患者都會具有功能性p53蛋白和相關(guān)途徑效應(yīng)分子。為了更好地確定患者是否能受益于療法，需要發(fā)現(xiàn)預(yù)測性分子測試用于鑒定最有可能響應(yīng)療法的患者。用于評估對MDM2拮抗劑的潛在響應(yīng)的一種辦法是評估TP53基因是否突變。然而，這因為在癌癥中能找到TP53的大量突變的事實變得復(fù)雜。并非所有這些突變都會干擾p53蛋白的活性，進(jìn)一步使TP53突變測試的解讀變得復(fù)雜。另外，在野生型TP53細(xì)胞系和患者中存在對MDM2拮抗劑的一系列響應(yīng)。還有，已經(jīng)觀察到，雖然許多攜帶p53突變的AML患者對MDM2拮抗劑療法不響應(yīng)，但是仍然存在對此類療法展現(xiàn)持久響應(yīng)的具有某些p53突變的患者。因此，從易于解讀的診斷工具預(yù)測對MDM2拮抗劑的響應(yīng)性的能力是MDM2拮抗劑的臨床開發(fā)中未滿足的需求?，F(xiàn)在已經(jīng)發(fā)現(xiàn)，基于某些MDM2蛋白表達(dá)干細(xì)胞的量的生物標(biāo)記物可以提供選擇最有可能響應(yīng)MDM2拮抗劑療法的患者的手段。此方法還具有與其它生物標(biāo)志物評估，包括特別是p53突變狀態(tài)，年齡和ECOG性能狀態(tài)組合，產(chǎn)生在區(qū)分臨床終點方面具有更大靈敏度和特異性的算法的潛力。發(fā)明概述在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于確定癌癥患者對用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的方法，其特征在于在治療之前自該患者獲得的樣品中檢測到的％MDM2陽性細(xì)胞越高，所述患者達(dá)到有益臨床終點的可能性越高，其中MDM2陽性(或MDM2表達(dá)性)細(xì)胞選自由CD45dim母細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+干細(xì)胞，或其組合組成的組。在另一個方面，本發(fā)明涉及一種用于預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)的方法，其中該患者的療法包含用作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物進(jìn)行的治療，所述方法包含下述步驟：a)測量自癌癥患者預(yù)獲得的樣品中CD45dim母細(xì)胞和/或CD117+(c-kit)和/或CD34+干細(xì)胞的水平以獲得代表此水平的一個或多個值；或b)測量自癌癥患者預(yù)獲得的樣品中MDM2表達(dá)性CD45dim細(xì)胞和/或CD117+(c-kit)和/或CD34+干細(xì)胞的％；并c)將來自步驟a)和/或b)的一個或多個值與一個或一套標(biāo)準(zhǔn)值比較。作為MDM2-p53相互作用的抑制劑(MDM2抑制劑，MDM2拮抗劑)起作用的化合物是本領(lǐng)域已知的。MDM2抑制劑和用于生成它們的方法披露于例如美國專利8,354,444B2，以及WO2007/063013，WO2010/031713和WO2011/098398，將它們完整收入本文。另外的MDM2抑制劑披露于WO2013/135648，將它完整收入本文。美國專利8,354,444B2，以及WO2010/031713，WO2011/098398披露了例如式I，II和IIa的化合物，WO2013/135648披露了例如式III的化合物，在一個方面，本發(fā)明涉及一種用于預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)的方法，其中該患者的療法包含用如美國專利8,354,444B2，或WO2007/063013，WO2010/031713，WO2011/098398和WO2013/135648的實施例中具體披露的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物(“MDM2抑制劑”)進(jìn)行的治療。在又一個方面，本發(fā)明涉及一種在有需要的患者中治療贅生性疾病，諸如癌癥的方法，其包含測量自患者獲得的樣品中MDM2陽性細(xì)胞類型的水平以檢測代表此水平的一個或多個值，或表達(dá)可檢測MDM2表達(dá)物的此類細(xì)胞的％，并當(dāng)所述值在參照水平以上時用包含如本文中進(jìn)一步定義的通式I，II，IIa或III的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物的藥物治療患者，且其中所述細(xì)胞的類型為一種或多種選自由CD45dim細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+干細(xì)胞組成的組的細(xì)胞類型。在仍有另一個方面，本發(fā)明涉及一種用于預(yù)測癌癥患者對用包含如本文中定義的MDM2抑制劑的藥物進(jìn)行的治療的響應(yīng)的試劑盒，其包含在自所述患者獲得的樣品中測量一種或多種選自CD45dim(母)細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+干細(xì)胞的細(xì)胞類型的水平和任選的還測量p53基因突變狀態(tài)必需的試劑。該試劑盒還包含比較模塊，其包含與該樣品中的響應(yīng)水平為比較的一個或一套標(biāo)準(zhǔn)值，連同如何進(jìn)行此類比較的說明書。該試劑盒還可包含一種或多種其它治療活性劑，用于與如本文中定義的MDM2抑制劑組合。更優(yōu)選地，該試劑盒包含MDM2抑制劑，優(yōu)選如美國專利8,354,444B2，或WO2007/063013，WO2010/031713，WO2011/098398和WO2013/135648中具體公開的MDM2抑制劑；或依照式IIa或III的化合物；或如本文中公開的具體MDM2抑制劑。照此，本發(fā)明涉及一種用于鑒定對MDM2拮抗劑療法的敏感性的方法。而且，本發(fā)明涉及一種通過在治療之前(在基線時)對患者測試血液中MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的量用MDM2拮抗劑治療癌癥患者的方法，其中所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞選自CD45dim(母)細(xì)胞和/或CD117+(c-kit)和/或CD34+干細(xì)胞。本發(fā)明還涉及CD45dim細(xì)胞，CD117+(c-kit)和/或CD34+干細(xì)胞作為預(yù)測機(jī)制用于確定罹患癌癥，更特別的是急性骨髓性白血病(AML)的患者對用如本文中定義的MDM2抑制劑，或所述MDM2抑制劑連同阿糖胞苷(Ara-C)和/或蒽環(huán)類抗生素的組合進(jìn)行的治療的響應(yīng)的用途。本發(fā)明還涉及用于鑒定對MDM2拮抗劑療法的敏感性的任何上述方法，其進(jìn)一步包含檢測至少一種選自由BAX，RPS27L，EDA2R，XPC，DDB2，F(xiàn)DXR，MDM2，CDKN1A，TRIAP1，BBC3，CCNG1，TNFRSF10B，或CDKN2A組成的組的基因的水平并將該值與依照任何上述方法檢測的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的所述相對量組合以獲得組合得分“S”，并使用該組合得分“S”作為生物標(biāo)志物用于預(yù)測該患者對化合物的響應(yīng)，其中該化合物為MDM2-p53相互作用的抑制劑。附圖簡述圖1：活細(xì)胞，CD45dim/SSC低母細(xì)胞和CD34+母細(xì)胞通過電子門控的鑒定。圖2：CD45dim母細(xì)胞群中和CD45dim/CD34陽性母細(xì)胞群中Mdm2陽性細(xì)胞的鑒定。使用同種型對照(上部兩幅點圖)來繪制Mdm2陽性的邊界。圖3：CD45dim(母)細(xì)胞中的MDM2蛋白表達(dá)對最佳總體響應(yīng)；(a)包括突變型p53；和(b)沒有突變型p53。圖4a：AML臨床試驗(標(biāo)識符：NP29679，部分1和2)中患者的組合得分“S”與響應(yīng)(CR，非CR)的關(guān)聯(lián)，其中“S”是使用實施例2的4基因簽名和MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞的相對量(SMDM2-流式)計算的，包括p53突變型患者：4ai)S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式，4aii)S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)，4aiii)S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)；且其中“S”是使用實施例2的4基因簽名和MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞的相對量(SMDM2-流式)計算的，只包括p53野生型(wt)患者：4aiv)S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式，4av)S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)，4avi)S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。圖4b：AML臨床試驗(標(biāo)識符：NP29679，部分1和2)中患者的組合得分“S”與響應(yīng)(CR，非CR)的關(guān)聯(lián)，其中“S”是使用實施例2的3基因簽名和MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞的相對量(SMDM2-流式)計算的，包括p53突變型患者：4bi)S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式，4bii)S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)，4biii)S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)；且其中“S”是使用實施例2的3基因簽名和MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞的相對量(SMDM2-流式)計算的，只包括p53野生型(wt)患者：4biv)S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式，4bv)S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)，4bvi)S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。圖5：包括p53野生型(wt)和p53突變型患者的AML臨床試驗(標(biāo)識符：NP29679，部分1和2)中患者的基于mRNA表達(dá)水平關(guān)于單獨的MDM2(i)，BBC3(ii)，XPC(iii)或CDKN2A(iv)每一項的得分與響應(yīng)(CR，非CR)的關(guān)聯(lián)。發(fā)明詳述在一個實施方案中，供依照本發(fā)明的方法中使用的抑制MDM2-p53相互作用的化合物(也稱作“MDM2抑制劑”或“MDM2拮抗劑”)為任何MDM2抑制劑，優(yōu)選小分子MDM2抑制劑。在另一個實施方案中，所述MDM2抑制劑為如美國專利8,354,444B2中，或WO2007/063013，WO2010/031713，WO2011/098398和WO2013/135648中具體公開的化合物。在一個實施方案中，供依照本發(fā)明的方法中使用的MDM2抑制劑為式I的化合物，其中X選自由H，F(xiàn)，Cl，Br，I，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，乙烯基和甲氧基組成的組，Y為一至四個獨立選自由H，F(xiàn)，Cl，Br，I，CN，OH，硝基，低級烷基，環(huán)烷基，低級烷氧基，低級烯基，環(huán)烯基，低級炔基，芳基，雜芳基，雜環(huán)，COOR’，OCOR’，CONR’R”，NR’COR”，NR”SO2R’，SO2NR’R”和NR’R”組成的組的基團(tuán)，其中R’和R”獨立選自H，低級烷基，取代的低級烷基，低級環(huán)烷基，取代的低級環(huán)烷基，低級烯基，取代的低級烯基，低級環(huán)烯基，取代的低級環(huán)烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，或取代的雜環(huán)。且在R’和R”可以獨立連接以形成選自取代的或未取代的環(huán)烷基，取代的或未取代的環(huán)烯基，取代的或未取代的雜芳基或取代的或未取代的雜環(huán)的環(huán)狀結(jié)構(gòu)的情況中，R1和R2之一選自由低級烷基，取代的低級烷基，低級烯基，取代的低級烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基組成的組且另一為氫或低級烷基，R3為H或低級烷基，R4和R5之一選自由低級烷基，取代的低級烷基，低級烯基，取代的低級烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基組成的組且另一為氫，R6和R7選自由(CH2)n-R’，(CH2)n-NR’R”，(CH2)n-NR’COR”，(CH2)n-NR’SO2R”，(CH2)n-COOH，(CH2)n-COOR’，(CH2)n-CONR’R”，(CH2)n-OR’，(CH2)n-SR’，(CH2)n-SOR’，(CH2)n-SO2R’，(CH2)n-COR’，(CH2)n-SO3H，(CH2)n-SONR’R”，(CH2)n-SO2NR’R”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-R’，(CH2CH2O)m-(CH2)n-OH，(CH2CH2O)m-(CH2)n-OR’，(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’R”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’COR”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’SO2R”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-COOH，(CH2CH2O)m-(CH2)n-COOR’，(CH2CH2O)m-(CH2)n-CONR’R”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-SO2R’，(CH2CH2O)m-(CH2)n-COR’，(CH2CH2O)m-(CH2)n-SONR’R”，(CH2CH2O)m-(CH2)n-SO2NR’R”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-R’，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-OH，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-OR’，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’R”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’COR”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-NR’SO2R”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-COOH，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-COOR’，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-CONR’R”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-SO2R’，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-COR’，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-SONR’R”，(CH2)p-(CH2CH2O)m-(CH2)n-SO2NR’R”，-COR’，-SOR’和SO2R’組成的組，其中R’和R”如上文所述，m，n和p獨立為0至6，及其藥學(xué)可接受鹽和酯。在這個實施方案內(nèi)，優(yōu)選的式I的化合物可以具有如式II所示立體化學(xué)結(jié)構(gòu)：在一個實施方案中，供依照本發(fā)明的方法中使用的MDM2抑制劑為式IIa的化合物，其中R6為-(CH2)n-R’，且R’為環(huán)己基，或5至10元，單或雙環(huán)芳香族烴，其中1或2個碳原子可以用N，S或O替換，且其中任何上述環(huán)己基或芳香族烴可以用獨立選自低級烷基，低級烯基，低級炔基，二氧代低級亞烷基(形成例如苯并二氧基基團(tuán))，鹵素，羥基，CN，CF3，NH2，N(H，低級烷基)，N(低級烷基)2，氨基羰基，羧基，NO2，低級烷氧基，硫代-低級烷氧基，低級烷基磺酰基，氨基磺?；图壨榛驶?，低級烷基羰基氧基，低級烷氧基羰基，低級烷基-羰基-NH，氟-低級烷基，氟-低級烷氧基，低級烷氧基-羰基-低級烷氧基，羧基-低級烷氧基，氨基甲?；?低級烷氧基，羥基-低級烷氧基，NH2-低級烷氧基，N(H，低級烷基)-低級烷氧基，N(低級烷基)2-低級烷氧基，低級烷基-1-環(huán)氧乙烷基-低級烷氧基-低級烷基，2-氧代-吡咯烷-1-基，(1,1-二氧代)-2-異噻唑烷，3-低級烷基亞磺?；?，取代的或未取代的雜環(huán)狀環(huán)，取代的或未取代的芳基環(huán)，取代的或未取代的雜芳基環(huán)，三氟-低級烷基磺?；被?芳基，低級烷基磺酰基氨基羰基，低級烷基磺酰基氨基羰基-芳基，羥基氨基甲酰基-苯基，芐基氧基-低級烷氧基，單或二-低級烷基取代的氨基-磺?；偷图壨榛?其可以任選用鹵素，羥基，NH2，N(H，低級烷基)或N(低級烷基)2取代)的基團(tuán)取代一次或兩次；且n為0或1。在這個實施方案內(nèi)，優(yōu)選式IIa的化合物，其中R6為-(CH2)n-R’，且R’為苯基，吡啶基，吡嗪基或嘧啶基，每個可以是未取代的或用獨立選自鹵素，C1-6烷氧基，C1-6烷基，羥基羰基，羧基，羧基C1-6烷氧基，氧代和CN的取代基取代一次或兩次的；且n為0。在另一個實施方案中，供依照本發(fā)明的方法中使用的MDM2抑制劑為式III的化合物，其中X選自由H，F(xiàn)，Cl，Br，I，氰基，硝基，乙炔基，環(huán)丙基，甲基，乙基，異丙基，乙烯基和甲氧基組成的組，Y為一至四個獨立選自由H，F(xiàn)，Cl，Br，I，CN，OH，硝基，低級烷基，環(huán)烷基，低級烷氧基，低級烯基，環(huán)烯基，低級炔基組成的組的基團(tuán)，Z為低級烷氧基，R1選自由低級烷基，取代的低級烷基，低級烯基，取代的低級烯基，芳基，取代的芳基，雜芳基，取代的雜芳基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，環(huán)烯基，和取代的環(huán)烯基組成的組，R2為選自下述的取代的苯基：W為F，Cl或Br，V為H或F，R3選自由氫，低級烷基或取代的低級烷基組成的組，R4選自由下述組成的組：R5選自由低級烷基，取代的低級烷基，雜環(huán)，取代的雜環(huán)，環(huán)烷基，取代的環(huán)烷基，天然和非天然氨基酸，-(OCH2CH2)n-OH，-(OCH2CH2)n-OCH3，-(NCH2CH2)n-OH，-(NCH2CH2)n-OCH3和-(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2組成的組，其中n為3至60，優(yōu)選3至45，R6為氫或芐基；或其藥學(xué)可接受鹽或酯。在這個實施方案內(nèi)，優(yōu)選式III的化合物，其中X選自H，F(xiàn)或Cl，Y選自H，F(xiàn)或Cl，R1為低級烷基或取代的低級烷基，R3為氫或低級烷基，R5選自由低級烷基，取代的低級烷基，天然和非天然氨基酸，-(OCH2CH2)n-OH，-(OCH2CH2)n-OCH3，-(NCH2CH2)n-OH，-(NCH2CH2)n-OCH3，-(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2組成的組，其中n為3至60，優(yōu)選3至45，且R6為氫；或其藥學(xué)可接受鹽。而且，在這個實施方案內(nèi)，優(yōu)選式III的化合物，其中X選自H，F(xiàn)或Cl；Y選自H，F(xiàn)或Cl；Z為C1-6烷氧基；R1為C1-6烷基；R2為其中W為F，Cl或Br；V為H或F；R3為氫或C1-6烷基；R4為–C(O)-R5；其中R5選自由-(OCH2CH2)n-OH；-(OCH2CH2)n-OCH3；和-(OCH2CH2)n-OP(O)(OR6)2組成的組，其中n為3至60，且R6為氫；或其藥學(xué)可接受鹽。更具體地，n為3至55，更優(yōu)選地，n為3至45。在這個實施方案內(nèi)，尤其優(yōu)選其中R5為-(OCH2CH2)n-OCH3且n為40至60的化合物。在說明書中，指出各種基團(tuán)可以用1-5個或優(yōu)選1-3個獨立選自由低級烷基，低級烯基，低級炔基，二氧代-低級亞烷基(形成例如苯并二氧基基團(tuán))，鹵素，羥基，CN，CF3，NH2，N(H，低級烷基)，N(低級烷基)2，氨基羰基，羧基，NO2，低級烷氧基，硫代-低級烷氧基，低級烷基磺?；?，氨基磺?；图壨榛驶?，低級烷基羰基氧基，低級烷氧基羰基，低級烷基-羰基-NH，氟-低級烷基，氟-低級烷氧基，低級烷氧基-羰基-低級烷氧基，羧基-低級烷氧基，氨基甲酰基-低級烷氧基，羥基-低級烷氧基，NH2-低級烷氧基，N(H，低級烷基)-低級烷氧基，N(低級烷基)2-低級烷氧基，低級烷基-1-環(huán)氧乙烷基-低級烷氧基-低級烷基，2-氧代-吡咯烷-1-基，(1,1-二氧代)-2-異噻唑烷，3-低級烷基亞磺?；?，取代的或未取代的雜環(huán)環(huán)，取代的或未取代的芳基環(huán)，取代的或未取代的雜芳基環(huán)，三氟-低級烷基磺?；被?芳基，低級烷基磺?；被驶?，低級烷基磺?；被驶?芳基，羥基氨基甲?；?苯基，芐基氧基-低級烷氧基，單或二-低級烷基取代的氨基-磺?；偷图壨榛?其可以任選用鹵素，羥基，NH2，N(H，低級烷基)或N(低級烷基)2取代)組成的組的取代基取代的。對于環(huán)烷基，環(huán)烯基，芳基，雜芳基和雜環(huán)環(huán)優(yōu)選的取代基為鹵素，低級烷氧基，低級烷基，羥基羰基，羧基，羧基低級烷氧基，氧代和CN。對于烷基優(yōu)選的取代基為烷氧基和N(低級烷基)2。術(shù)語“烷基”指具有1至約20個碳原子的直鏈或支鏈飽和烴基團(tuán)，包括具有1至約7個碳原子的基團(tuán)。在某些實施方案中，烷基取代基可以是低級烷基取代基。術(shù)語“低級烷基”指具有1至6個碳原子，和某些實施方案中1至4個碳原子的烷基基團(tuán)。烷基基團(tuán)的例子包括但不限于甲基，乙基，正丙基，異丙基，正丁基，仲丁基，叔丁基，正戊基，和仲戊基。如本文中使用的，“環(huán)烷基”意圖指任何穩(wěn)定的僅僅由碳原子組成的單環(huán)或多環(huán)體系，它的任何環(huán)是飽和的，而術(shù)語“環(huán)烯基”意圖指任何穩(wěn)定的僅僅由碳原子組成的單環(huán)或多環(huán)體系，它的至少一個環(huán)是部分不飽和的。環(huán)烷基的例子包括但不限于環(huán)丙基，環(huán)丁基，環(huán)戊基，環(huán)己基，環(huán)庚基，金剛烷基，環(huán)辛基，雙環(huán)烷基，包括雙環(huán)辛烷諸如[2.2.2]雙環(huán)辛烷或[3.3.0]雙環(huán)辛烷，雙環(huán)壬烷諸如[4.3.0]雙環(huán)壬烷，和雙環(huán)癸烷諸如[4.4.0]雙環(huán)癸烷(萘烷)，或螺化合物。環(huán)烯基的例子包括但不限于環(huán)戊烯基或環(huán)己烯基。如本文中使用的，術(shù)語“烯基”表示含有一個雙鍵且具有2至6個，優(yōu)選2至4個碳原子的不飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基團(tuán)。此類“烯基基團(tuán)”的例子有乙烯基，烯丙基，異丙烯基，1-丙烯基，2-甲基-1-丙烯基，1-丁烯基，2-丁烯基，3-丁烯基，2-乙基-1-丁烯基，3-甲基-2-丁烯基，1-戊烯基，2-戊烯基，3-戊烯基，4-戊烯基，4-甲基-3-戊烯基，1-己烯基，2-己烯基，3-己烯基，4-己烯基和5-己烯基。如本文中使用的，術(shù)語“炔基”表示含有一個三鍵且具有2至6個，優(yōu)選2至4個碳原子的不飽和的直鏈或支鏈脂肪族烴基團(tuán)。此類“炔基基團(tuán)”的例子有乙炔基，1-丙炔基，2-丙炔基，1-丁炔基，2-丁炔基，3-丁炔基，1-戊炔基，2-戊炔基，3-戊炔基，4-戊炔基，1-己炔基，2-己炔基，3-己炔基，4-己炔基和5-己炔基。如定義中使用的，術(shù)語“鹵素”表示氟，氯，溴，或碘，優(yōu)選氟和氯?！胺蓟北硎締蝺r，單環(huán)或雙環(huán)，芳香族碳環(huán)烴根，優(yōu)選6-10元芳香族環(huán)體系。優(yōu)選的芳基基團(tuán)包括但不限于苯基，萘基，甲苯基，和二甲苯基。在芳基基團(tuán)為雙環(huán)的情況中，優(yōu)選的基團(tuán)為1,3-二氧代-2,3-二氫-1H-異吲哚-5-基基團(tuán)?！半s芳基”表示含有多至兩個環(huán)的芳香族雜環(huán)環(huán)體系。優(yōu)選的雜芳基基團(tuán)包括但不限于噻吩基，呋喃基，吲哚劑，吡咯基，吡啶基，吡嗪基，口惡唑基，噻唑基(thiaxolyl)，喹啉基，嘧啶基，咪唑基，取代的或未取代的三唑基和取代的或未取代的四唑基。在芳基或雜芳基為雙環(huán)的情況中，應(yīng)當(dāng)理解，一個環(huán)可以為芳基而另一個為雜芳基且二者是取代的或未取代的。“雜環(huán)”或“雜環(huán)狀環(huán)”表示取代的或未取代的5至8元，單或雙環(huán)，非芳香族烴，其中1至3個碳原子用選自氮，氧或硫原子的雜原子替換。例子包括吡咯烷-2-基；吡咯烷-3-基；哌啶基；嗎啉-4-基等等，它們繼而可以是取代的?！半s原子”表示選自N，O和S的原子?！巴檠趸?，烷氧基或低級烷氧基”指附著至氧原子的任何上述低級烷基基團(tuán)。典型的低級烷氧基基團(tuán)包括甲氧基，乙氧基，異丙氧基或丙氧基，丁氧基等等。烷氧基的含義內(nèi)進(jìn)一步包括的是多重烷氧基側(cè)鏈，例如乙氧基乙氧基，甲氧基乙氧基，甲氧基乙氧基乙氧基等等和取代的烷氧基側(cè)鏈，例如二甲基氨基乙氧基，二乙基氨基乙氧基，二甲氧基-磷酰基甲氧基等等。如本文中使用的，術(shù)語“mPEG”表示甲氧基聚乙二醇，它是商品化的(例如Sigma-Aldrich或IDBiochem(Korea))。mPEG的分子量分布可以隨制造商和/或批次變化。在本發(fā)明的一個實施方案中，mPEG具有約1500Da至約3000Da的平均分子量(MW)。在本發(fā)明的另一個實施方案中，mPEG具有約2000Da和約2200Da的平均MW。平均MW是通過MALDI-TOF質(zhì)譜術(shù)測定的?！八帉W(xué)可接受衍生物”，諸如藥學(xué)可接受鹽和酯，載劑，賦形劑，表示藥學(xué)可接受的且對接受特定化合物施用的受試者基本上無毒的?！八帉W(xué)可接受鹽”指保留本發(fā)明化合物的生物學(xué)有效性和特性且自合適的無毒有機(jī)或無機(jī)酸或有機(jī)或無機(jī)堿形成的常規(guī)酸加成鹽或堿加成鹽。例示性酸加成鹽包括那些自無機(jī)酸諸如氫氯酸，氫溴酸，氫碘酸，硫酸，氨基磺酸，磷酸和硝酸衍生的，和那些自有機(jī)酸諸如對甲苯磺酸，水楊酸，甲磺酸，草酸，琥珀酸，檸檬酸，蘋果酸，乳酸，富馬酸/延胡索酸，三氟乙酸等等衍生的。例示性堿加成鹽包括那些自銨，鉀，鈉和，季銨氫氧化物，諸如例如四甲基銨氫氧化物衍生的。藥物化合物(即藥物)成為鹽的化學(xué)修飾是藥物化學(xué)家公知的用于獲得化合物的改良物理和化學(xué)穩(wěn)定性，吸濕性，流動性和溶解性的技術(shù)。參見例如Anseletal.,PharmaceuticalDosageFormsandDrugDeliverySystems(6thEd.1995),pp.196和1456-1457。術(shù)語“ECOG量表”或ECOG性能狀態(tài)”表示由科學(xué)家和內(nèi)科醫(yī)師開發(fā)的用來評估患者的疾病(癌癥)如何進(jìn)展及影響所述患者的日常生活能力的參數(shù)或標(biāo)準(zhǔn)。該量表是由EasternCooperativeOncologyGroup(ECOG)開發(fā)的且是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的。詳情參見例如Oken,M.M.etal,Am.J.Clin.Oncol.,1982,649-655。在一個實施方案中，依照本發(fā)明的一種具體MDM2抑制劑為式(A)的化合物，也稱作化合物A(RG7112)，此化合物及其生成方法披露于例如WO2007/063013。在另一個實施方案中，供依照本發(fā)明的方法中使用的一種MDM2抑制劑為式(B)的4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸，此化合物及其生成方法披露于例如WO2011/098398。依照本發(fā)明的另一種具體化合物為2-((1-(4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-新戊基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基苯甲酰基氧基)乙氧基)羰基氨基)乙酸。依照本發(fā)明的另一種具體化合物為2-(((4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-新戊基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基苯甲?；趸?甲氧基)-羰基氨基)乙酸。依照本發(fā)明的又一種化合物為4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-新戊基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸3-氧代-2,4,7,10,13,16,19-七氧雜二十烷基酯。依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2000)。依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2200)依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-甲基酯(mPEG，平均MW，～2000)。依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-新戊基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸3-氧代-2,4,7,10,13-五氧雜十四烷基酯。依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-((2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟苯基)-4-(4-氯-2-氟苯基)-4-氰基-5-新戊基吡咯烷-2-甲酰胺基)-3-甲氧基苯甲酸27-氧代-2,5,8,11,14,17,20,23,26,28-十氧雜三十烷-29-基酯。依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-[(2R,3R,4R,5S)-2-((R)-1,2-二羥基-乙基)-4,5-二羥基-四氫-呋喃-3-基氧基羰基氧基]-乙基酯。依照本發(fā)明的另一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-(2-{2-[2-(2-二芐基氧基磷酰基氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基羰基氧基)-乙基酯。還有，依照本發(fā)明的一種具體化合物為4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-(2-{2-[2-(2-膦酰基氧基-乙氧基)-乙氧基]-乙氧基}-乙氧基羰基氧基)-乙基酯。還有，依照本發(fā)明的一種具體化合物為式(C)的4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2000)，平均MW：～2695。此化合物及其生成方法披露于例如WO2013/135648。還有，依照本發(fā)明的一種具體化合物為式(D)的4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2200)，平均MW：～2900。此化合物及其生成方法披露于例如WO2013/135648。依照本發(fā)明，提供了一種預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)性的方法，所述方法包含檢測在治療之前(基線時)自所述癌癥患者獲得的樣品中一種或多種MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型的相對量，并使用所述相對量或表達(dá)MDM2蛋白的細(xì)胞的百分比(％)作為生物標(biāo)志物用于預(yù)測所述患者對用藥物進(jìn)行的治療的響應(yīng)，其中該藥物包含如本文中定義的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物，且其中所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型或生物標(biāo)志物選自由CD45dim細(xì)胞，CD117+(c-kit)和/或CD34+干細(xì)胞，或其組合子集組成的組。在一個實施方案中，該方法為體外方法。在另一個實施方案中，可以使用每一種選自CD45dim細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+干細(xì)胞的MDM2表達(dá)性細(xì)胞類型的相對量(％)作為生物標(biāo)志物用于預(yù)測所述患者對用所述MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)。在另一個實施方案中，也可以使用所述細(xì)胞類型的組合子集。在這個實施方案內(nèi)，優(yōu)選的子集為i)MDM2陽性CD117+(c-kit)和CD45dim細(xì)胞的相對量(％)；或ii)MDM2陽性CD34+和CD45dim細(xì)胞的相對量(％)；或iii)MDM2陽性CD34+和CD117+和CD45dim細(xì)胞的相對量(％)；或iv)MDM2陽性CD45dim細(xì)胞的相對量(％)。如此，在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)性的方法，所述方法包含檢測在治療之前(基線時)自所述癌癥患者獲得的樣品中至少CD45dim(母)細(xì)胞的相對量，并使用所述相對量或表達(dá)MDM2蛋白的CD45dim(母)細(xì)胞的百分比(％)作為生物標(biāo)志物用于預(yù)測所述患者對用藥物進(jìn)行的治療的響應(yīng)，其中該藥物包含如本文中定義的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物。在這個和前述實施方案內(nèi)，“量”為以給定類型，諸如例如CD45dim，CD34+或CD117+的MDM2表達(dá)性細(xì)胞在治療之前(基線時)自所述癌癥患者獲得的樣品中檢測到的該相同類型的所有細(xì)胞中的百分比(％)表示的相對量。細(xì)胞的檢測可以通過熟練技術(shù)人員知道的任何手段，優(yōu)選通過流式細(xì)胞術(shù)來進(jìn)行。在一個實施方案中，本方法為連續(xù)變量測量。優(yōu)選地，本方法基于多變量辦法，因而考慮一套或多套變量。依照本發(fā)明，如上文段落[00053]中定義的MDM2表達(dá)性細(xì)胞的子集為優(yōu)選的變量。在另一個實施方案中，依照本發(fā)明的多變量辦法另外包含患者的年齡和/或ECOG得分作為另外的變量。多變量分析用于將患者分層入代表預(yù)期治療結(jié)局的各組的基本原理是本領(lǐng)域技術(shù)人員，諸如例如臨床腫瘤學(xué)家公知的。本發(fā)明的一個目標(biāo)是定義單獨或連同患者的年齡和/或ECOG得分作為所述分析中的變量的，如本文中定義的某些MDM2表達(dá)性細(xì)胞和子集的相對量(見例如段落[00053])。在另一個實施方案中，本發(fā)明鑒定閾(或截留)值或一套值，諸如例如范圍，其特征在于基于臨床數(shù)據(jù)(研究No.NP28679，部分1和2)鑒定最有可能響應(yīng)MDM2拮抗劑療法的患者的MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的量。該量為以MDM2表達(dá)性細(xì)胞在所有CD45dim母細(xì)胞中的百分比(％)表示的相對量。該量優(yōu)選通過流式細(xì)胞術(shù)來檢測，且特征在于至少45％，優(yōu)選至少50％MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞。MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞在那些水平以上的患者最有可能響應(yīng)用MDM2抑制劑(MDM2拮抗劑)進(jìn)行的治療，即達(dá)到有益的臨床終點。術(shù)語“響應(yīng)”在本文中有進(jìn)一步定義。所述MDM2表達(dá)性CD45dim母細(xì)胞的相對量是在治療之前自癌癥患者獲得的樣品中測量的，因此具有充當(dāng)用如本文中定義的MDM2抑制劑治療所述癌癥患者的預(yù)后性和/或預(yù)測性生物標(biāo)志物的潛力。在另一個實施方案中，如上文段落[00053]中i)至iv)下定義的具體細(xì)胞子集的閾值為10％；或15％或20％。MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量在那些水平以上的患者最有可能響應(yīng)用MDM2抑制劑(MDM2拮抗劑)進(jìn)行的治療，即達(dá)到有益的臨床終點。在一個實施方案中，該癌癥(或“贅生性疾病”)選自由乳腺癌，前列腺癌，宮頸癌，卵巢癌，胃癌，結(jié)直腸癌(即包括結(jié)腸癌和直腸癌)，胰腺癌，肝癌，腦癌，神經(jīng)內(nèi)分泌癌，肺癌，腎癌，血液學(xué)惡性腫瘤，黑素瘤和肉瘤組成的組。在另一個實施方案中，該癌癥選自由血液學(xué)惡性腫瘤，包括白血病，淋巴瘤，和多發(fā)性骨髓瘤組成的組。在還有另一個實施方案中，該癌癥為急性骨髓性白血病(AML)，或骨髓異常增生綜合征(MDS)，或骨髓增生性贅生物(MPN)。如本文中使用的，術(shù)語“響應(yīng)”表示達(dá)到任何臨床終點。優(yōu)選地，當(dāng)例如與安慰劑或標(biāo)準(zhǔn)護(hù)理比較時，該臨床終點對患者是有益的。在一個實施方案中，如本文中使用的，臨床終點或響應(yīng)表示總體存活(OS)，無進(jìn)展存活(PFS)或無事件存活(EFS)。在另一個實施方案中，術(shù)語響應(yīng)表示完全響應(yīng)(CR)，部分響應(yīng)(PR)，伴有不完全血小板恢復(fù)的完全響應(yīng)(CRi)，血液學(xué)改善(HI)，或無形態(tài)學(xué)白血病狀態(tài)(MLFS)。術(shù)語“MDM2表達(dá)性細(xì)胞”或“MDM2陽性細(xì)胞”或“MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞”表示選自由MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞，CD34+和CD117+(c-kit)干細(xì)胞組成的組的細(xì)胞類型。MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的“相對量”表示MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞在如上文定義的相同細(xì)胞類型的所有細(xì)胞中的百分比(％)。在一個實施方案中，術(shù)語“相對量”表示在患者的樣品中檢測到的相同類型的所有細(xì)胞中約30％至約100％，或約45％至約100％的MDM2陽性細(xì)胞。在另一個實施方案中，術(shù)語“相對量”表示約45％至約90％，或約55％至約85％，或約65％至約80％，或約70％至約75％MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞。在另一個實施方案中，術(shù)語“相對量”表示至少約45％，或至少約55％，或至少約65％，或至少約75％MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞。在另一個實施方案中，上文所述相對量指MDM2陽性CD45dim(母)細(xì)胞的量，而且MDM2陽性CD45dim(母)細(xì)胞的量是相對于樣品中的所有CD45母細(xì)胞而言的。如果使用數(shù)種類型的細(xì)胞(子集)進(jìn)行分析，那么術(shù)語“相對量”也可以表示MDM2表達(dá)性細(xì)胞基于所述子集內(nèi)細(xì)胞總數(shù)的百分比。所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量可以在治療之前(基線時)自所述癌癥患者獲得的任何合適樣品中測量。在一個實施方案中，所述樣品為血液樣品。在另一個實施方案中，所述樣品為骨髓樣品?？蓱?yīng)用本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的任何技術(shù)來檢測所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的所述相對量。在一個實施方案中，所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量是通過流式細(xì)胞術(shù)檢測的。在一個實施方案中，該患者為罹患如本文中定義的癌癥的人。在另一個實施方案中，該患者罹患血液學(xué)病癥，諸如例如AML。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于確定癌癥患者對用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的方法，其包含下述步驟：a)自患者取得樣品；b)測量樣品中MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量；c)將來自患者的所述相對量與標(biāo)準(zhǔn)值，例如自具有相同癌癥的患者獲得的值比較；并d)施用作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物。在這個實施方案內(nèi)，如果應(yīng)用本方法作為患者對治療的響應(yīng)的預(yù)測方法的話，a)中的樣品是在治療起動之前獲得的；而且b)中的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞選自由CD45dim(母)細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+組成的組中的一項或多項。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種鑒定罹患癌癥的患者為有可能響應(yīng)包含MDM2抑制劑的療法的體外方法，該方法包含：a)測量在治療之前自該患者獲得的樣品中MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量；b)將所述相對量與參照水平比較；并d)當(dāng)樣品中MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量在所述參照水平以上時，鑒定所述患者為更有可能響應(yīng)包含所述MDM2抑制劑的療法，且其中a)中的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞選自由CD45dim(母)細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+組成的組中的一項或多項。在這些實施方案內(nèi)，a)中獲得的相對量在參照水平以上指示患者有較高的可能性響應(yīng)用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療，而相對量在所述水平以下指示所述患者不太可能響應(yīng)該治療。在來自NP28679白血病試驗的標(biāo)本的臨床設(shè)置中測試MDM2拮抗劑預(yù)測性CD45dim(母)細(xì)胞簽名的性能(圖3)。作為一項劑量擴(kuò)大研究的一部分治療的30名AML患者提供全血標(biāo)本，可通過流式細(xì)胞術(shù)進(jìn)行分析。將臨床響應(yīng)終點分層入5個范疇：完全響應(yīng)(CR)，伴有不完全血小板恢復(fù)的完全響應(yīng)(CRi)，無形態(tài)學(xué)白血病狀態(tài)(MLFS)，部分響應(yīng)(PR)，血液學(xué)改善(HI)，和進(jìn)展性疾病(PD)。在基線篩選時收集血液白血病樣品。通過流式細(xì)胞術(shù)分析樣品并表征CD45dim母細(xì)胞，然后在這些細(xì)胞的子集內(nèi)進(jìn)一步表征評分為MDM2蛋白表達(dá)呈陽性的CD45dim細(xì)胞的％。然后在響應(yīng)者(CR，CRi，MLFS)和非響應(yīng)者(PR，HI，PD)之間對基線％MDM2陽性細(xì)胞測試顯著相關(guān)性。如此，在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于確定癌癥患者對用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的方法，其特征在于在治療之前自該患者獲得的樣品中檢測到的％MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞越高，所述患者響應(yīng)所述治療的可能性越高，如例如通過臨床藥理學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員公知的ROC(AUC)值和分析指示的。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于確定癌癥患者對用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的方法，其包含下述步驟：a)自患者取得樣品；b)測量樣品中MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的相對量；c)將來自患者的所述相對量與標(biāo)準(zhǔn)值，例如自具有相同癌癥的患者獲得的值比較；并d)施用作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物。如果應(yīng)用本方法作為患者對治療的響應(yīng)的預(yù)測方法的話，a)中的樣品是在起動治療之前獲得的。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種鑒定罹患癌癥的患者為有可能響應(yīng)包含MDM2抑制劑的療法的體外方法，該方法包含：a)測量在治療之前自該患者獲得的樣品中MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的相對量；b)將所述相對量與參照水平比較；并d)當(dāng)樣品中MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的相對量在所述參照水平以上時將所述患者鑒定為更有可能響應(yīng)包含所述MDM2抑制劑的療法。在一個實施方案中，a)中獲得的相對量在參照水平以上指示患者有較高的可能性響應(yīng)用MDM2抑制劑進(jìn)行的治療，而相對量在所述水平以下指示所述患者不太可能響應(yīng)該治療。在一個實施方案中，a)中獲得的樣品為血液白血病樣品，或骨髓活檢樣品。在一個實施方案中，該MDM2抑制劑為如美國專利8,354,444B2中，或WO2007/063013，WO2010/031713，WO2011/098398和WO2013/135648中具體公開的化合物；或依照式I，II，IIa或III的化合物，或其組合。在另一個實施方案中，依照本發(fā)明使用的MDM2抑制劑為式(A)，(B)，(C)或(D)的化合物。在另一個實施方案中，該MDM2抑制劑為式(B)的化合物4-{[(2R,3S,4R,5S)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸，在還有另一個實施方案中，該MDM2抑制劑為式(C)的化合物4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2000)，(平均MW：～2695)。在還有另一個實施方案中，該MDM2抑制劑為式(D)的化合物4-{[(2R,3S,4R,5S)-3-(3-氯-2-氟-苯基)-4-(4-氯-2-氟-苯基)-4-氰基-5-(2,2-二甲基-丙基)-吡咯烷-2-羰基]-氨基}-3-甲氧基-苯甲酸1-mPEG-羰基氧基-乙基酯(mPEG，平均MW，～2200)，(平均MW：～2900)。供依照本發(fā)明使用的MDM2抑制劑是本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的。式II，IIA或(B)的化合物，用于生成它們的方法以及含有它們的藥物制劑披露于例如美國專利No.8,354,444或WO2011/098398。式III，或(C)，或(D)的化合物和它們的制備披露于例如WO2013/135648。為了將所述MDM2抑制劑施用于患者的目的，可以依照藥物投遞方面技術(shù)人員公知的技術(shù)將這些化合物加工成藥物制劑。在依照本發(fā)明的一個實施方案中，化合物(B)作為口服劑量形式施用，其中它以其無定形形式分子散布。在另一個實施方案中，化合物(B)以單位劑量固體配制劑施用，其特征在于使用滾筒混合儀將通過化合物(B)連同占約80％wt/wt的核重的共聚維酮(PVPVA64)噴霧干燥獲得的固體分散體與填充劑(6.8％直至10.8％的核重)，優(yōu)選選自甘露醇，微晶纖維素，乳糖單水合物或二氧化硅；一種或兩種崩解劑(4％wt/wt的核重)，選自交聯(lián)羧甲基纖維素鈉或交聚維酮；助流劑(1％wt/wt的核重)，優(yōu)選膠體二氧化硅；和潤滑劑(0.2％wt/wt的核重)，硬脂酸鎂進(jìn)一步混合?；衔?B)的上述劑量形式以及其它可應(yīng)用劑量形式披露于例如WO2014/114575，通過援引將其收入本文。式III，或(C)，或(D)的化合物的藥物制劑包括那些適合于口服，鼻和/或胃腸外或靜脈內(nèi)施用的。配制劑可以方便地以單位劑量形式存在且可以通過藥學(xué)領(lǐng)域公知的任何方法來制備。在一個實施方案中，式(C)或(D)的化合物以穩(wěn)定的凍干配制劑提供，其用于靜脈內(nèi)施用，包含約0.1mg至約100mg化合物(I)，約10mM至約100mM緩沖劑，約25mg至約125mg凍干填充劑和等滲劑。經(jīng)由用HCl或NaOH調(diào)節(jié)，所得配制劑應(yīng)具有約5-7的pH。在另一個實施方案中，式(C)或(D)的化合物通過漩渦震蕩在含0.9％氯化鈉的無菌水中溶解，然后過濾通過濾器進(jìn)入隔膜密封的管形瓶，用于靜脈內(nèi)施用。優(yōu)選作為用于靜脈內(nèi)施用的凍干配制劑施用。式III，或(C)，或(D)的化合物的這些制劑以及其它可應(yīng)用制劑披露于例如國際專利申請No.PCT/EP2014/062982，通過援引將其收入本文。用于對患者施用本MDM2抑制劑的劑量和劑量進(jìn)度表同樣是本領(lǐng)域技術(shù)人員知道的且披露于例如WO2013/139687或美國專利申請No.14/217929(作為US20140200255A1公布)。依照本發(fā)明，式III，特別是式(C)和(D)的化合物是式(B)的化合物的前體藥物。如此，式III，特別是式(C)和(D)的化合物會以在患者的血漿中實現(xiàn)有效劑量的式(B)的化合物的方式施用。如此，在一個實施方案中，依照本發(fā)明的藥物包含式(C)或(D)的化合物，其特征在于它們以如下的方式進(jìn)行劑量給藥，對于28天治療周期，多至約7天，優(yōu)選多至約5天的施用期，在第1-7天，或優(yōu)選第1-5天，以約50至約3000mg/天，或約80至約2500mg/天，或約80至約1600mg/天，或約200至約1600mg/天，或約400至約1600mg/天，或約400至約1200mg/天，或約400至約1000mg/天，或約400至約800mg/天，或約400至約600mg/天的量投遞式(B)的化合物，接著是約21至約23天，優(yōu)選多至約23天的休息期。日劑量，即以mg/天表示的化合物(B)的量，可以作為一劑(qd)或以兩劑(BID)施用。當(dāng)給予兩劑時，它們優(yōu)選以相等的量施用，一次在上午，一次在下文。在另一個實施方案中，本藥物包含式(C)或(D)的化合物，其特征在于它們以如下的方式定進(jìn)行劑量給藥，對于28天治療周期，多至5天的施用期，在第1-5天，以約200至約1200mg/天，或約400至約1200mg/天的量投遞式(B)的化合物，接著是23天的休息期。在另一個實施方案中，式(B)的化合物也可以直接施用，即不是經(jīng)由式III，或(C)，或(D)的前體藥物，而且使用上文所述口服劑量形式。如此，在本發(fā)明的另一個實施方案中，式(B)的化合物使用固體，口服劑量形式，例如包膜片劑來施用，對于28天治療周期，多至5天的施用期，在第1-5天，以其無定形形式及以約200至約1200mg/天，或約400至約1200mg/天的量提供式(B)的化合物，接著是23天的休息期。包含如本文中定義的MDM2抑制劑的藥物可以與已知用于給定類型的癌癥的另一療法組合施用。例如，在治療AML的情況中，所述MDM2抑制劑優(yōu)選與阿糖胞苷或與阿糖胞苷和蒽環(huán)類抗生素組合。依照本發(fā)明的阿糖胞苷的治療有效量(或“有效量”)表示有效實現(xiàn)協(xié)同，即大于疊加效應(yīng)的量。由于阿糖胞苷作為AML的骨干療法使用多年，因此本領(lǐng)域技術(shù)人員，例如臨床醫(yī)師可得到關(guān)于人中有效和耐受劑量的大量信息。例如，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)阿糖胞苷可以在AML的治療(誘導(dǎo)方案)中作為單一藥劑以較大的量給藥，諸如第1至6天每12小時在2小時里多至3g/m2(靜脈內(nèi))的量。關(guān)于在白血病的治療中使用阿糖胞苷的一篇綜述見例如“NicholasD.Reese,GaryJ.Schiller；CurrHematolMaligRep,2013,8:141-148”。在某些組合療法(例如急性非淋巴細(xì)胞性白血病的誘導(dǎo)療法)中，與其它抗癌藥物組合的常用阿糖胞苷劑量為連續(xù)iv輸注(第1-7天)100mg/m2/天或每12小時(第1-7天)iv100mg/m2。(參見例如www.hospira.com)。同樣，技術(shù)人員，諸如臨床腫瘤學(xué)家，完全知曉基于蒽環(huán)類抗生素的癌癥療法的可得性和使用。此類治療選項的一篇廣泛綜述見例如：G.Minottietal,Anthracyclines:MolecularAdvancesandPharmacologicDevelopmentsinAntitumorActivityandCardiotoxicity,PharmacologicalReviews,2004,Vol.56No.2,185-229。在另一個實施方案中，依照本發(fā)明的MDM2抑制劑，優(yōu)選式III，或(B)，或(C)，或(D)的化合物與化合物Cobimetinib組合施用，用于治療如本文中定義的癌癥。Cobimetinib的劑量形式，劑量和劑量方案可以自例如已公開的coBRIMIII期試驗(ClinicalTrials.gov標(biāo)識符NCT01689519)獲得。通過援引將NCT01689519研究中使用的Cobimetinib的所述劑量形式，劑量和劑量方案收入本文?？梢栽趐53基因突變狀態(tài)的背景中使用對如本文中定義的MDM2陽性細(xì)胞，特別是MDM2陽性CD45dim(母)細(xì)胞獲得的信息以更加準(zhǔn)確地區(qū)分患者對治療的響應(yīng)/結(jié)局?；颊叩膒53基因突變狀態(tài)可充當(dāng)另外的標(biāo)志物來以改進(jìn)的靈敏度和/或特異性檢測所述患者對用依照本發(fā)明的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)。因此，在還有另一個實施方案中，本發(fā)明提供如本文中之前公開的用于測量自癌癥患者獲得的樣品中如本文中定義的MDM2表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的％的任何方法，其進(jìn)一步包含檢測所述患者的樣品中p53基因突變狀態(tài)的步驟。在這個實施方案內(nèi)，p53基因突變狀態(tài)優(yōu)選野生型。然而，p53基因突變的檢測一般不應(yīng)解釋為該患者響應(yīng)或受益于如本文中公開的MDM2抑制劑的治療的可能性的排除標(biāo)準(zhǔn)。如此，在還有另一個實施方案中，本發(fā)明提供如本文中定義的MDM2表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的％的多變量分析和p53突變狀態(tài)的組合，用于提供所述患者達(dá)到有益的臨床終點，即響應(yīng)治療的可能性的更加精確的預(yù)測。治療方法在還有另一個實施方案中，本發(fā)明還涉及治療方法，其中首先檢測自罹患癌癥的患者獲得的樣品，優(yōu)選血液或骨髓樣品中如本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量，相對于一個或一組標(biāo)準(zhǔn)水平或治療前起始水平檢測敏感性，然后施用MDM2抑制劑。優(yōu)選所述MDM2抑制劑為如上文定義的通式I，II，III的化合物，或其藥學(xué)可接受衍生物，更優(yōu)選式IIa或III的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物。所述化合物可以以本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的藥物組合物施用。尤其優(yōu)選用于對溫血動物，尤其人施用，諸如鼻，口腔，直腸或，尤其口服施用，和用于胃腸外施用，諸如靜脈內(nèi)，肌肉內(nèi)或皮下施用的組合物。更特別地，優(yōu)選用于靜脈內(nèi)施用的組合物。在這個實施方案內(nèi)，通式I，II或III，優(yōu)選IIa或III的化合物，或其藥學(xué)可接受衍生物可以單獨或與一種或多種其它治療劑組合施用?？赡艿慕M合療法可采取固定組合，或者交錯或彼此獨立給予的本發(fā)明的化合物和一種或多種其它治療劑的施用，或者固定組合和一種或多種其它治療劑的組合施用的形式。也在這個實施方案內(nèi)，另外，通式I，II或III，優(yōu)選IIa或III的化合物，或其藥學(xué)可接受衍生物可以尤其與化學(xué)療法(細(xì)胞毒性療法)，靶向療法，內(nèi)分泌療法，放射療法，免疫療法，手術(shù)干預(yù)，或這些的組合組合施用用于腫瘤療法。在如上文描述的其它治療策略的背景中，長期療法與輔助療法同等可能。其它可能的治療有在腫瘤消退后維持患者的狀態(tài)的療法，或甚至例如在處于風(fēng)險的患者中的化學(xué)預(yù)防療法。試劑盒和裝置一方面，本發(fā)明涉及一種試劑盒，而另一方面，涉及一種用于預(yù)測(優(yōu)選受試者(或患者)中的癌癥)對如本文中定義的通式I，II，III；或IIa或III；或(A)，(B)，(C)或(D)的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物的響應(yīng)的裝置，所述試劑盒包含用于樣品收集，尤其是用于收集血液或骨髓樣品的設(shè)備，工具或裝置和如何檢測所述樣品中本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量的說明書。該試劑盒和裝置還可以優(yōu)選包含比較模塊，其包含一個或一組標(biāo)準(zhǔn)值，與之比較樣品中如本文中定義的所述MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的水平。在另一個實施方案中，提供了一種用于預(yù)測對用包含作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物的藥物進(jìn)行的治療的響應(yīng)的試劑盒，其包含：a)用于自罹患癌癥，特別是血液學(xué)病癥，諸如白血病，特別是AML的患者獲得樣品，優(yōu)選血液或骨髓樣品的設(shè)備；b)如何自該樣品檢測一種或多種如本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量的說明書，優(yōu)選通過使用流式細(xì)胞術(shù)，和任選還檢測選自所述患者的p53基因突變狀態(tài)，年齡和/或ECOG得分的另外的變體；c)比較模塊，其包含標(biāo)準(zhǔn)值和如何使用它們的說明書；和d)藥物，其包含作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物。在還有另一個實施方案中，提供了如上所述的試劑盒，其中該作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物為如本文中定義的式I，II，III；或IIa或III；或(A)，(B)，(C)或(D)的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物。該一個或一組標(biāo)準(zhǔn)值可以如上所述確定。在仍有另一個實施方案中，提供了如本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞作為用于預(yù)測患者對用MDM2抑制劑(拮抗劑)進(jìn)行的治療的響應(yīng)的生物標(biāo)志物的用途。與預(yù)測性基因簽名的組合在另一個實施方案中，本方法，即如本文中之前定義的依照任何實施方案的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量(％)的檢測，可以與作為另一個協(xié)變量的基線時自相同患者的樣品檢測的基因簽名的評估組合。合適的基因簽名和用于獲得它們的方法披露于例子PCT/EP2014/064039，通過援引將其完整收入本文。此類組合通過應(yīng)用特定的演算法(多變量分析)來進(jìn)行，它可提供更加準(zhǔn)確的患者臨床受益于如本文中定義的MDM2抑制劑治療的預(yù)測。改進(jìn)的準(zhǔn)確性可以例如通過與單獨的任何早已較強(qiáng)的生物標(biāo)志物(MDM2表達(dá)性細(xì)胞；或基因簽名)相比多變量分析的AUC升高(即自0.93至0.95)和p值升高(自10-3至10-5)來證明。因此，在一個實施方案中，本發(fā)明提供一種預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)性的方法，所述方法包含a)自所述患者取得一份或多份樣品；b)測量步驟a)中獲得的所述樣品中至少一種MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型的相對量(％)；c)檢測步驟a)中獲得的樣品中至少一種依照表1的基因的表達(dá)水平；d)使用a)和b)的信息應(yīng)用多變量分析以計算一項值(組合得分“S”)；e)比較“S”的所述值與標(biāo)準(zhǔn)值(或參照值)；并f)當(dāng)“S”的值在所述標(biāo)準(zhǔn)值以上時將所述患者鑒定為更有可能響應(yīng)療法；其中所述療法包含對所述患者施用如本文中之前定義的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物(MDM2抑制劑)。表1：MDM2抑制劑治療的重要基因表達(dá)預(yù)測物在這個實施方案內(nèi)，該方法優(yōu)選為體外方法。該患者為癌癥患者，而且術(shù)語“癌癥”如本文中之前定義的。用于步驟b)和c)中測量的樣品可以相同或不同，而且如本文中之前定義的。優(yōu)選所述相同或不同樣品為在治療起動之前(基線時)自所述患者取得的血液和/或骨髓樣品。步驟b)中的術(shù)語“相對量”和“MDM2表達(dá)性細(xì)胞類型”如本文中之前定義的。優(yōu)選地，MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型選自CD45dim細(xì)胞，CD117+(c-kit)和CD34+干細(xì)胞?？梢允褂靡环N單一細(xì)胞類型或所述細(xì)胞類型的組合子集的相對量的，也如本文中之前定義的。所述細(xì)胞類型的測量是如上文定義進(jìn)行的，優(yōu)選通過流式細(xì)胞術(shù)。方法步驟c)中“至少一種基因”的檢測包含檢測依照表1的一種單一基因的水平或包含依照表1的2，或3，或4，或5，或6，或7，或8，或9，或10，或11，或12種基因的組合水平，或檢測依照表1的所有13種基因。基因的檢測優(yōu)選表示檢測mRNA表達(dá)水平，例如通過RT-PCR(實時聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng))或陣列技術(shù)，如PCT/EP2014/064039中公開的，及還如技術(shù)人員知道的。當(dāng)通過RT-PCR測量基線時的mRNA表達(dá)水平時，自基線時(即在治療之前)測量的相對表達(dá)水平(2Δ-CP)乘以體外觀察到的方向后的之和來計算患者的簽名得分。步驟d)中獲得的組合得分“S”是基于b)中獲得的自MDM2流式測量獲得的值與c)中獲得的基因簽名得分相乘或相加而分析的。優(yōu)選地，所述組合得分“S”是依照表2中所列演算法基于b)中獲得的MDM2流式測量與3基因或4基因簽名得分之積或和計算的。表2：用于計算組合得分“S”的演算法No.名稱描述13g得分.乘.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)3基因-簽名-得分*MDM2.流式細(xì)胞術(shù)23g得分.乘.log2.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)3基因-簽名-得分*log2(MDM2.流式細(xì)胞術(shù))33g得分.加.log2.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)3基因-簽名-得分+log2(MDM2.流式細(xì)胞術(shù))44g得分.乘.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)4基因-簽名-得分*MDM2.流式細(xì)胞術(shù)54g得分.乘.log2.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)4基因-簽名-得分*log2(MDM2.流式細(xì)胞術(shù))64g得分.加.log2.MDM2.流式細(xì)胞術(shù)4基因-簽名-得分+log2(MDM2.流式細(xì)胞術(shù))g得分＝依照表1的3或4種基因的基因簽名得分，如披露于PCT/EP2014/064039。MDM2.流式細(xì)胞術(shù)＝如通過流式細(xì)胞術(shù)測量的MDM2表達(dá)性細(xì)胞類型的相對量。依照表2中的演算法可獲得的組合得分“S”與患者對用所述MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)有關(guān)聯(lián)。在一個實施方案中，在標(biāo)準(zhǔn)值(或參照值)以上的“S”值指示患者有可能響應(yīng)或受益于用所述MDM2抑制劑進(jìn)行的治療，而在所述標(biāo)準(zhǔn)值以下的相對量指示所述患者不太可能響應(yīng)或受益于該治療。該標(biāo)準(zhǔn)值可取決于用于計算“S”的算法。例如，當(dāng)在S的計算中使用3基因或4基因簽名時，或當(dāng)應(yīng)用log2度量時(見圖4)，參照水平是不同的。術(shù)語“響應(yīng)”為如本文中之前定義的。同樣，術(shù)語“MDM2抑制劑”如上文定義的。優(yōu)選地，此類MDM2抑制劑為如本文中定義的式IIa，或III，或(B)，或(C)，或(D)的化合物，包括如本文中之前定義的任何藥物制劑。在另一個實施方案中，所述MDM2抑制劑還可以與其它藥學(xué)活性化合物，例如阿糖胞苷或cobimetinib組合，亦如本文中之前公開的。在一個實施方案中，在上述方法的步驟c)中使用3或4基因簽名得分。該3基因簽名由XPC，BBC3和CDKN2A；或MDM2，XPC和BBC3的mRNA表達(dá)水平組成；該4基因簽名由MDM2，XPC，BBC3和CDKN2A的mRNA表達(dá)水平組成。當(dāng)通過RT-PCR測量mRNA表達(dá)水平時，自基線時(即在治療之前)測量的相對表達(dá)水平(2Δ-CP)乘以體外觀察到的方向后的之和計算患者的簽名得分，定義為4基因簽名得分：S4基因-RT-PCR＝GMDM2+GXPC+GBBC3–GCDKN2A，其中Gx＝2Δ-CPx且Δ-CPMDM2＝CP持家–CPMDM2，Δ-CPXPC＝CP持家–CPXPC，Δ-CPBBC3＝CP持家–CPBBC3，Δ-CPCDKN2A＝CP持家–CPCDKN2A。術(shù)語“持家”表示任何合適的對照基因。在本發(fā)明的一個實施方案中，“持家”為作為內(nèi)源對照基因的TMEM55B。假設(shè)SMDM2-流式表示選定細(xì)胞類型，例如CD45dim母細(xì)胞群體中具有可檢測MDM2蛋白表達(dá)的細(xì)胞的百分比。通過組合蛋白質(zhì)表達(dá)測量MDM2SMDM2-流式和基于RT-PCR的4基因簽名得分S4基因-RT-PCR，可以以下述三種方式計算組合得分“S”：S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式；或S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；或S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。類似地，假設(shè)3基因簽名得分S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3–GCDKN2A，其自得分計算省略GMDM2，可以以相同方式計算組合得分“S”：S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式；或S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；或S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。同樣地，用于計算組合得分“S”的上述方式也可應(yīng)用于3基因簽名得分S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3+GMDM2，其自得分計算省略GCDKN2A。通過使用兩樣品Wilcoxon秩和檢驗及經(jīng)由計算分類曲線下面積(AUC)檢驗基于任何上述六種定義的簽名得分是否能顯著區(qū)分響應(yīng)者與非響應(yīng)者，將組合簽名得分“S”與NP29679試驗(適應(yīng)癥：AML)部分1和2的臨床響應(yīng)關(guān)聯(lián)。因此，在一個實施方案中，上述方法的步驟b)包含檢測下述各項的相對量：i)MDM2陽性CD45dim細(xì)胞；或ii)MDM2陽性CD117+(c-kit)和CD45dim細(xì)胞；或iii)MDM2陽性CD34+和CD45dim細(xì)胞；或iv)MDM2陽性CD34+和CD117+和CD45dim細(xì)胞；i)至iv)下獲得的每個值稱作SMDM2-流式；且步驟c)包含通過RT-PCR檢測3基因簽名的mRNA水平，其中該3基因簽名包含XPC，BBC3和CDKN2A或MDM2，XPC和BBC3并稱作S3基因；且依照選自由下述組成的組的算法通過多變量分析計算步驟d)中的組合得分“S”：S＝S3基因×SMDM2-流式；或S＝S3基因×log2(SMDM2-流式)；或S＝S3基因+log2(SMDM2-流式)；且步驟a)，e)和f)如上文定義的。在另一個實施方案中，上述方法的步驟b)包含檢測下述各項的相對量：i)MDM2陽性CD45dim細(xì)胞；或ii)MDM2陽性CD117+(c-kit)和CD45dim細(xì)胞；或iii)MDM2陽性CD34+和CD45dim細(xì)胞；或iv)MDM2陽性CD34+和CD117+和CD45dim細(xì)胞；i)至iv)下獲得的每個值稱作SMDM2-流式；且步驟c)包含通過RT-PCR檢測4基因簽名的mRNA水平，其中該4基因簽名包含MDM2，XPC，BBC3和CDKN2A且稱作S4基因；且依照選自由下述組成的組的算法通過多變量分析計算步驟d)中的組合得分“S”：S＝S4基因×SMDM2-流式；或S＝S4基因×log2(SMDM2-流式)；或S＝S4基因+log2(SMDM2-流式)；且步驟a)，e)和f)如上文定義的。在還有另一個實施方案中，提供了一種預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)性的體外方法，所述方法包含下述步驟：a)基線時自患者取得血液和/或骨髓活檢樣品；b)測量a)中獲得的樣品中MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的相對量(％)(SMDM2-流式)；c)通過RT-PCR測量a)中獲得的樣品中MDM2，XPC，BBC3和CDKN2A的mRNA表達(dá)水平，并依照下式計算3基因簽名得分S3基因-RT-PCR：S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3–GCDKN2A，或S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3+GMDM2；其中Gx＝2Δ-CPx且Δ-CPx＝CP持家–CPx；d)依照下述演算法之一使用b)和c)中獲得的值應(yīng)用多變量分析以計算S的值：S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式；或S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；或S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)；e)比較d)中獲得的“S”的所述值與標(biāo)準(zhǔn)值，例如自具有相同癌癥的患者獲得的值；并f)當(dāng)d)中獲得的“S”的值在所述標(biāo)準(zhǔn)值以上時施用如本文中定義的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物，優(yōu)選式IIa，III，(B)，(C)或(D)的化合物。在這個實施方案內(nèi)，“標(biāo)準(zhǔn)值”(或參照值)可依照步驟d)中應(yīng)用的算法而不同。因此，在一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約50，或約100，或約150(見圖4bii)和v))。在另一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約8，或約10，或約12，或約15(見圖4bi)和iv))。在另一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約7，或約8，或約8.5，或約9(見圖4biii)和vi))。在還有另一個實施方案中，提供了一種預(yù)測具有癌癥的患者對療法的響應(yīng)性的體外方法，所述方法包含下述步驟：a)基線時自該患者取得血液和/或骨髓活檢樣品；b)測量a)中獲得的樣品中MDM2蛋白表達(dá)性CD45dim(母)細(xì)胞的相對量(SMDM2-流式，以％計)；c)通過RT-PCR測量a)中獲得的樣品中MDM2，XPC，BBC3和CDKN2A的mRNA表達(dá)水平，并依照下式計算4基因簽名得分S4基因-RT-PCR：S4基因-RT-PCR＝GMDM2+GXPC+GBBC3–GCDKN2A其中Gx＝2Δ-CPx且Δ-CPx＝CP持家–CPx；d)依照下述演算法之一使用b)和c)中獲得的值應(yīng)用多變量分析以計算S的值：S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式；或S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；或S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)；e)比較d)中獲得的“S”的所述值與標(biāo)準(zhǔn)值，例如自具有相同癌癥的患者獲得的值；并f)當(dāng)d)中獲得的“S”的值在所述標(biāo)準(zhǔn)值以上時施用如本文中定義的作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物，優(yōu)選式IIa，III，(B)，(C)或(D)的化合物。在這個實施方案內(nèi)，“標(biāo)準(zhǔn)值”(或參照值)可依照步驟d)中應(yīng)用的算法而不同。因此，在一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約200，或約300，或約400，或約450，或約500(見圖4ai)和iv))。在另一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約27，或約30，或約33，或約36，或約40(見圖4aii)和v))。在另一個優(yōu)選的實施方案中，當(dāng)依照S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)計算“S”時，用于依照步驟e)的比較的標(biāo)準(zhǔn)值為約10，或約10.5，或約11，或約11.5或約12(見圖4aiii)和vi))。在另一個實施方案中，如任何上述實施方案中定義的組合得分“S”在治療期間使用，即監(jiān)測用如本文中之前定義的MDM2抑制劑對癌癥患者進(jìn)行的治療。在這個實施方案內(nèi)，依照任何上文所述方法的步驟a)中的樣品是在治療期間取得的，而且當(dāng)d)中獲得的組合得分在相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)值以上時繼續(xù)治療。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于確定癌癥患者對用如本文中定義的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的方法，其特征在于依照本文中之前定義的任何算法獲得的組合得分“S”越高，所述患者響應(yīng)所述治療的可能性越高，如例如通過臨床藥理學(xué)領(lǐng)域技術(shù)人員公知的ROC(AUC)值和分析指示。依照上文定義的任何方法/算法獲得的組合得分“S”可以在p53基因突變狀態(tài)的背景中使用以甚至更加準(zhǔn)確地區(qū)分患者對治療的響應(yīng)/受益?；颊叩膒53基因突變狀態(tài)可充當(dāng)另外的標(biāo)志物來以改善的靈敏度和/或特異性檢測所述患者對用如本文中定義的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)。因此，在還有另一個實施方案中，本發(fā)明提供用于獲得如本文中定義的組合得分“S”的任何方法，其進(jìn)一步包含檢測所述患者的樣品中p53基因突變狀態(tài)的步驟。在這個實施方案內(nèi)，p53基因突變狀態(tài)優(yōu)選為野生型。然而，p53基因突變的檢測一般不應(yīng)理解為患者響應(yīng)或受益于用如本文中公開的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的可能性的排除標(biāo)準(zhǔn)。如此，在還有另一個實施方案中，本發(fā)明提供組合，多變量分析，其組合如本文中定義的％MDM2表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞與基因簽名得分，優(yōu)選如上文定義的3和4基因簽名得分，和p53突變狀態(tài)以提供所述患者達(dá)到有益的臨床終點的可能性，即響應(yīng)治療的更加精確的預(yù)測。在仍有另一個實施方案中，這項多變量分析中的又一些協(xié)變量為患者的年齡和/或ECOG得分。在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種用于治療癌癥患者的方法，其包含依照上文定義的任一方法獲得組合得分“S”，并如果“S”的所述值在亦如本文中之前定義的標(biāo)準(zhǔn)或參照值以上的話對所述患者施用MDM2抑制劑。在一個實施方案中，該MDM2抑制劑為如本文中之前定義的。在另一個實施方案中，該MDM2抑制劑為如上文定義的式(II)，(IIa)，(B)，(C)或(D)的化合物。在另一個實施方案中，還在自所述癌癥患者獲得的樣品中檢測的p53突變狀態(tài)為優(yōu)選野生型。一方面，本發(fā)明涉及一種試劑盒，而另一方面，涉及一種用于預(yù)測(優(yōu)選受試者(或患者)中的癌癥)對如本文中定義的通式I，II，III；或IIa或III；或(A)，(B)，(C)或(D)的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物的響應(yīng)的裝置，所述試劑盒包含用于樣品收集，尤其是用于收集血液或骨髓樣品的設(shè)備，工具或裝置和如何檢測所述樣品中如本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量，和一種或數(shù)種依照表1的基因，優(yōu)選3或4基因簽名的mRNA水平的說明書。該試劑盒和裝置還包含如何自檢測到的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞的相對量和mRNA水平獲得組合得分“S”的說明書。該試劑盒和裝置還可以優(yōu)選包含比較模塊，其包含一個或一組標(biāo)準(zhǔn)值，與之比較自患者的樣品獲得的“S”的值。在另一個實施方案中，提供了一種用于預(yù)測對用包含作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物的藥物進(jìn)行的治療的響應(yīng)的試劑盒，其包含：a)用于自罹患癌癥，特別是血液學(xué)病癥，諸如白血病，特別是AML的患者獲得樣品，優(yōu)選血液或骨髓樣品的設(shè)備；b)如何檢測下述各項的說明書：i)該樣品中一種或多種如本文中定義的MDM2蛋白表達(dá)性細(xì)胞類型，特別是CD45dim(母)細(xì)胞的相對量，優(yōu)選通過使用流式細(xì)胞術(shù)，ii)XPC，BBC3，CDKN2A和任選的MDM2的mRNA表達(dá)水平，優(yōu)選通過使用RT-PCR；和iii)任選還檢測選自患者的p53基因突變狀態(tài)，年齡和/或ECOG得分的協(xié)變量；c)比較模塊，其包含標(biāo)準(zhǔn)值和如何使用它們的說明書；和d)藥物，其包含作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物。在還有另一個實施方案中，提供了如上所述的試劑盒，其中該作為MDM2-p53相互作用的抑制劑起作用的化合物為如本文中定義的式I，II，III；或IIa或III；或(A)，(B)，(C)或(D)的化合物或其藥學(xué)可接受衍生物。該一個或一組標(biāo)準(zhǔn)值可以如上所述確定。下述實施例例示而非限制本發(fā)明。實施例實施例1此實施例描述自參與研究NP28679(部分1和2)的患者獲得的MDM2表達(dá)性CD45dim母細(xì)胞的相對量使用流式細(xì)胞術(shù)的檢測。材料CD34PerCPBD(BectonDichinson)，產(chǎn)品目錄號340666CD45AF700，由贊助CRO定制Mdm2AF647，SantaCruzBiotech，產(chǎn)品目錄號sc-5304AF647滲透緩沖液III，BD，產(chǎn)品目錄號558050BD裂解/固定，產(chǎn)品目錄號558049含1％BSA的PBS，依照贊助CRO的SOP的定制制備染色規(guī)程依照下述規(guī)程對細(xì)胞染色：將適宜供體的100μl血液添加至適宜標(biāo)記的管。隨后通過添加抗體熒光染料綴合物對除CD34以外的表面標(biāo)志物染色或使用相應(yīng)同種型對照。然后將管漩渦震蕩并于室溫在黑暗中溫育20分鐘。用PBSBSA緩沖液清洗后，將管離心并傾倒。然后添加2ml預(yù)熱的1xBD裂解/固定液，將管漩渦震蕩并于在37℃水浴中溫育15分鐘。溫育后，將管離心并倒出上清液。兩個清洗步驟后，使用BD裂解/固定滲透緩沖液與PBS/BSA一起添加用于細(xì)胞內(nèi)染色的適宜抗體或同種型對照。添加CD34或相應(yīng)同種型。將管于室溫在黑暗中溫育30分鐘。然后將管用PBS/BSA清洗兩次并最終在500μl中重懸浮用于在FACSCantoII流式細(xì)胞儀中獲取。獲取了250’000例事件。用于結(jié)果輸出的電子門控對于結(jié)果生成，必須使用流式細(xì)胞術(shù)分析軟件像Winlist或Flowjo。首先，圍繞具有正常尺寸(前向散射，F(xiàn)SC)和粒度特征(側(cè)向散射，SSC)的所有細(xì)胞設(shè)立一個門：全部有核細(xì)胞門(TNC，圖1中的R1)。在此TNC子集中，然后通過圍繞具有可疑CD45表達(dá)和低側(cè)向散射特性的細(xì)胞設(shè)立一個區(qū)域來鑒定AML母細(xì)胞群體(圖1中的R3)。通過門控CD34陽性或陰性母細(xì)胞(圖1，分別為R6和R39)，可以進(jìn)一步精煉母細(xì)胞群體。CD34陽性的閾可以通過在該相應(yīng)通道中使用同種型對照染色來鑒定(未顯示)。接下來，如圖2中所示，在點圖中顯示CD45dim一般母細(xì)胞群體和另外表達(dá)CD34的更加精煉的母細(xì)胞群體。使用同型對照代替Mdm2染色可以用于設(shè)置Mdm2陽性的閾(圖2上部兩幅小圖)。包括Mdm2識別抗體的染色條件顯示在圖2的底部。落在定義為Mdm2陽性的區(qū)域中的細(xì)胞群體通過計算相應(yīng)母細(xì)胞親本群體內(nèi)Mdm2表達(dá)性細(xì)胞的百分比來確定。MDM2表達(dá)性CD45dim母細(xì)胞的相對量與患者對用式(B)的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)的關(guān)聯(lián)依照上文所述方法對參與研究NP28679(部分1和2)的患者獲得MDM2表達(dá)性CD45dim母細(xì)胞的相對量，并將所述量對所述患者的響應(yīng)繪圖(圖3)。取決于是否將部分響應(yīng)(PR)包括在響應(yīng)者組中，證明治療之前MDM2表達(dá)性細(xì)胞的相對量指示該患者對用式(B)的MDM2抑制劑進(jìn)行的治療的響應(yīng)。特別地，證明了在患者的樣品中檢測到的所有CD45母細(xì)胞中，％MDM2陽性CD45dim母細(xì)胞越高，該患者具有改善的臨床終點獲益(“響應(yīng)”)的可能性越高，如例如由ROC(AUC)值和分析指示的。實施例2此實施例描述如本文中定義的“S”組合得分的計算，及其與參與研究NP28679(部分1和2)的患者的響應(yīng)的關(guān)聯(lián)。依照實施例1檢測MDM2陽性CD45dim細(xì)胞的相對量，并通過RT-PCR測量基線時MDM2，XPC，BBC3和CDKN2A的mRNA表達(dá)水平。通過UV吸收對自血液或骨髓分離的總RNA定量。對于每個PCR反應(yīng)，使用固定的總RNA輸入。使用來自RocheMolecularsystems的專有DNA聚合酶實施PCR。該聚合酶能夠逆轉(zhuǎn)錄，所以用一套基因特異性引物在一個反應(yīng)中對RNA實施直接擴(kuò)增和檢測。實時PCR利用技術(shù)及用于擴(kuò)增和檢測靶物和對照核酸的引物和探針。使用3個反應(yīng)孔來檢測4種靶物基因。在每個反應(yīng)孔中包括內(nèi)源對照。使用z480分析儀進(jìn)行擴(kuò)增和檢測。使用機(jī)載的(LC)480軟件為每個熒光通道計算循環(huán)閾值(Cp)。用TMEM55B作為內(nèi)源對照基因進(jìn)行表達(dá)的標(biāo)準(zhǔn)化，其中靶基因(x)的相對表達(dá)水平(濃度)定義為Gx＝2Δ-CPx，其中Δ-Cpx＝Cp(TMEM)–Cpx，且靶基因(x)為MDM2，BBC3，XPC和CDKN2A。然后自基線時(即在治療之前)測量的相對表達(dá)水平(Gx)，乘以在體外觀察到的方向之后的和計算患者的簽名得分，定義為4基因簽名得分S4基因-RT-PCR＝GMDM2+GXPC+GBBC3–GCDKN2A。同樣地，3基因簽名得分定義為S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3–GCDKN2A。對于組合得分“S”的后續(xù)計算，假設(shè)SMDM2-流式表示CD45dim母細(xì)胞群體中具有可檢測的MDM2蛋白表達(dá)的細(xì)胞的百分比。通過組合蛋白質(zhì)表達(dá)測量MDM2SMDM2-流式和基于RT-PCR的4基因簽名得分S4基因-RT-PCR，以下述三種方式計算組合得分“S”：1.S＝S4基因-RT-PCR×SMDM2-流式；2.S＝S4基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；3.S＝S4基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。相似地，假設(shè)3基因簽名得分S3基因-RT-PCR＝GXPC+GBBC3–GCDKN2A，其自得分計算省略GMDM2，以相同方式計算“S”：1.S＝S3基因-RT-PCR×SMDM2-流式；2.S＝S3基因-RT-PCR×log2(SMDM2-流式)；3.S＝S3基因-RT-PCR+log2(SMDM2-流式)。然后通過使用兩樣品Wilcoxon秩和檢驗及經(jīng)由計算分類曲線下面積(AUC)檢驗基于任何上述六種定義的簽名得分是否能顯著區(qū)分響應(yīng)者與非響應(yīng)者，將組合簽名得分“S”與在罹患AML的患者的臨床試驗(NP29679試驗部分1和2)中看到的臨床響應(yīng)關(guān)聯(lián)。結(jié)果顯示于圖4a和4b。關(guān)聯(lián)患者的響應(yīng)與單獨的MDM2，BBC3，XPC和CDKN2A每一項的mRNA表達(dá)水平的比較數(shù)據(jù)顯示于圖5。當(dāng)前第1頁1 2 3