小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法，檢測方法包括以下步驟：（1）對照品溶液的配制；（2）供試品溶液的制備；（3）采用高效液相色譜儀進(jìn)行測定。本發(fā)明能有效表征小兒七星茶制劑的質(zhì)量，有利于監(jiān)控產(chǎn)品的質(zhì)量；具有方法簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好的優(yōu)點；可快速、準(zhǔn)確地鑒別產(chǎn)品的真?zhèn)蝺?yōu)劣。
【專利說明】小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及中藥制劑質(zhì)量控制方法，特別是涉及小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法。
【背景技術(shù)】
[0002]小兒七星茶制劑以中藥材薏苡仁、稻芽、山楂、淡竹葉、鉤藤、蟬蛻、甘草為原料，經(jīng)水提取后，按常規(guī)的制藥工藝制成。具有開胃消滯，清熱定驚的功效，用于小兒積滯化熱，消化不良，不思飲食，煩躁易驚，夜寐不安，大便不暢，小便短赤。小兒七星茶制劑在中華人民共和國衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第九冊中收載有小兒七星茶沖劑(顆粒)、小兒七星茶糖漿，是兒科常用的中藥制劑，深受患者歡迎。現(xiàn)已有小兒七星茶口服液等劑型上市銷售。
[0003]《中華人民共和國藥典》2010年版一部主要采用薄層色譜法鑒別是否含有山楂、甘草，采用高效液相色譜法測定其甘草苷的含量。
[0004]曾常青等在“小兒七星茶沖劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究”，中成藥，2006年03期:報道了采用薄層層析鑒別小兒七星茶沖劑稻芽、山楂、甘草和鉤藤，用反相高效液相測定其鉤藤堿含量的方法。
[0005]肖樹雄等在“小兒七星茶糖漿質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)提高研究”，中成藥，2008年07期，報道了采用薄層色譜法制定小兒七星茶糖漿鉤藤、甘草的薄層色譜鑒別，用高效液相色譜法測定甘草中甘草酸單銨鹽含量的方法。
[0006]李冬等在“HPLC測定小兒七星茶沖劑中槲皮素含量”，中國藥物經(jīng)濟(jì)學(xué)，2012年06期，報道了采用HPLC法測定小兒七星茶沖劑中槲皮素含量的方法。
[0007]以上方法均是對小兒七星茶制劑中個別成分進(jìn)行鑒別或含量測定，對小兒七星茶制劑質(zhì)量控制方法有待進(jìn)一步完善。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]基于此，有必要針對上述問題，提供一種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法。
[0009]具體的技術(shù)方案如下:
[0010]一種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法，采用高效液相色譜進(jìn)行檢測，包括以下步驟:
[0011](I)對照品溶液的配制:
[0012]將甘草苷、綠原酸、芹菜素對照品各取5mg，分別用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液溶解并定容至IOml，搖勻，得對照品溶液；
[0013](2)供試品溶液的制備:
[0014]取小兒七星茶樣品，上大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗脫，棄去水洗液；再用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液洗脫至無色，收集乙醇洗液；將所述乙醇洗液減壓濃縮，微孔濾膜濾過，得供試品溶液；所述小兒七星茶樣品為小兒七星茶糖漿、小兒七星茶口服液或用蒸餾水溶解后的小兒七星茶顆粒；
[0015](3)測定:
[0016]分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定。
[0017]在其中一些實施例中，所述步驟(3)中的高效液相色譜儀的條件為:色譜柱以碳十八烷基硅烷基鍵合硅膠為填料，流動相:體積百分比濃度為0.1%的乙酸水溶液為流動相A,乙腈為流動相B,采用梯度洗脫方式；流速:lmL/min ;檢測波長:254nm。
[0018]本發(fā)明還提供了一種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的構(gòu)建方法，包括以下步驟:
[0019](I)對照品溶液的配制:
[0020]將甘草苷、綠原酸、芹菜素對照品各取5mg，分別用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液溶解并定容至IOml，搖勻，得對照品溶液；
[0021](2)供試品溶液的制備:
[0022]取小兒七星茶樣品，上大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗脫，棄去水洗液；再用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液洗脫至無色，收集乙醇洗液；將所述乙醇洗液減壓濃縮，微孔濾膜濾過，得供試品溶液；所述小兒七星茶樣品為小兒七星茶糖漿、小兒七星茶口服液或用蒸餾水溶解后的小兒七星茶顆粒；
[0023](3)分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定，構(gòu)建指紋圖譜，得到由3個共有特征峰構(gòu)成的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜。
[0024]在其中一些實施例中，所述步驟(3)為:分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定，以甘草苷峰為參照峰，其相對保留時間、相對峰面積為1.0，構(gòu)建得到由3個共有特征峰構(gòu)成的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜。
[0025]在其中一些實施例中，所述步驟(3)中的高效液相色譜儀的條件為:色譜柱以碳十八烷基硅烷基鍵合硅膠為填料，流動相:體積百分比濃度為0.1%的乙酸水溶液為流動相A,乙腈為流動相B,采用梯度洗脫方式；流速:lmL/min ;檢測波長:254nm。
[0026]本發(fā)明相較于現(xiàn)有技術(shù)的優(yōu)點及有益效果為:
[0027]本發(fā)明發(fā)明人經(jīng)過大量實驗以及長久積累的經(jīng)驗，確定了小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法及構(gòu)建方法，并確定了檢測方法及構(gòu)建方法中供試品溶液的制備(如上大孔樹脂柱、用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液洗脫等)以及整個檢測過程及構(gòu)建過程中的最優(yōu)參數(shù)，能有效表征小兒七星茶制劑的質(zhì)量，有利于監(jiān)控產(chǎn)品的質(zhì)量；具有方法簡便、穩(wěn)定、精密度高、重現(xiàn)性好的優(yōu)點；可快速、準(zhǔn)確地鑒別產(chǎn)品的真?zhèn)蝺?yōu)劣。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0028]圖1為小兒七星茶10批次樣品的原始指紋圖譜，其中Sl-SlO分別為10批小兒七星茶樣品，橫坐標(biāo)為保留時間，縱坐標(biāo)為峰高；
[0029]圖2為小兒七星茶樣品的HPLC指紋圖譜，其中，sl_供試品溶液；s2_甘草苷對照品溶液；s3-綠原酸對照品溶液；s4-芹菜素對照品溶液，橫坐標(biāo)為保留時間，縱坐標(biāo)為峰聞;
[0030]圖3為小兒七星茶10批次樣品匹配后的指紋圖譜，其中Sl-SlO分別為10批小兒七星茶樣品，R為:小兒七星茶中等極性成分的對照指紋圖譜，橫坐標(biāo)為:保留時間，縱坐標(biāo)為:峰聞;
[0031]圖4為小兒七星茶中等極性成分的對照指紋圖譜，橫坐標(biāo)為:保留時間，縱坐標(biāo)為:峰聞。
【具體實施方式】
[0032]下面對本發(fā)明的實施例進(jìn)行詳細(xì)說明。
[0033]實施例1
[0034]小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的構(gòu)建
[0035]I儀器與設(shè)備
[0036]島津LC一20AD高效液相色譜儀(島津公司)；
[0037]Sartorius CP22? 分析天平(d=0.0lmg)(德國 Sartorius 公司)；
[0038]Ratavapor R-1I旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀(瑞士步琪公司)；
[0039]SHZ-D (III)循環(huán)水式正空泵(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；
[0040]RTHW電熱套(鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司)；
[0041 ] SK-1快速混勻機(jī)(江蘇金壇市佳美儀器廠);
[0042]2材料與試劑
[0043]小兒七星茶顆粒樣品(由廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司提供)；
[0044]3種黃酮類對照品:甘草苷、綠原酸、芹菜素(中國藥品生物制品檢定所);
[0045]乙醇(分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司)；
[0046]無水乙酸(分析純，天津市致遠(yuǎn)化學(xué)試劑有限公司)；
[0047]乙腈(色譜純，Merk公司)；
[0048]3 方法
[0049]3.1對照品溶液的配制
[0050]將甘草苷、綠原酸、芹菜素對照品各取5mg，精密稱定，分別用少量體積百分比濃度為75%的乙醇溶液溶解于IOml容量瓶中，并定容至刻度，搖勻，即得對照品溶液(包括甘草苷對照品溶液、綠原酸對照品溶液、芹菜素對照品溶液)。
[0051]3.2AB-8大孔樹脂的預(yù)處理
[0052]AB-8大孔樹脂先用體積百分比濃度為95%的乙醇溶液洗至清液，再用蒸餾水洗至無醇味。
[0053]3.3供試品溶液的制備
[0054]取小兒七星茶樣品顆粒3g，用蒸餾水溶解(蒸餾水的用量為足以溶解小兒七星茶樣品顆粒即可)，上AB-8大孔樹脂柱，先用IOOml蒸餾水洗脫，棄去水洗液；再用體積百分比濃度為75%的乙醇溶液洗脫至無色，收集乙醇洗液；將上述乙醇洗液減壓濃縮至10ml，微孔濾膜(0.45 μ m)濾過，即得小兒七星茶供試品溶液。
[0055]3.4色譜條件
[0056]色譜儀:島津高效液相色譜儀
[0057]色譜柱:SymmetryK C18柱(4.6_X250mm,5ym);色譜柱以碳十八燒基娃燒基
鍵合硅膠為填料
[0058]流動相:體積百分比濃度為0.1%的乙酸水溶液(A) —乙腈(B)梯度洗脫[0059]表1流動相的梯度洗脫
[0060]
【權(quán)利要求】
1.一種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，采用高效液相色譜進(jìn)行檢測，包括以下步驟: (1)對照品溶液的配制: 將甘草苷、綠原酸、芹菜素對照品各取5mg，分別用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液溶解并定容至IOml，搖勻，得對照品溶液； (2)供試品溶液的制備: 取小兒七星茶樣品，上大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗脫，棄去水洗液；再用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液洗脫至無色，收集乙醇洗液；將所述乙醇洗液減壓濃縮，微孔濾膜濾過，得供試品溶液；所述小兒七星茶樣品為小兒七星茶糖漿、小兒七星茶口服液或用蒸餾水溶解后的小兒七星茶顆粒； (3)測定: 分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的檢測方法，其特征在于，所述步驟(3)中的高效液相色譜儀的條件為:色譜柱以碳十八烷基硅烷基鍵合硅膠為填料，流動相:體積百分比濃度為0.1%的乙酸水溶液為流動相A，乙腈為流動相B，采用梯度洗脫方式；流速:lmL/min ;檢測波長:254nm。
3.—種小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟: (1)對照品溶液的配制: 將甘草苷、綠原酸、芹菜素對照品各取5mg，分別用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液溶解并定容至IOml，搖勻，得對照品溶液； (2)供試品溶液的制備: 取小兒七星茶樣品，上大孔樹脂柱，先用蒸餾水洗脫，棄去水洗液；再用體積百分比濃度為72-78%的乙醇溶液洗脫至無色，收集乙醇洗液；將所述乙醇洗液減壓濃縮，微孔濾膜濾過，得供試品溶液；所述小兒七星茶樣品為小兒七星茶糖漿、小兒七星茶口服液或用蒸餾水溶解后的小兒七星茶顆粒； (3)分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定，構(gòu)建指紋圖譜，得到由3個共有特征峰構(gòu)成的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟(3)為:分別進(jìn)樣所述對照品溶液、供試品溶液，注入高效液相色譜儀測定，以甘草苷峰為參照峰，其相對保留時間、相對峰面積為1.0，構(gòu)建得到由3個共有特征峰構(gòu)成的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜。
5.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的小兒七星茶中等極性成分指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，所述步驟(3)中的高效液相色譜儀的條件為:色譜柱以碳十八烷基硅烷基鍵合硅膠為填料，流動相:體積百分比濃度為0.1%的乙酸水溶液為流動相A，乙腈為流動相B，采用梯度洗脫方式；流速:lmL/min ;檢測波長:254nm。
【文檔編號】G01N30/02GK103698427SQ201310695971
【公開日】2014年4月2日 申請日期:2013年12月16日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月16日
【發(fā)明者】方廣宏, 鄭榮波, 蘇子仁, 黃曉丹, 彭紹忠 申請人:廣州王老吉藥業(yè)股份有限公司