一種唾液直接檢測(cè)裝置制造方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)了一種唾液直接檢測(cè)裝置，包括檢測(cè)盒、唾液過(guò)濾層和免疫層析檢測(cè)條，所述唾液過(guò)濾層采用多孔性材料并經(jīng)過(guò)化學(xué)處理，唾液過(guò)濾層與免疫層析檢測(cè)條相疊連接，并置于檢測(cè)盒內(nèi)；檢測(cè)盒由底蓋和頂蓋組成，檢測(cè)盒位于唾液過(guò)濾層一端的頂蓋上設(shè)置多個(gè)小孔。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的唾液直接檢測(cè)裝置解決了唾液因粘稠取樣困難的問(wèn)題，唾液無(wú)須取出后再加緩沖液處理后檢測(cè)，操作簡(jiǎn)便、快捷；檢測(cè)盒頂蓋的多孔結(jié)構(gòu)，便于輾轉(zhuǎn)于口腔，刺激口中唾液腺，促進(jìn)唾液的分泌與收集，可用來(lái)檢測(cè)艾滋病毒和毒品。
【專(zhuān)利說(shuō)明】—種唾液直接檢測(cè)裝置
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種唾液檢測(cè)裝置，特別是一種自口腔中直接檢測(cè)艾滋病毒或毒品的直檢裝置，屬于生物領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002]毒品對(duì)社會(huì)以及人的身心都有很大危害，而毒品犯罪也是當(dāng)今國(guó)際社會(huì)的一大公害。其包括母體大麻，大麻(THC)，安非他命(AMP)，甲醛安非他命(M-AMP)，可卡因(C0C)，嗎啡因(M0R)，苯雙氮嗪(BENZ)，天使粉(PCP)，巴比妥(Barb)，二甲基亞硝胺NDMA，尼古丁Cotinin (Nicotine),輕考酮 Oxycodone (0ΧΥ),美沙酮 Methadone (MTD),三醋酸纖維素TCA 等。
[0003]目前市場(chǎng)以檢測(cè)尿液和血液為主，但存在著取樣復(fù)雜、樣品骯臟、侵犯隱私、樣品保真性的懷疑等問(wèn)題，因此一種直接檢測(cè)唾液中毒品便顯得十分重要。唾液檢測(cè)毒品的優(yōu)點(diǎn)包括:1.取樣方便、干凈、衛(wèi)生，樣品不具傳染性，檢測(cè)快速，樣品真實(shí)性高；2.檢測(cè)裝置簡(jiǎn)便，相比組織、毛發(fā)樣本檢測(cè)需要用到ELISA、GC-MS、HPLC等大型儀器成本較低，且適合現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)；3.根據(jù)藥代動(dòng)力學(xué)原理，唾液檢測(cè)到的大部分是藥物本身，相比尿液檢測(cè)的是藥物的代謝產(chǎn)物更為優(yōu)越；4.可節(jié)省大量人力和物力。因此，這種快速的、非侵入性的檢測(cè)手段將受到廣泛應(yīng)用。
[0004]直接從唾液中檢測(cè)微量毒品和傳染性病毒一直是國(guó)際上難題之一，毒品檢測(cè)主要對(duì)象大麻(THC)有兩種化學(xué)結(jié)構(gòu):一為口服后滯留在口腔中的原型(或稱(chēng)母體)大麻Δ -9-THC (分子式為C21H3tlO2,半衰期25-36小時(shí))。食服大麻后，20-30分鐘含量在口腔中迅速下降，并降至20ng/ml并維持4_8小時(shí)，此時(shí)服用者反應(yīng)會(huì)相對(duì)遲鈍。國(guó)際上將20ng/ml Δ -9-THC作為檢查的臨界值。Λ -9-THC經(jīng)人體內(nèi)代謝便改變化學(xué)結(jié)構(gòu)為代謝型ll-nor-9-Carboxy-THC (分子式為C21H28O4,半衰期5.2-6.2天)，而尿液檢測(cè)是檢測(cè)后者。
[0005]同樣的，艾滋病毒的檢測(cè)一般的需采集血樣。具有血樣檢測(cè)靈敏度的非人體侵入型唾液檢測(cè)，為市場(chǎng)青睞。美國(guó)已有獲專(zhuān)利的艾滋病毒的唾液檢測(cè)產(chǎn)品。這種測(cè)試需要收集從嘴里的唾液測(cè)試設(shè)備，然后插入設(shè)備到特定的化學(xué)緩沖讓唾液解散并執(zhí)行測(cè)試。測(cè)試套件包含一個(gè)小瓶的化學(xué)緩沖。測(cè)試程序?qū)嶋H上是兩個(gè)步驟。
[0006]其次，相關(guān)的唾液檢測(cè)裝置，相當(dāng)大部分的唾液根本不能從免疫層析條上流過(guò)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種唾液直接檢測(cè)裝置。
[0008]本發(fā)明的一種唾液直接檢測(cè)裝置，包括檢測(cè)盒、唾液過(guò)濾層和免疫層析檢測(cè)條，所述唾液過(guò)濾層采用多孔性材料并經(jīng)過(guò)化學(xué)處理，唾液過(guò)濾層與免疫層析檢測(cè)條相疊連接，并置于檢測(cè)盒內(nèi)；檢測(cè)盒由底蓋和頂蓋組成，檢測(cè)盒位于唾液過(guò)濾層一端的頂蓋上設(shè)置多個(gè)小孔。
[0009]所述免疫層析檢測(cè)條依次由樣品吸收區(qū)、固相標(biāo)記抗體區(qū)、檢測(cè)區(qū)Τ、對(duì)照區(qū)C和吸水區(qū)組成，唾液經(jīng)過(guò)濾后進(jìn)入免疫層析檢測(cè)條的樣品吸收區(qū)。
[0010]所述的化學(xué)處理可以采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配成的溶液，或洗滌劑配制成的溶液處理、干燥。
[0011]所述的唾液過(guò)濾層優(yōu)先采用玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫。
[0012]所述的檢測(cè)盒的底座采用塑料或其它材料。
[0013]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的唾液直接檢測(cè)裝置解決了唾液因粘稠取樣困難的問(wèn)題，唾液無(wú)須取出后再加緩沖液處理后檢測(cè)，操作簡(jiǎn)便、快捷；檢測(cè)盒頂蓋的多孔結(jié)構(gòu)，便于輾轉(zhuǎn)于口腔，刺激口中唾液腺，促進(jìn)唾液的分泌與收集，可用來(lái)檢測(cè)艾滋病毒和毒品。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0014]圖1是本發(fā)明免疫層析檢測(cè)條圖。
[0015]圖2是本發(fā)明唾液直檢裝置圖。
【具體實(shí)施方式】
[0016]材料來(lái)源及其層析條成份組成:
[0017]1.美國(guó)司泰普公司(STAPLES, SAN DIEGO, CA)生產(chǎn)的IOmil PVC塑料殼，涂以雙面粘膠；
[0018]2.美國(guó)渥特明公司(WHATMAN, FAIRFIELD, NJ)生產(chǎn)的硝基纖維膜；
[0019]3.美國(guó)渥特明公司(WHATMAN, FAIRFIELD, NJ)生產(chǎn)的吸水紙片；
[0020]4.美國(guó)泊樂(lè)-吉樂(lè)明公司(PALL-GELMAN，ANN ARBOR, MD生產(chǎn)的玻璃纖維紙；
[0021]5.HIV 基因蛋白 gp-41-120, gp-36, p-24, (JAJ International, San Diego, CA.)
[0022]6.毒品單克隆抗體和毒品蛋白載體(ARISTA BIOLOGY Inc.,Allentown, PA)
[0023]7.吐溫-20，牛血清白蛋白。
[0024]唾液過(guò)濾層12的制備:在多孔性材料上(玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫)采用化學(xué)(如采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配成的溶液，或洗滌劑配制成的溶液)處理、干燥后使用。
[0025]免疫層析檢測(cè)條13 的制備方法(見(jiàn) ZL 00118669.8，ZL98122892.5, ZL03142460.0):
[0026]1.標(biāo)記抗原的制備:將所需抗原加入所需量膠體金溶液，攪拌十分鐘后，加入1/10體積的l-2wt%牛血清白蛋白液作穩(wěn)定劑，高速離心，取得紅色沉淀物，即標(biāo)記抗體；
[0027]2.將上述沉淀物溶解于緩沖劑中，鋪于玻璃紙上，真空抽干；
[0028]3.包被抗原制備:將與標(biāo)記抗原相對(duì)應(yīng)的另一抗原溶液用噴霧方法劃線(xiàn)于硝基纖維膜上，于37攝氏度烘干20分鐘；
[0029]4.裝配:將上述各組分貼在有膠面的塑料薄板上，上下兩端再貼上吸水紙，切割成條，將制作好的唾液過(guò)濾層12與免疫層析檢測(cè)條13相疊后，再裝入塑料制成的檢測(cè)盒11之中，檢測(cè)盒11位于唾液過(guò)濾層12 —端的頂蓋上設(shè)置多個(gè)小孔，可方便唾液從檢測(cè)盒11頂蓋進(jìn)入唾液過(guò)濾層12中。
[0030]工作原理
[0031]艾滋病毒免疫層析檢測(cè)條13工作原理:待測(cè)唾液經(jīng)過(guò)唾液過(guò)濾層加入免疫層析檢測(cè)條第I區(qū)，液體基于毛細(xì)管現(xiàn)象上升。溶介第2區(qū)的標(biāo)記抗原體。如待測(cè)唾液中有HIV抗體成分，形成標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物，標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物隨液體上升至試驗(yàn)區(qū)(T)，形成“標(biāo)記抗原-HIV抗體-抗原”復(fù)合物而形成一條沉淀線(xiàn)，如使用金標(biāo)抗原則形成一條玫瑰色帶，液體繼續(xù)上升至對(duì)照區(qū)(C)，又形成一條沉淀線(xiàn)。兩條沉淀線(xiàn)即顯示唾液中有HIV抗體的存在。檢測(cè)結(jié)果艾滋病毒感染為陽(yáng)性。如唾液中無(wú)HIV抗體的存在，則試驗(yàn)區(qū)(T)沒(méi)有沉淀線(xiàn)出現(xiàn)。檢測(cè)結(jié)果為陰性。
[0032]毒品免疫層析檢測(cè)條13工作原理:待測(cè)唾液經(jīng)過(guò)濾后進(jìn)入免疫層析檢測(cè)條13的第I區(qū)，液體基于毛細(xì)管現(xiàn)象上升，并溶解第2區(qū)的標(biāo)記抗毒品抗體。如待測(cè)唾液中無(wú)毒品成分，標(biāo)記抗體隨液體上升至第3區(qū)，形成“標(biāo)記抗體-毒品載體蛋白”復(fù)合物而形成一條沉淀線(xiàn)，如使用金標(biāo)記物則形成一條玫瑰色帶，液體繼續(xù)上升至第4區(qū)，又形成“標(biāo)記抗體-抗抗體復(fù)合沉淀線(xiàn)”顯示兩條沉淀線(xiàn)結(jié)果即顯示唾液中無(wú)毒品的存在。如唾液中有毒品存在并其濃度在檢測(cè)臨界值以上，則毒品本身會(huì)競(jìng)爭(zhēng)中和掉標(biāo)記抗體，從而予特定時(shí)間，如5-10分鐘在第3區(qū)不出現(xiàn)任何沉淀線(xiàn)，而顯示唾液中毒品濃度在臨界值以上，檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性。
[0033]唾液過(guò)濾層12的工作原理為:唾液經(jīng)過(guò)濾其中液體活性成分進(jìn)入艾滋病毒或毒品免疫層析檢測(cè)條13，而唾液中粘稠物和細(xì)粒則滯留在唾液過(guò)濾層12中。
[0034]實(shí)例一艾滋病毒唾液直接檢測(cè)裝置
[0035]本實(shí)例使用同類(lèi)型血清用免疫層析檢測(cè)條，加上唾液過(guò)濾層或不加唾液過(guò)濾層對(duì)血清樣品和唾液樣品分別進(jìn)行檢測(cè)。
[0036]應(yīng)用免疫層析檢測(cè)條:HIV-1抗體，HIV-1I抗體，P-24抗體，檢測(cè)結(jié)果如表1所
/示[0037]表1加上唾液過(guò)濾層或不加唾液過(guò)濾層對(duì)血清樣品和唾液樣品的檢測(cè)結(jié)果
檢測(cè)項(xiàng)目不加唾液過(guò)濾層加唾液過(guò)濾層
【權(quán)利要求】
1.一種唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述裝置包括檢測(cè)盒(11 )、唾液過(guò)濾層(12 )和免疫層析檢測(cè)條(13)，所述唾液過(guò)濾層(12)采用多孔性材料并經(jīng)過(guò)化學(xué)處理，所述唾液過(guò)濾層(12)與所述免疫層析檢測(cè)條(13)相疊連接，并置于所述檢測(cè)盒(11)內(nèi)；所述檢測(cè)盒(11)由底蓋和頂蓋組成，所述檢測(cè)盒(11)位于所述唾液過(guò)濾層(12)—端的頂蓋上設(shè)置多個(gè)小孔。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述的免疫層析檢測(cè)條(13)依次由樣品吸收區(qū)、固相標(biāo)記抗體區(qū)、檢測(cè)區(qū)T、對(duì)照區(qū)C和吸水區(qū)組成，唾液經(jīng)過(guò)濾后進(jìn)入免疫層析檢測(cè)條(13)的樣品吸收區(qū)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述的化學(xué)處理是采用0.lwt%的吐溫-20和pH值為7.2磷酸緩沖液配制成的溶液處理、干燥。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述的化學(xué)處理是采用洗滌劑配制成的溶液處理、干燥。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述的唾液過(guò)濾層(12)優(yōu)選采用玻璃纖維、聚乙酯、尼龍或塑料泡沫。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述的檢測(cè)盒(11)的底蓋采用塑料。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于所述檢測(cè)裝置用于艾滋病毒或毒品的檢測(cè)。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的唾液直接檢測(cè)裝置，其特征在于在所述的檢測(cè)盒(11)內(nèi)放置多條免疫層析檢測(cè)條(13)。
【文檔編號(hào)】G01N33/577GK103823059SQ201210468107
【公開(kāi)日】2014年5月28日 申請(qǐng)日期:2012年11月19日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月19日
【發(fā)明者】惟釗·盧, 詹姆斯·儆翊·盧, 胡成龍 申請(qǐng)人:南京路始生物科技有限公司