專利名稱：一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實用新型涉及一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡，是一種檢測丙戊酸鈉的檢測器具，屬于丙戊酸鈉血藥濃度監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
丙戊酸鈉是臨床常用的廣譜抗癲癇藥物，尤其對單純失神發(fā)作、全身性強直-陳攣發(fā)作、肌陳攣發(fā)作療效顯著，對單純部分性發(fā)作、復雜部分性發(fā)作也有良好療效，有效血藥濃度范圍為50-100 μ g/mL。但丙戊酸鈉體內(nèi)過程和療效個體差異大，劑量與血藥濃度的相關(guān)性不穩(wěn)定，且血藥濃度過高易引起惡心、嘔吐及肝功能損害等不良反應(yīng)，因而通過監(jiān)測血藥濃度來調(diào)整劑量，是確保療效和用藥安全的必要手段。測定體內(nèi)丙戊酸鈉血藥濃度最常用的方法為熒光偏振免疫法，也有采用填充柱氣相色譜法，前者需用專用的試劑盒，價格昂貴，也不能分離和排除丙戊酸代謝產(chǎn)物和內(nèi)源性雜質(zhì)的干擾，后者分離效果欠佳、靈敏度低，測定低濃度樣品誤差較大，影響結(jié)果的準確性。 而且這些方法普遍存在操作繁瑣，對實驗儀器設(shè)備要求高，需要專門技術(shù)人員操作等缺點。為此，本實用新型擬發(fā)明一種基于丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物抗原性的免疫學檢測方法，采取免疫學競爭法的原理，結(jié)合膠體金標記技術(shù)和免疫層析法設(shè)計的一種快速檢測試劑，可快速特異地檢測血清中的丙戊酸鈉含量。反應(yīng)是利用丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物抗原性而建立的一種蛋白檢測方法，具有特異性強的優(yōu)點，可避免其它檢測方法的假陽性導致的誤檢問題。同時檢測卡操作簡單快速，無需特殊的儀器設(shè)備，結(jié)果準確，準確率大于95%。
發(fā)明內(nèi)容本實用新型的目的在于提供一種能檢測丙戊酸鈉的檢測器具，應(yīng)用免疫學的方法直接檢測患者血清的丙戊酸鈉含量，克服現(xiàn)有血藥監(jiān)測技術(shù)的缺陷，建立基于免疫學特異性的檢測方法。本實用新型的技術(shù)方案一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡，其為在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼1中設(shè)置測試條2，檢測卡外殼表面有檢測窗孔3和加樣孔4 ；測試條2是由支承背板5上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊8、膠體金膜7、硝酸纖維素膜6、和吸水膜9所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，支承背板一端疊置粘貼吸水膜9，另一端疊置粘貼樣品墊8，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接，在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7 ；膠體金膜為含抗丙戊酸鈉抗體膠體金標記的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有兩條檢測帶和一條質(zhì)控帶，依次是含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測帶10 (靈敏度50 μ g/mL)和檢測帶11 (靈敏度100 μ g/mL)，含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶12，測試條置入檢測卡外殼內(nèi)，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。采用上述丙戊酸鈉快速檢測卡，檢測樣品是癲癇患者的血清樣品。樣品的處理方法是[0009]在患者連續(xù)服藥一周以后，于早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或于-20°C下48h以內(nèi)保存。當檢測帶10、檢測帶11和質(zhì)控帶12同時顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量低于50yg/mL;當檢測帶10不顯示顏色，檢測帶11和質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量高于50 μ g/mL且低于100 μ g/mL ；當檢測帶10、檢測帶11均不顯示顏色，只有質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量高于100 μ g/mL ；當檢測帶10、檢測帶11和質(zhì)控帶12均不顯色，則表明測試條已失效。本實用新型的優(yōu)點是能檢測癲癇患者血清中含有的丙戊酸鈉，易于制備且節(jié)省檢測費用，使用方便，檢測快速，靈敏度高，結(jié)果準確。

圖1 二合一丙戊酸鈉快速檢測卡外殼及測試條在外殼內(nèi)的安置圖。1、外殼，2、測試條，3、檢測窗孔，4、加樣孔。圖2測試條的硝酸纖維素膜上顯示印跡示意圖。6、硝酸纖維素膜，10、靈敏度為 50 μ g/mL的檢測帶，11、靈敏度為100 μ g/mL的檢測帶，12、質(zhì)控帶。圖3 二合一丙戊酸鈉快速檢測卡的檢測試條結(jié)構(gòu)示意圖。5、支承背板，6、硝酸纖維素膜，7、膠體金膜，8、樣品墊，9、吸水膜。
具體實施方式
本實用新型結(jié)合具體實施例參見附圖進一步說明如下實施例1一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡，它是在檢測卡外殼1中設(shè)置測試條2，檢測卡外殼1的結(jié)構(gòu)及測試條2的設(shè)置參見附圖1，檢測卡外殼1為長條扁平薄殼狀外殼，長70mm， 寬20mm，厚5mm，薄殼壁厚1mm，由工程塑料制成。檢測卡外殼1由殼蓋與殼座兩半聯(lián)接構(gòu)成，在檢測卡外殼1殼蓋上有檢測窗孔3和加樣孔4。測試條2放置在檢測卡外殼1的殼座內(nèi)。測試條2是多層結(jié)構(gòu)的窄條薄片，片長約60mm，片寬約4mm，厚度約2. 5mm。測試條2是多層結(jié)構(gòu)底層是支承背板5，為聚氯乙烯塑料薄片，厚約0. 5mm,長60mm，寬4mm ；支承背板5中部疊置粘貼硝酸纖維素膜6，硝酸纖維素膜厚0. 5mm,長20_25mm，寬4mm。硝酸纖維素膜6上有三條間隔開的橫向顯示印跡帶，參見附圖2，三條顯示印跡帶中，其中兩條是靈敏度為50 μ g/mL的檢測帶10及靈敏度為100 μ g/mL的檢測帶11，含不同濃度丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物；另一條是質(zhì)控帶12，含抗兔抗體或抗鼠抗體。支承背板5 —端部上疊置粘貼吸水膜9，支承背板5另一端部上疊置粘貼樣品墊8，吸水膜9內(nèi)端與樣品墊8內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜6 —端搭接，在樣品墊8與硝酸纖維素膜6的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜7，膠體金膜7是含抗丙戊酸鈉單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜。膠體金膜7厚0. 5-0. 8mm,長5_，寬4_。樣品墊8厚0. 5-0. 8mm,長20_， 寬4mm。吸水膜9厚0. 5-0. 8mm,長16_20mm，寬4mm。膠體金膜7、樣品墊8及吸水膜9與硝酸纖維素膜搭接長度為l_2mm。吸水膜9材料是吸水紙，樣品墊8材料是吸水玻璃纖維膜。本實用新型二合一丙戊酸鈉檢測卡用于癲癇患者血清中丙戊酸鈉的檢測。實施例2樣品的處理方法是在患者連續(xù)服藥一周以后，于早晨服藥前抽取靜脈血2mL，3000r/min離心lOmin， 分離血清，立即處理或于-20°C下48h以內(nèi)保存。使用二合一丙戊酸鈉快速檢測卡進行檢測時，先將待檢測的樣品液從加樣孔4中滴注入二合一丙戊酸鈉快速檢測卡測試條2的樣品墊8上，由于虹吸作用原理，帶動待檢測的樣品液及膠體金膜7所含的抗丙戊酸鈉單克隆抗體或多克隆抗體膠體金標記物一起向硝酸纖維素膜6擴散，5-10分鐘內(nèi)觀察結(jié)果。檢測卡的主要反應(yīng)是免疫學的抗原和抗體反應(yīng)，在硝酸纖維素膜上遷移的膠體金標記的抗體，在測試帶上分別與含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物，以及質(zhì)控帶抗兔抗體或抗鼠抗體反應(yīng)，形成棕紅色條帶。若樣品中有待檢丙戊酸鈉存在，當樣品加入后即與抗體發(fā)生反應(yīng)，而不會與檢測帶所含的丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物反應(yīng)，從而不顯色。主要反應(yīng)的結(jié)果有以下4種情況當檢測帶10、檢測帶11和質(zhì)控帶12同時顯現(xiàn)棕紅色印跡帶，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量低于50yg/mL;當檢測帶10不顯示顏色，檢測帶11和質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量高于50 μ g/mL且低于100 μ g/mL ；當檢測帶10、檢測帶11均不顯示顏色，只有質(zhì)控帶12顯現(xiàn)棕紅色印跡，表示被檢測樣品中丙戊酸鈉含量高于100 μ g/mL ；當檢測帶10、檢測帶11和質(zhì)控帶12均不顯色，則表明測試條已失效。
權(quán)利要求1. 一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡，其特征在于在長條扁平薄殼狀的檢測卡外殼 (1)中設(shè)置測試條(2)，檢測卡外殼表面有檢測窗孔(3)和加樣孔(4);測試條(2)是由支承背板(5)上通過不干膠在其上依次粘貼樣品墊(8)、膠體金膜(7)、硝酸纖維素膜(6)、和吸水膜(9)所組成；支承背板中部疊置粘貼硝酸纖維素膜(6)，支承背板一端疊置粘貼吸水膜 (9)，另一端疊置粘貼樣品墊(8)，吸水膜內(nèi)端與樣品墊內(nèi)端各自分別與硝酸纖維素膜搭接， 在樣品墊與硝酸纖維素膜的搭接部，兩者之間夾置粘貼一段膠體金膜(7);硝酸纖維素膜上有兩條檢測帶和一條質(zhì)控帶，依次是檢測帶(10)，靈敏度50 μ g/mL，檢測帶(11 )，靈敏度 100 μ g/mL,及質(zhì)控帶(12)，測試條置入檢測卡外殼內(nèi)，樣品墊正對加樣孔，硝酸纖維素膜正對檢測窗孔。
專利摘要一種二合一丙戊酸鈉快速檢測卡，屬于丙戊酸鈉血藥濃度監(jiān)測技術(shù)領(lǐng)域。本實用新型二合一丙戊酸鈉快速檢測卡外殼內(nèi)有測試條，測試條由支承背板上依次粘貼樣品墊、膠體金膜、硝酸纖維素膜和吸水膜所組成；膠體金膜為含抗丙戊酸鈉抗體膠體金標記物的玻璃纖維膜，硝酸纖維素膜上有三條印跡帶，其中兩條為含丙戊酸鈉蛋白質(zhì)偶聯(lián)物的檢測帶，靈敏度分別為50μg/mL、100μg/mL，另一條為含抗兔抗體或抗鼠抗體的質(zhì)控帶。本實用新型優(yōu)點是應(yīng)用免疫學的方法直接檢測癲癇患者血清中丙戊酸鈉的含量。本實用新型二合一丙戊酸鈉快速檢測卡易于制備，使用方便快速，結(jié)果準確。
文檔編號G01N33/577GK202002932SQ20112002553
公開日2011年10月5日 申請日期2011年1月26日 優(yōu)先權(quán)日2011年1月26日
發(fā)明者吳文曄, 周堅, 熊曉芳 申請人:無錫安迪生物工程有限公司