專利名稱：檢測組氨酸的熒光探針及其前驅(qū)體和它們的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種用于檢測組氨酸的熒光探針及其前驅(qū)體和它們的制備方法。
背景技術(shù)：
組氨酸是基本20中氨基酸之一，對于嬰兒和兒童，組氨酸是人體的必需氨基酸， 待發(fā)育多年后，人體才可以自己合成。組氨酸在人體的生理活動中是至關(guān)重要的。組氨酸支鏈上的咪唑環(huán)是許多金屬蛋白的結(jié)合位點，同時還是一些指定酶的催化中心[Chen， G.N. ；ffu, X. P. ； Duan, J. P. ； Chen, H. Q. Talanta 1999(49) :319-330]。組氨酸可以保持有機體的正常代謝，以及保護神經(jīng)細胞將信息從大腦傳遞給身體的各個部分。但組氨酸在體內(nèi)的含量必須維持在一定的范圍內(nèi)，異常水平的組氨酸通常是一些疾病的先兆，例如慢性腎疾病[Am. J. Clin. Nutr. 2008(87) 1860-1866]，急性肝衰竭[Am. J. Pathol.，2010 (176) 1400-1408]，類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎[J. Clin. Invest. , 1975 (55) :1164-1173]等。因此研究開發(fā)組氨酸檢測方法是非常有必要的。組氨酸的檢測方法有很多，包括循環(huán)伏安法、紫外可見分光光度法、熒光分析法， 還有利用金屬發(fā)光等。這些已見報道的測試方法中，由于熒光分析法高靈敏性，簡便性和經(jīng)濟性，越來越多的受到人們的關(guān)注和重視。Czarnik課題組早在1995年就提出了熒光傳感檢測氨基酸的重要性與緊迫性 [Chem.Biol. 1995(2) :423-428] 0在隨后幾年中，許多的課題組設(shè)計合成了一系列用于檢測組氨酸的熒光探針[J. Chem. Soc.，Chem. Commun. , 1995,2439 ；Chem. Commun. 1997， 581-582 J. Am. Chem. Soc. 2005 (127) :3362-3365等]。但這些探針由于合成比較困難，或者由于量子產(chǎn)率低，熒光發(fā)射波長短等劣勢，限制了這些探針的廣泛應(yīng)用。因此，本發(fā)明主要希望通過簡單的合成步驟，設(shè)計新型的，波長相對較長或者量子產(chǎn)率高的熒光探針。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的之一在于，提供一種用于制備檢測組氨酸熒光探針的前驅(qū)體；本發(fā)明的目的之二在于，提供一種檢測組氨酸的熒光探針；本發(fā)明的目的之三在于，提供一種制備上述前驅(qū)體和熒光探針的方法。本發(fā)明所提供的用于制備檢測組氨酸熒光探針的前驅(qū)體，其為式I或式II所示的化合物
權(quán)利要求
1.一種用于制備檢測組氨酸熒光探針的前驅(qū)體，其為式I或式II所示的化合物
2.一種以權(quán)利要求1所述前驅(qū)體為配體的、用于檢測組氨酸的熒光探針，其為式Ia或式nb所示的化合物
3.一種制備權(quán)利要求2所述熒光探針的方法，其主要步驟是以4-溴-5-硝基-1， 8-萘二酸酐為原料，與正丁胺反應(yīng)，得中間體Al ；中間體Al與N-叔丁氧羰基-乙二胺反應(yīng)，得中間體A2 ；中間體A2與2-氨甲基吡啶反應(yīng)，得式I所示的化合物；式I所示的化合物與銅鹽反應(yīng)，得式Ia所示化合物；或，以7-羥基香豆素為原料，與醋酐反應(yīng)，得中間體Bl ；中間體Bl與三氟乙酸反應(yīng)，得中間體B2 ；中間體B2與組氨酸甲酯反應(yīng)得式II所示的化合物；式II所示的化合物與鎳鹽反應(yīng)，得式nb所示化合物；
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，其中所述的銅鹽是Cu(C104)2。
5.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，其中所述的鎳鹽是Ni(C104)2。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于檢測組氨酸的熒光探針及其前驅(qū)體和它們的制備方法。本發(fā)明分別采用萘酰亞胺或7-羥基香豆素為熒光團，制備了兩種熒光探針的前驅(qū)體，再分別與金屬絡(luò)合獲得能用于檢測組氨酸的熒光探針。在結(jié)合組氨酸后，熒光探針I(yè)a在476nm處的熒光略有增強，537nm處的熒光會有明顯的增強；而熒光探針I(yè)Ib在454nm處的熒光明顯增強。此外，本發(fā)明所提供的熒光探針還具有(1)具有良好的水溶性，能適用于生物體系的組氨酸檢測；(2)穩(wěn)定性高，能長期保存使用，適用于中性、弱酸性和弱堿性等多種環(huán)境體系；(3)具有很高的靈敏度，且抗干擾(與其它氨基酸作用產(chǎn)生的干擾很小)等優(yōu)點。
文檔編號G01N21/64GK102516229SQ20111035559
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月11日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月11日
發(fā)明者張沈裔, 徐玉芳, 朱維平, 楊泱泱, 錢旭紅 申請人:華東理工大學(xué)