專利名稱：一種測定硫酸慶大霉素的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及硫酸慶大霉素的測定方法，特別是四羧基鋁酞菁褪色分光光度法測定 硫酸慶大霉素的方法。
背景技術：
硫酸慶大霉素(Gentamycinsulfate，GEN)屬氨基糖苷類抗生素，具有水溶性好、 抗菌譜廣、細菌耐藥性低、血漿蛋白結合率低、用藥方便和價格便宜等優(yōu)點，是臨床上常用 的抗感染藥物，但這類抗生素對耳、腎有一定的毒性，臨床使用時需嚴格控制劑量，因此對 硫酸慶大霉素的定量測定具有非常重要的意義。這類抗生素的含量測定多采用微生物法， 但這種方法繁瑣、費時、費用高，不適于快速檢測。此外的測定方法還有高效液相色譜法、熒 光法和分光光度法等。由于分光光度法具有方法簡便、分析精度高、重復性好、可測范圍廣、 儀器價廉等優(yōu)點，是藥物分析中應用較多的一類方法。四羧基鋁酞菁(AlC4Pc)是一種性能 優(yōu)異、對光和熱有較好穩(wěn)定性的物質，作為光度試劑可測定蛋白質，但目前應用四羧基鋁酞 菁為指示物，以褪色分光光度法測定硫酸慶大霉素的方法尚未見報道。

發(fā)明內容
本發(fā)明的目的是提供一種四羧基鋁酞菁褪色分光光度法測定硫酸慶大霉素的方 法。具體步驟為于IOmL 比色管中依次加入 0. 1,0. 2,0. 5,1. 0,2. 0,2. 5mL 8 11 μ g/mL 的硫酸慶 大霉素溶液，0. 05 1. 5mL ρΗ6· 6的克拉克-魯布斯(Clark-Lub's C-L)緩沖溶液，0. 5 2. OmL 0. 9 1. 1 X lO^mol/L的四羧基鋁酞菁溶液，以不加硫酸慶大霉素的溶液為試劑空 白，二次蒸餾水定容至刻度，搖勻。于紫外可見分光光度計上，用Icm比色皿，以二次蒸餾水 為參比，在波長690nm處分別測定含硫酸慶大霉素溶液的吸光度值A69tlnm和試劑空白的吸光 度值Atl，計算吸光度差值AA69tlnm = Atl-A69tlnm值，其吸光度差值AA69tlnm與硫酸慶大霉素濃度 C在0. 1 2. 5 μ g/mL范圍內成線性關系，線性回歸方程為=AA690nm = 0. 2896C+0. 0052，相 關系數0. 9998，檢出限0. 087 μ g/mL ；另取硫酸慶大霉素注射液1 2mL，稀釋后同法測定 吸光度值，計算出硫酸慶大霉素注射液中硫酸慶大霉素的含量。本發(fā)明測定方法靈敏度高、選擇性好、簡便、快捷、儀器價廉。


附圖為本發(fā)明實施例空白與1. 0 μ g/mL硫酸慶大霉素的紫外吸收光譜圖。圖中標記 a 空白；b :1· 0 μ g/mL GEN_pH6. 6C-L-1. 0 X 10_5mol/L AlC4Pc。
具體實施例方式實施例
于IOmL比色管中依次加入0. 1,0. 2,0. 5,1. 0,2. 0,2. 5mL 10 μ g/mL的硫酸慶大霉 素溶液，0. 5mL pH6. 6 的克拉克-魯布斯(Clark-Lub，s，C-L)緩沖溶液，ImL 1. 0 X 10_4mol/L 的四羧基鋁酞菁溶液，以不加硫酸慶大霉素的溶液為試劑空白，二次蒸餾水定容至刻度，搖 勻。于紫外可見分光光度計上，用Icm比色皿，以二次蒸餾水為參比，在波長690nm處分別測 定含硫酸慶大霉素溶液的吸光度值A69tlnm和試劑空白的吸光度值Atl，計算吸光度差值AA69tlnm = Aci-A69cinm值，其吸光度差值AA69tlnm與硫酸慶大霉素濃度C的線性回歸方程為AA69tlnm = 0. 2896C+0. 0052，相關系數0. 9998，檢出限0. 087 μ g/mL ；另取三批硫酸慶大霉素注射液各 一支，各自取ImL分別放入IOOmL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。各取2. 5mL分別放入 IOOmL容量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻。分別取ImL上述溶液進行測定，并進行回收率實 驗，結果見表1。表1硫酸慶大霉素注射液測定結果(n = 5)
權利要求
1. 一種測定硫酸慶大霉素的方法，其特征在于具體步驟為于IOmL比色管中依次加入 0. 1、0. 2、0. 5、1. 0、2. 0、2. 5mL 8 11 μ g/mL 的硫酸慶大霉素溶液，0. 05 1. 5mL pH6. 6 的 克拉克-魯布斯緩沖溶液，0. 5 2. OmL 0. 9 1. lX10_4mol/L的四羧基鋁酞菁溶液；以不 加硫酸慶大霉素的溶液為試劑空白，二次蒸餾水定容至刻度，搖勻；于紫外可見分光光度計 上，用Icm比色皿，以二次蒸餾水為參比，在波長690nm處分別測定含硫酸慶大霉素溶液的 吸光度值A69tlnm和試劑空白的吸光度值Atl，計算吸光度差值Δ A690nm = A0-A690nm值，其吸光度 差值Δ A690nm與硫酸慶大霉素濃度C在0. 1 2. 5 μ g/mL范圍內成線性關系，線性回歸方程 為Δ A690nm = 0. 2896C+0. 0052，相關系數0. 9998，檢出限0. 087 μ g/mL ；另取硫酸慶大霉素 注射液1 2mL，稀釋后同法測定吸光度值，計算出硫酸慶大霉素注射液中硫酸慶大霉素的 含量。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種測定硫酸慶大霉素的方法。于10mL比色管中依次加入0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、2.5mL 8～11μg/mL的硫酸慶大霉素溶液，0.05～1.5mLpH6.6的克拉克-魯布斯緩沖溶液，0.5～2.0mL 0.9～1.1×10-4mol/L的四羧基鋁酞菁溶液；以不加硫酸慶大霉素的溶液為試劑空白，二次蒸餾水定容至刻度，搖勻；于紫外可見分光光度計上，用1cm比色皿，以二次蒸餾水為參比，在波長690nm處分別測定含硫酸慶大霉素溶液的吸光度值A690nm和試劑空白的吸光度值A0，計算吸光度差值ΔA690nm＝A0-A690nm值；另取硫酸慶大霉素注射液1～2mL，稀釋后同法測定吸光度值，計算出硫酸慶大霉素注射液中硫酸慶大霉素的含量。本發(fā)明測定方法靈敏度高、選擇性好、簡便、快捷、儀器價廉。
文檔編號G01N21/27GK102128796SQ20101057990
公開日2011年7月20日 申請日期2010年12月7日 優(yōu)先權日2010年12月7日
發(fā)明者凌悅菲, 唐寧莉, 楊蘭玲, 蒙興龍 申請人:桂林理工大學