專利名稱：一種治療痛經(jīng)的藥物組合物及制備方法和檢測(cè)方法
一種治療痛經(jīng)的藥物組合物及制備方法和檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明為分案申請(qǐng)，原案申請(qǐng)?zhí)枮?00710064062. 9，原案申請(qǐng)日為2007年2月沈日，原案名稱為一種治療痛經(jīng)的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。發(fā)明領(lǐng)域
本發(fā)明涉及一種藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法，特別涉及一種治療痛經(jīng) 的藥物組合物及制備方法和質(zhì)量控制方法。
背景技術(shù)：
痛經(jīng)是指婦女在經(jīng)期及其前后，出現(xiàn)小腹或腰部疼痛，甚至痛及腰骶。每隨月經(jīng) 周期而發(fā)，嚴(yán)重者可伴惡心嘔吐、冷汗淋漓、手足厥冷，甚至昏厥，給工作及生活帶來(lái)嚴(yán)重影 響。目前臨床常將其分為原發(fā)性和繼發(fā)性兩種，原發(fā)性痛經(jīng)多指生殖器官無(wú)明顯病變者，故 又稱功能性痛經(jīng)，多見(jiàn)于青春期少女、未婚及已婚未育者。原因多為精神緊張、感覺(jué)過(guò)敏；體 質(zhì)較弱也易產(chǎn)生痛經(jīng)，提高體質(zhì)后能緩解癥狀；由于子宮位置不良、盲目細(xì)小造成經(jīng)血儲(chǔ)留 也是痛經(jīng)的常見(jiàn)原因，此種痛經(jīng)在正常分娩后疼痛多可緩解或消失。繼發(fā)性痛經(jīng)則多因生 殖器官有器質(zhì)性病變所致，其中子宮內(nèi)膜異位癥最為多見(jiàn)。本病屬婦科臨床的常見(jiàn)病，據(jù)有 關(guān)調(diào)查表明，痛經(jīng)的發(fā)病率為33. 19%。
目前，目前治療痛經(jīng)多采用止痛等西藥治療，長(zhǎng)期每月服藥，不僅易使機(jī)體產(chǎn)生抗 藥性及成癮性，而且還會(huì)使肝、腎、胃等器官產(chǎn)生病變，副作用十分明顯。發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于提供一種藥物組合物；本發(fā)明另一目的在于提供一種治療痛經(jīng)的 藥物組合物；本發(fā)明的第三個(gè)目的在于提供該藥物組合物的制備方法；本發(fā)明的第四個(gè)目 的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明的第四個(gè)目的在于提供該藥物組合物的質(zhì)量控制方法。
本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成為丹參600-900重量份、赤芍400-600重量份、 香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量份、蒲黃200-400重量份、延胡索(醋 制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂枝200-400重量份、桃仁200-400重 量份、木香400-800重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成還可以為丹參600-900重量份、赤芍400-600重 量份、香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量份、蒲黃200-400重量份、延胡索 (醋制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂枝200-400重量份、紅花200-400 重量份、烏藥400-800重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參601-730重量份、赤芍520-599重 量份、香附(醋制)401-480重量份、玫瑰花520-599重量份、蒲黃201-280重量份、延胡索 (醋制)520-599重量份、五靈脂(制)201-280重量份、桂枝320-399重量份、紅花20H80重量份、烏藥620-799重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參670重量份、赤芍560重量份、香附 (醋制)440重量份、玫瑰花560重量份、蒲黃240重量份、延胡索(醋制)560重量份、五靈 脂(制)240重量份、桂枝360重量份、紅花240重量份、烏藥660重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參720重量份、赤芍530重量份、香附 (醋制)470重量份、玫瑰花530重量份、蒲黃270重量份、延胡索(醋制)530重量份、五靈 脂(制)270重量份、桂枝330重量份、紅花270重量份、烏藥630重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參780-899重量份、赤芍401-480重 量份、香附(醋制)520-599重量份、玫瑰花401-480重量份、蒲黃320-399重量份、延胡索 (醋制)401-480重量份、五靈脂(制)320-399重量份、桂枝201-280重量份、紅花320-399 重量份、烏藥401-580重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參840重量份、赤芍440重量份、香附 (醋制)560重量份、玫瑰花440重量份、蒲黃360重量份、延胡索(醋制)460重量份、五靈 脂(制)360重量份、桂枝240重量份、紅花360重量份、烏藥490重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參790重量份、赤芍470重量份、香附 (醋制)530重量份、玫瑰花470重量份、蒲黃330重量份、延胡索(醋制)470重量份、五靈 脂(制)330重量份、桂枝270重量份、紅花330重量份、烏藥570重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參740-760重量份、赤芍490-510重 量份、香附(醋制)490-510重量份、玫瑰花490-510重量份、蒲黃290-310重量份、延胡索 (醋制)490-510重量份、五靈脂(制)290-310重量份、桂枝290-310重量份、紅花290-310 重量份、烏藥590-610重量份。
本發(fā)明藥物組合物的原料藥組成優(yōu)選為丹參750重量份、赤芍500重量份、香附 (醋制)500重量份、玫瑰花500重量份、蒲黃300重量份、延胡索(醋制)500重量份、五靈 脂(制)300重量份、桂枝300重量份、紅花300重量份、烏藥600重量份。
取上述組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括 但不限于濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干 粉針劑。
本發(fā)明藥物組合物制備方法為以上十味，加水煎煮1-3次，每次加4-10倍量水煎 煮1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至80-85°C相對(duì)密度1. 05-1. 13，加入乙醇使含醇量 為40% -60%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至80-85°C相對(duì)密度1. 15-1. 2的清膏；加 入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的制劑。
本發(fā)明藥物組合物制備方法優(yōu)選為以上十味，加水煎煮2次，第一次加8倍量水 煎煮2小時(shí)，第二次加6倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至80-85°C相對(duì)密 度1.08-1. 10，加入乙醇使含醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至80-85°C相 對(duì)密度1. 16-1. 18的清膏；加入適量蔗糖及糊精，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的口服固體制 劑。
本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或 幾種
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；10-20 75-95比例的乙腈一水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算 應(yīng)不低于2600 ； 對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品Ι-lOmg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解 并稀釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物制劑裝量差異下顆粒適量，研細(xì)，精密 稱取約0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率 40KHZ的超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖 勻，上清液用0. 45um微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得；相當(dāng)于生藥含量0. 5-1. 5%的本發(fā)明藥物組合物制劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)， 不得少于8. Omg ；鑒別方法Α、取相當(dāng)于生藥含量1-10%。的制劑內(nèi)容物，加0. 醋酸的60-80%乙 醇溶液20ml，置水浴上加熱4-6分鐘，濾過(guò)，濾液揮散乙醇后，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml 使溶解，濾過(guò)，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發(fā)生紅棕色沉淀；B、取相當(dāng)于生藥含量1-10%。的制劑內(nèi)容物，加水10ml，加0. 5-2. 5倍量的乙醇，攪 拌，靜置，濾過(guò)，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過(guò)，取濾液Iml加草酸試液2 3滴， 產(chǎn)生黃棕色沉淀；C、取相當(dāng)于生藥含量1_10%。的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加水40_60ml溶解，濾過(guò)， 濾液用水飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次10-20ml，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?0. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img 的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品溶液1 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以6-10 3-7 0.6-1.0比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為 展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以0.5-1.5 0.5-1.5比例的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶 液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍(lán)色 斑點(diǎn)；D、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加乙醇10_30ml，回流提取20_40分鐘， 放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對(duì)照藥 材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品藥材溶液 1 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以1-5 1-5 0.5-1.5比例的甲苯-甲酸乙酯-甲 酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試 品色譜中，在與對(duì)照品藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； E、取相當(dāng)于生藥含量2 %的制劑內(nèi)容物，加70-90 %乙醇40_60ml，回流提取20_40 分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，加氨試液使成堿性，加乙醚提取二次， 每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙 素對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供 試品溶液5μ 1、對(duì)照品溶液2μ 1，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板 上，以4-8 2-6 0. 1-0.3比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾 干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的
F、取相當(dāng)于生藥含量的制劑內(nèi)容物，加乙醇30_50ml，浸泡0. 5-1. 5小時(shí)，時(shí) 時(shí)振搖，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3ml使溶解，置于已處理好的200目，2g，內(nèi)徑10 15mm的氧化鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供 試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層 色譜法試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠 G薄層板上，以20-60 3-7 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展 開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中， 在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
本發(fā)明藥物組合物質(zhì)量控制方法優(yōu)選如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或 幾種
含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 15 85比例的乙腈一水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低 于 2600 ；
對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并 稀釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；
供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物制劑裝量差異下顆粒適量，研細(xì)，精密 稱取約0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60 %甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率 40KHZ的超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖 勻，上清液用0. 45um微孔濾膜濾過(guò)，即得；
測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測(cè)定，即 得；
相當(dāng)于生藥含量1 %的本發(fā)明藥物組合物制劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少 于 8. Omg ；
鑒別方法Α、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加0. 醋酸的70%乙醇溶液 20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過(guò)，濾液揮散乙醇后，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶解，濾 過(guò)，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發(fā)生紅棕色沉淀；
B、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加水10ml，加1. 5倍量的乙醇，攪拌，靜 置，濾過(guò)，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過(guò)，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產(chǎn)生黃 棕色沉淀；
C、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加水50ml溶解，濾過(guò)，濾液用水飽 和的乙酸乙酯萃取兩次，每次15ml，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供 試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液； 照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板 上，以8 5 0.8比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1 1 比例的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍(lán)色斑點(diǎn)；
D、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾 過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品藥材溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同 一硅膠G薄層板上，以3 3 1比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出， 晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照品藥材色 譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；E、取相當(dāng)于生藥含量2%的制劑內(nèi)容物，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘， 放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，加氨試液使成堿性，加乙醚提取二次，每次 20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì) 照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品 溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以 6:4: 0.2比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫 外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、取相當(dāng)于生藥含量的制劑內(nèi)容物，加乙醇40ml，浸泡1小時(shí)，時(shí)時(shí)振搖，濾 過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，置于已處理好的200目，2g，內(nèi)徑10 15mm的氧化 鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液 ’另 取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸 取上述二種溶液各4μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以 400 5 10 0.2比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴 以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位 置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。本發(fā)明藥物組合物丹參活血化瘀止痛為君藥；赤芍清熱涼血、散瘀止痛，香附、玫 瑰花、元胡行氣散瘀止痛，五靈脂、桃仁活血散瘀止痛，共為臣藥；木香辛溫散寒，蒲黃、桂枝 溫經(jīng)止血，共為佐藥。全方配伍活血化瘀，理氣止痛，治療痛經(jīng)有著很好的功效，尤其適宜治 療氣滯血瘀所致痛經(jīng)。本發(fā)明藥物組合物經(jīng)實(shí)驗(yàn)研究證實(shí)有顯著的抑制冰醋酸所引起的 扭體反應(yīng)效果；顯著提高PGF2a類似物所至的子宮痙攣性收縮的拮抗和阻斷作用；使子宮平 滑肌收縮幅度下降，張力下降，頻率降低，其張力可逐漸恢復(fù)；對(duì)氯前列烯醇及縮宮素所致 子宮平滑肌有明顯抑制作用。本發(fā)明組合物相比現(xiàn)有制劑痛經(jīng)寶顆粒具備很好的藥效，并且本發(fā)明所述的范圍 在可以實(shí)現(xiàn)本發(fā)明藥效的同時(shí)，經(jīng)過(guò)篩選，意外的發(fā)現(xiàn)，在組合物的某些范圍內(nèi)，具備更為 突出的藥效。本發(fā)明所提供的中藥組合物的質(zhì)量控制方法，是通過(guò)大量具體創(chuàng)造性試驗(yàn)篩選后 得到，鑒別方法中通過(guò)對(duì)樣品處理方法的篩選，展開(kāi)劑的選擇，使得鑒別專屬性很好，而且 方法經(jīng)濟(jì)適用、結(jié)果快速，并且對(duì)不同的薄層板都能應(yīng)用。含量測(cè)定方法中通過(guò)對(duì)樣品、供 試品處理方法的篩選，展開(kāi)劑的選擇，使得含量測(cè)定方法可以很有效的對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行質(zhì)量控 制，并且用該方法測(cè)定的產(chǎn)品相比其他方法測(cè)定的產(chǎn)品在藥效上表現(xiàn)的更為穩(wěn)定。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。藥物組對(duì)正常子宮平滑肌收縮影響的藥效學(xué)試驗(yàn)藥物組I (丹參670g、赤芍560g、香附(醋制)440g、玫瑰花560g、蒲黃240g、延胡 索(醋制)560g、五靈脂(制)240g、桂枝360g、紅花240g、烏藥660g)藥物組II (丹參720g、赤芍530g、香附(醋制)470g、玫瑰花530g、蒲黃270g、延胡索(醋制)530g、五靈脂(制)270g、桂枝330g、紅花270g、烏藥630g)
藥物組III (丹參750g、赤芍500g、香附(醋制)500g、玫瑰花500g、蒲黃300g、延胡 索(醋制)500g、五靈脂(制)300g、桂枝300g、桃仁300g、木香600g)
藥物組IV (丹參750g、赤芍500g、香附(醋制)500g、玫瑰花500g、蒲黃300g、延胡 索(醋制)500g、五靈脂(制)300g、桂枝300g、紅花300g、烏藥600g)，
對(duì)照組市售的痛經(jīng)寶顆粒
選健康未孕雌性大鼠60只，分成6組，實(shí)驗(yàn)前0. aiig/100g皮下注射乙烯雌酚，每 天1次，注射3天后，用乙醚吸入麻醉迅速剖取子宮，剪取子宮2cm，將其置于盛有30ml， 洛氏液的小槽內(nèi)，連于傳感器上，水浴保持(36士0. 5) 由通氣鉤向槽內(nèi)通入氧氣，用 MS-302多媒體化生物信號(hào)記錄分析系統(tǒng)記錄正常收縮曲線，然后加入不同藥物組藥物，觀 察給藥前后子宮收縮的頻率、幅度和子宮活動(dòng)力(頻率和幅度的乘積，進(jìn)行對(duì)比，結(jié)果見(jiàn)表 1
表1各組藥物對(duì)正常子宮平滑肌收縮的影響( ± SD )
權(quán)利要求
1.一種治療痛經(jīng)的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為丹參 600-900重量份、赤芍400-600重量份、香附(醋制)400-600重量份、玫瑰花400-600重量 份、蒲黃200-400重量份、延胡索(醋制)400-600重量份、五靈脂(制)200-400重量份、桂 枝200-400重量份、桃仁200-400重量份、木香400-800重量份。
2.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物，其特征在于該藥物組合物的原料藥組成為丹參750重量份、赤芍500重量份、香附(醋制)500重量份、玫瑰花500重量份、蒲黃300重量份、延胡索(醋制)500重量份、五靈脂(制)300重量份、桂枝300重量份、桃仁300 重量份、木香600重量份。
3.如權(quán)利要求1所述的藥物組合物的制備方法，其特征在于該方法為以上十味，加 水煎煮1-3次，每次加4-10倍量水煎煮1-3小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至80-85°C相 對(duì)密度1.05-1. 13，加入乙醇使含醇量為40% -60%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至 80-85°C相對(duì)密度1. 15-1. 2的清膏；加入常規(guī)輔料，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接受的制劑。
4.如權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于該方法為以上十味，加水煎煮2次，第一 次加8倍量水煎煮2小時(shí)，第二次加6倍量水煎煮1. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至 80-85°C相對(duì)密度1.08-1. 10，加入乙醇使含醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃 縮至80-85°C相對(duì)密度1. 16-1. 18的清膏；加入適量蔗糖及糊精，經(jīng)常規(guī)方法，制成臨床接 受的口服固體制劑。
5.如權(quán)利要求1或2所述的藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中的一種或幾種含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑； 10-20 75-95比例的乙腈一水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算 應(yīng)不低于2600 ；對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品Ι-lOmg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀 釋至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物制劑裝量差異下顆粒適量，研細(xì)，精密稱取約 0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ的 超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，上清 液用0. 45um微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；相當(dāng)于生藥含量0. 5-1. 5%的本發(fā)明藥物組合物制劑含赤芍以芍藥苷C23H28O1J+，不得 少于8. Omg ；鑒別方法Α、取相當(dāng)于生藥含量1-10%。的制劑內(nèi)容物，加0. 醋酸的60-80%乙醇溶 液20ml，置水浴上加熱4-6分鐘，濾過(guò)，濾液揮散乙醇后，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶 解，濾過(guò)，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發(fā)生紅棕色沉淀；B、取相當(dāng)于生藥含量1_10%。的制劑內(nèi)容物，加水10ml，加0.5-2. 5倍量的乙醇，攪拌， 靜置，濾過(guò)，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過(guò)，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產(chǎn)生 黃棕色沉淀；C、取相當(dāng)于生藥含量1_10%。的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加水40-60ml溶解，濾過(guò)，濾液用水 飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次10-20ml，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì) 照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠 G薄層板上，以6-10 3-7 0.6-1.0比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取 出，晾干，噴以0. 5-1. 5 0. 5-1. 5比例的2%三氯化鐵_1 %鐵氰化鉀溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn) 清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍(lán)色斑點(diǎn)；D、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加乙醇10-30ml，回流提取20-40分鐘，放冷， 濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖?. 5-1. 5ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對(duì)照藥材2g，同 法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品藥材溶液1 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以1-5 1-5 0.5-1.5比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液 為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜 中，在與對(duì)照品藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；E、取相當(dāng)于生藥含量2%的制劑內(nèi)容物，加70-90%乙醇40-60ml，回流提取20-40分 鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，加氨試液使成堿性，加乙醚提取二次，每 次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素 對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品 溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以 4-8 2-6 0. 1-0.3比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置 365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、取相當(dāng)于生藥含量1%的制劑內(nèi)容物，加乙醇30-50ml，浸泡0. 5-1. 5小時(shí)，時(shí)時(shí)振 搖，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状糽_3ml使溶解，置于已處理好的200目，2g，內(nèi)徑10 15mm 的氧化鋁柱上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶 液；另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法 試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層 板上，以20-60 3-7 5-15 0. 1-0. 3比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開(kāi)齊IJ， 展開(kāi)，取出，晾干，噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與 對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
6.如權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和/或含量測(cè)定中 的一種或幾種含量測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；15 85 比例的乙腈一水為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于沈00 ；對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋 至刻度，搖勻，用0. 45 μ m微孔濾膜濾過(guò)，即得，每Iml中含芍藥苷50ug ；供試品溶液的制備取本發(fā)明藥物組合物制劑裝量差異下顆粒適量，研細(xì)，精密稱取約 0. 3g，置具塞錐型瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，功率250W，頻率40KHZ的 超聲處理30分鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，上清 液用0. 45um微孔濾膜濾過(guò)，即得；測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；相當(dāng)于生藥含量的本發(fā)明藥物組合物制劑含赤芍以芍藥苷C23H28O11計(jì)，不得少于 8. Omg ；鑒別方法A、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加0. 醋酸的70%乙醇溶液 20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過(guò)，濾液揮散乙醇后，加稀鹽酸Iml，攪拌，加水6ml使溶解，濾 過(guò)，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發(fā)生紅棕色沉淀；B、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加水10ml，加1.5倍量的乙醇，攪拌，靜置，濾 過(guò)，濾液置水浴上加熱揮盡乙醇，放冷，濾過(guò)，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產(chǎn)生黃棕色 沉淀；C、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，研細(xì)，加水50ml溶解，濾過(guò)，濾液用水飽和的 乙酸乙酯萃取兩次，每次15ml，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品 溶液；另取原兒茶醛對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄 層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以 8:5: 0.8比例的苯-乙酸乙酯-甲酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以1 1比例 的2%三氯化鐵-1%鐵氰化鉀溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍(lán)色斑點(diǎn)；D、取相當(dāng)于生藥含量5%。的制劑內(nèi)容物，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過(guò)， 濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取蒲黃對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照 藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品藥材溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同一 硅膠G薄層板上，以3 3 1比例的甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾 干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，365nm紫外燈下觀察；供試品色譜中，在與對(duì)照品藥材色譜 相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；E、取相當(dāng)于生藥含量2%的制劑內(nèi)容物，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘，放冷， 濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀甀Oml使溶解，加氨試液使成堿性，加乙醚提取二次，每次20ml， 合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取延胡索乙素對(duì)照 品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取供試品溶 液5μ1、對(duì)照品溶液2μ1，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以 6:4: 0.2比例的正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫 外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；F、取相當(dāng)于生藥含量1%的制劑內(nèi)容物，加乙醇40ml，浸泡1小時(shí)，時(shí)時(shí)振搖，濾過(guò)，濾 液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，置于已處理好的200目，2g，內(nèi)徑10 15mm的氧化鋁柱 上，以甲醇30ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液；另取 芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸 取上述二種溶液各4μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以 40 5 10 0.2比例的氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以 5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置 上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。
7. 一種治療痛經(jīng)的藥物組合物的檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別方法和含量測(cè)定所述藥物組合物的制備方法為丹參750g赤芍500g 香附(醋制)500g玫瑰花500g蒲黃300g 延胡索(醋制)500g五靈脂(制)300g 桂枝300g 紅花300g烏藥600g ；以上十味，加水煎煮二次，第一次加8倍量水煎煮2小時(shí)，第二次加6倍量水 煎煮1.5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.08-1. 10(80-85°C )，加入乙醇使含 醇量為50%，攪勻，靜置，取上清液收乙醇，濃縮至相對(duì)密度1. 16-1. 18 (80-850C )的清膏， 加入適量蔗糖及糊精，干燥，制粒，制成lOOOg，即得；鑒別(1)取本品5g，加0.醋酸的70%乙醇溶液20ml，置水浴上加熱5分鐘，濾過(guò)，濾液揮 散乙醇后，加稀鹽酸1ml，攪拌，加水6ml使溶解，濾過(guò)，濾液滴加碘化鉍鉀試液，即發(fā)生紅棕 色沉淀。(2)取本品5g，加水IOml，加1.5倍量的乙醇，攪拌，靜置，濾過(guò)，濾液置水浴上加熱揮盡 乙醇，放冷，濾過(guò)，取濾液Iml加草酸試液2 3滴，產(chǎn)生黃棕色沉淀。(3)取本品5g，研細(xì)，加水50ml溶解，濾過(guò)，濾液用水飽和的乙酸乙酯萃取兩次，每次 15ml，合并萃取液，揮干，殘?jiān)右宜嵋阴ml使溶解，作為供試品溶液。另取原兒茶醛對(duì)照 品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000 年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品溶液1 μ 1，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄 層板上，以苯-乙酸乙酯-甲酸溶液(8 5 0.8)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以2%三 氯化鐵-1%鐵氰化鉀(1 1)溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相 應(yīng)的位置上，顯相同顏色的藍(lán)色斑點(diǎn)。(4)取本品5g，加乙醇20ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)右掖糏ml 使溶解，作為供試品溶液。另取蒲黃對(duì)照藥材2g，同法制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法 (中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供試品溶液2 μ 1、對(duì)照品藥材溶液1 μ 1，分 別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以甲苯-甲酸乙酯-甲酸溶液(3 3 1)為展開(kāi)劑，展開(kāi)， 取出，晾干，噴以5%三氯化鋁乙醇溶液，紫外燈下觀察(365nm)。供試品色譜中，在與對(duì)照 品藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)。(5)取本品20g，加80%乙醇50ml，回流提取30分鐘，放冷，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?IOml使溶解，加氨試液使成堿性，加乙醚提取二次，每次20ml，合并乙醚提取液，蒸干，殘?jiān)?加乙醇2ml使溶解，作為供試品溶液。另取延胡索乙素對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的 溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取供 試品溶液5 μ 1、對(duì)照品溶液2 μ 1，分別點(diǎn)于同一羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板 上，以正己燒一醋酸乙酯一濃氨溶液(6 4 0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置紫外光 燈(365nm)下檢視。供試品色譜中，在與對(duì)照色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。(6)取本品10g，加乙醇40ml，浸泡1小時(shí)，時(shí)時(shí)振搖，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)蛹状?ml 使溶解，置于已處理好的氧化鋁柱O00目，2g，內(nèi)徑10 15mm)上，以甲醇30ml洗脫，收集 洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状?ml使溶解，作為供試品溶液。另取芍藥苷對(duì)照品，加甲醇制成每 Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法(中國(guó)藥典2000年版一部附錄VI B) 試驗(yàn)，吸取上述二種溶液各4 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層 板上，以氯仿一醋酸乙酯一甲醇一甲酸GO 5 10 0.2)為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干， 噴以5%香草醛硫酸溶液，熱風(fēng)吹至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的 位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2000年版附錄VI D)測(cè)定色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn) 用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；乙腈一水(15 85)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為230nm，理 論塔板數(shù)按芍藥苷峰計(jì)算應(yīng)不低于2600。對(duì)照品溶液的制備精密稱取芍藥苷對(duì)照品5mg，置IOOml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋 至刻度，搖勻，用微孔濾膜(0. 45 μ m)濾過(guò)，即得(每Iml中含芍藥苷50ug)。供試品溶液的制備取本品裝量差異下顆粒適量，研細(xì)，精密稱取約0. 3g，置具塞錐型 瓶中，精密加入60%甲醇25ml，密塞，稱定重量，超聲處理(功率250W，頻率40KHZ)30分 鐘，取出，放冷，密塞，再稱定重量，用60 %甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，上清液用微孔濾膜 (0. 45um)濾過(guò)，即得。測(cè)定方法分別精密吸取對(duì)照品液與供試品液各10 μ 1注入液相色譜儀，測(cè)定，即得。 本品每袋含赤芍以芍藥苷(C23H28O11)計(jì)，不得少于8.0mg。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療痛經(jīng)的藥物組合物及制備方法和檢測(cè)方法。原料藥組成為丹參、赤芍、香附、玫瑰花、蒲黃、延胡索(醋制)、五靈脂、桂枝、桃仁、木香，制備方法為取上述組合物原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成臨床接受的劑型，包括但不限于濃縮丸劑、膠囊劑、滴丸劑、顆粒劑、片劑、軟膠囊劑、緩釋劑、口服液體制劑或凍干粉針劑。本發(fā)明采用高效液相色譜法對(duì)芍藥苷進(jìn)行含量測(cè)定。本發(fā)明藥物組合物用于治痛經(jīng)具備很好的療效。
文檔編號(hào)G01N30/90GK102028841SQ20101057683
公開(kāi)日2011年4月27日 申請(qǐng)日期2007年2月26日 優(yōu)先權(quán)日2007年2月26日
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