專利名稱：：一種檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法與前處理裝置的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬于食品檢測領(lǐng)域，涉及一種采用液相微萃取方法進行有機物分析的方法，更具體地說是采用中空纖維膜三相液相微萃取-高效液相色譜法進行原料乳和乳制品中三聚氰胺的測定。
背景技術(shù)：
：三聚氰胺原本是一種重要的化工原料，是常用的工業(yè)化學品。與食品領(lǐng)域相隔甚遠。所以在但是2008年9月發(fā)生在中國的三鹿嬰幼兒奶粉受污染事件，卻使得三聚氰胺一時間成了牛奶附屬品。牛奶或奶制品中三聚氰胺的檢測，突然間成了國內(nèi)外分析化學領(lǐng)域關(guān)注的重要問題，與食品安全檢測息息相關(guān)。由于三聚氰胺本是化工原料，不允許添加到食品中，所以此前，各國均沒有檢測食品中三聚氰胺的國家標準，檢測方法較為落后。對于三聚氰胺的檢測，傳統(tǒng)的有濁度法、升華法、重量法，這些方法主要為化工行業(yè)的測定胺，其用于測定人工合成三聚氰胺的純度，不能滿足食品中檢測微量三聚氰胺的要求；酶聯(lián)免疫吸附分析(ELISA)主要通過試劑盒或試紙直接測定樣品中是否含有三聚氰胺，可以滿足日常食品衛(wèi)生執(zhí)法中檢測三聚氰胺的要求，但是該法容易受其他物質(zhì)的干擾，影響檢測結(jié)果的準確性，一般只適用于樣品的初檢，對于陽性結(jié)果的樣品需采用化學儀器法進一步確證。高效液相色譜法(HPLC)、高效液相色譜_質(zhì)譜聯(lián)用法(LC-MS)、氣相色譜法_質(zhì)譜聯(lián)用法(GC-MS)是近年來分析檢測領(lǐng)域中高精度的檢測方法，其用于檢測食品中的三聚氰胺，具有靈敏度高、準確性強的優(yōu)點。在美國，F(xiàn)DA在2007年3月的三聚氰胺污染貓糧狗糧事件后，相繼公布了用GC-MS和HPLC檢測三聚氰胺的詳細流程。但是，采用液相色譜、氣相色譜等進行的檢測，需要對食品樣品進行繁雜的前處理過程。以我國國家標準方法GB/T22388-2008(HPLC法)(以下簡稱"國標法")為例，其包括以下的前處理過程溶液萃取-離心分離_濾紙過濾-SPE柱凈化-洗脫液濃縮、定容_微孔濾膜過濾，最后才能進入HPLC分析。這些或者繁瑣或者可靠性低的檢測方法，已經(jīng)不能適應目前食品領(lǐng)域中三聚氰胺的檢測壓力。如何在利用液相色譜法、氣相色譜法高精度高靈敏度的優(yōu)點的同時，克服其前處理帶來的耗時耗力的不足，成為該檢測領(lǐng)域重要的課題。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是在于針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種靈敏準確且快速簡便的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法。本發(fā)明的另一目的在于提供該方法的樣品前處理裝置。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的本發(fā)明提供了一種檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，采用高效液相色譜法進行測定，在進入高效液相色譜前，樣品是通過采用中空纖維膜三相液相微萃取進行前處理的。中空纖維膜液相微萃取(Hollowfiberliquidphasemicroextraction，HF-LPME)是液相微萃取技術(shù)(Liquidphasemicroextraction,LPME)中的一種。液相微萃取技術(shù)是一種新型的樣品前處理方法，還可方便地與后續(xù)的儀器分析結(jié)合起來，實現(xiàn)樣品前處理與分析測定的一體化過程。按萃取方式的不同可分為頂空液相微萃取(HS-LPME)，直接浸入式液相微萃取(DI-LPME)，和中空纖維膜液相微萃取(HF-LPME)。其中，頂空液相微萃取要求所萃取的成分必須是易揮發(fā)的；直接浸入式液相微萃取則適用于較為潔凈的液相樣品；而中空纖維膜液相微萃取對于成分復雜，雜質(zhì)含量較多或有色的液相樣品尤為適合。盡管LPME已逐漸被應用到各種物質(zhì)，如環(huán)境、生物樣品、食品等的前處理方法中。但是，目前仍未有任何將LPME應用到三聚氰胺檢測的相關(guān)報道。在本發(fā)明之前，采用LPME作為檢測三聚氰胺的前處理手段的可行性，以及如何實施，尚未一個未知數(shù)。本發(fā)明創(chuàng)造性地將LPME中的HF-LPME作為檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的前處理手段，并摸索出一套能高效萃取樣品溶液中三聚氰胺，并適于直接進入HPLC檢測的前處理方法和系統(tǒng)。HF-LPME最初是在1999年由Pedersen-Bjergaard等提出，是通過有機溶劑在纖維壁孔中形成的液膜進行傳質(zhì)，在多孔的中空纖維腔中進行萃取。HF-LPME有兩相萃取和三相萃取兩種模式。在兩相萃取模式中，被測物通過被固定在中空纖維膜微孔中不溶于水的有機相，進入到膜腔內(nèi)的接收相中。此時有機相和接收相為相同的有機溶劑，待測物質(zhì)的富集過程發(fā)生在兩相之間。而在三相萃取模式中，中空纖維膜腔內(nèi)的接收相不是有機相而是水相，待測物質(zhì)則通過固定在膜孔中的有機相，進入到膜內(nèi)水相中。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)，將有機相固定于膜孔中，以水相作為接收相，尤其適合于萃取樣品溶液中的三聚氰胺并直接進入HPLC檢測系統(tǒng)。采用中空纖維膜三相微萃取技術(shù)使目標物必須先進入到膜壁的有機相，再進入到膜內(nèi)的接收相中，比兩相萃取具有更突出的凈化功能和抗干擾能力。本發(fā)明提供的檢測方法如下原料乳和乳制品制備成為溶液之后，用中空纖維膜三相液相微萃取對溶液中的三聚氰胺進行提取，再直接進入HPLC檢測。在這個方法中，三相液相微萃取是在中空纖維膜中，以水作為接收相存在于纖維膜的內(nèi)部，纖維膜的孔壁上充有有機相；中空纖維膜放置于待測樣品溶液中，即進行萃取過程。在本方法中，纖維膜為聚偏氟乙烯纖維膜、聚乙烯纖維膜或聚丙烯膜纖維膜；其為中空的細管狀，兩端可以封閉，其壁厚100300iim，內(nèi)徑1.2lOmm，孔徑0.10.3ym;有機相通過一定的處理充滿纖維膜的孔壁；有機相是非水溶性有機溶劑，如正辛醇、甲苯。中空纖維膜放置于待測樣品溶液中進行萃取的時間可以為30120min;萃取過程是在5001200rpm的轉(zhuǎn)速下進行的。采用此方法，可以檢測多種原料乳和乳制品，如液態(tài)奶、奶粉。粉末或固體樣品必須經(jīng)過一定的處理成為溶液后再進行檢測。比如，奶粉樣品通過加水超聲溶解方法制得樣品溶液。其他的乳制品如奶酪，稱取試樣于研缽中研磨成干粉狀，通過加水超聲溶解后成為樣品溶液再進行檢測。本發(fā)明同時提供了適用于本方法的樣品前處理裝置，包括一個可以放置待測樣品溶液的帶蓋小瓶，蓋子下方懸掛有含有有機相和水相的纖維膜包覆物，其中的有機相吸附4于纖維膜的孔壁；所述的包覆物至少一部分浸泡于樣品溶液中。本發(fā)明還提供了制備上述裝置的方法，包括以下步驟(1)將由中空纖維膜構(gòu)成的一端捏緊密封，另一端與塑料吸頭相連，成為萃取管，中空纖維膜端為萃取管底部，塑料吸頭端為萃取管頂部；(2)將萃取管浸入有機相溶液中，超聲后取出，用擦鏡紙把多余的有機相吸干；(3)將步驟(2)所得的萃取管的頂部固定于樣品瓶的瓶蓋，當蓋上瓶蓋時，纖維膜的至少一部分將浸泡于樣品瓶中的樣品溶液；而纖維膜與吸頭的接口處位于樣品溶液之上。(4)從萃取管頂部往管內(nèi)注入水，使其充滿或部分充滿中空纖維膜部分，再封住萃取管頂部。具體的制備過程如下(1)準備一個帶有瓶蓋和墊片的小瓶，按照樣品瓶高度，裁剪適當長度的中空纖維膜和透明移液器吸頭(規(guī)格為O.5i!LlOi!L)，移液器吸頭保留尖端部分，剪去粗口徑端。用丙酮超聲清洗20分鐘以除去其污物，取出晾干后用膠水把中空纖維膜和吸頭尖端連接固定，中空纖維膜另一端用鉗子捏緊封閉；(2)將萃取管浸入到有機相中超聲10秒，取出后用擦鏡紙吸掉中空纖維膜上多余的有機相；(3)通過瓶蓋內(nèi)的墊片，把萃取管插入樣品瓶內(nèi)，當蓋上瓶蓋時，纖維膜的至少一部分將浸泡于樣品瓶中的樣品溶液；而纖維膜與吸頭的接口處位于樣品溶液之上。(4)用微量進樣器吸取20iiL接收相(蒸餾水)注入中空纖維膜內(nèi)，用封口膜封閉管口；以上所提供的前處理裝置在進行萃取時，放置于振蕩器中，在室溫下以600r/min的轉(zhuǎn)速，萃取90min;萃取完畢后，用微量進樣器從薄膜內(nèi)吸取全部接收相，轉(zhuǎn)移至進樣小瓶中，待HPLC測。采用該方法進行原料乳和乳制品中三聚氰胺的檢測，不僅操作簡便，且節(jié)省了實驗成本。以下以國家標準方法GB/T22388-2008(HPLC法)為例，從操作步驟(如表1)和檢測成本(如表2)兩方面進行比較。表1.操作步驟的對比<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>高。本發(fā)明所提供的測定方法操作簡便，通過微萃取技術(shù)進行樣品前處理，集采樣和樣品凈化于一體，大大節(jié)省了人力物力。本發(fā)明所提供的方法大大減少了檢測過程對環(huán)境的影響和溶劑的浪費，節(jié)省成本且對環(huán)境友好。通過微萃取的方式，本發(fā)明的方法樣品用量少，對環(huán)境友好，且中空纖維只能一次性使用，避免了交叉污染的現(xiàn)象。圖1本發(fā)明的樣品前處理裝置1為橡膠墊片、2為瓶蓋、3為萃取小瓶、4為塑料吸頭、5為孔壁吸附有有機相的中空纖維膜、6為樣品溶液、7為接收相。圖2實施例2的三聚氰胺標準色譜圖。圖3實施例2的液態(tài)奶空白樣品色譜圖。圖4實施例2的液態(tài)奶加標樣品色譜圖(添加水平為1yg/mL)。圖5實施例3的奶粉空白樣品色譜圖。圖6實施例3的奶粉加標樣品色譜圖(添加水平為2iig/mL)。圖7實施例4的樣品前處理過程的萃取結(jié)果(A)為樣品乳液；(B)為萃取后的接收相。圖8實施例5的液態(tài)奶空白樣品色譜圖。圖9實施例5的液態(tài)奶加標樣品色譜圖(添加水平為0.05yg/mL)。具體實施例方式以下通過實施例進一步說明本發(fā)明的內(nèi)容。實施例1樣品前處理裝置的制備將中空纖維膜剪成2.8厘米長的段，中空纖維膜的材料為聚偏氟乙烯纖維膜，壁厚200iim，內(nèi)徑1.2mm，孔徑0.2ym;取510yL的移液器吸頭作為塑料吸頭，吸頭剪去粗口端，保留尖頭端，剪成2.7厘米長的段。把剪好的膜和吸頭4分別浸泡在丙酮中超聲20分鐘，取出晾干；然后將中空纖維膜與吸頭4尖端用膠水黏緊，用平頭鑷子捏緊封閉中空纖維膜的另一端至膜上出現(xiàn)透明印痕，即制成萃取管；將萃取管浸入正辛醇(有機相)中，超聲IO秒后取出，使得正辛醇充滿在中空纖維膜孔壁中；用擦鏡紙擦去萃取管上多余的正辛醇，此時萃取管的下段即為孔壁吸附有有機相的中空纖維膜5。將萃取管插入萃取小瓶，吸頭4另一端通過瓶蓋2的墊片1，固定萃取管的位置，使得萃取管懸置于萃取小瓶正中央。往萃取小瓶加入樣品溶液，將孔壁吸附有有機相的中空纖維膜5浸入樣品液，并保證孔壁吸附有有機相的中空纖維膜5與吸頭的接口處高于樣品液，不浸入樣品中。用微量注射器吸取蒸餾水(接收相)，注入萃取管內(nèi)腔；然后用封口膜封閉萃取管吸頭4的管口。實施例2檢測方法的空白試驗和加標回收試驗配制lmg/mL三聚氰胺標準溶液。準確量取8mL液態(tài)奶樣品，加標組加入8yL三聚氰胺標準溶液(即添加水平為1Pg/mL)，空白組不加入，每組平行處理三個樣品。將萃取管浸入到正辛醇中超聲IO秒，取出后用擦鏡紙吸掉多余的正辛醇。把萃取管插入樣品瓶內(nèi)，用微量進樣器吸取20iiL蒸餾水(接收相)注入薄膜內(nèi)，用封口膜封閉管口。把萃取裝置放入振蕩器，室溫下以600r/min的轉(zhuǎn)速振蕩萃取90min。萃取后吸取全部接收相，轉(zhuǎn)移至進樣小瓶中，待HPLC領(lǐng)U。稱取1.Olg庚烷磺酸鈉和1.05g檸檬酸，加水溶解并定容至500mL，制得離子對試劑。HPLC型號為島津LC-20A，檢測器為二極管陣列檢測器SPD-M20A。色譜柱為DiamonsilTM(鉆石二代)C18色譜柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5ym。流動相條件為乙腈/離子對試劑(10/90，V/V)，流速1.2mL/min，柱溫30。C，檢測波長240nm。以其在色譜上的響應峰面積和保留時間作圖。實驗結(jié)果如表3和圖2、圖3、圖4所示表3液態(tài)奶基質(zhì)空白和加標實驗測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage8</column></row><table>注RSD為峰面積的相對標準偏差。由結(jié)果可知在該色譜條件下，液態(tài)奶基質(zhì)無干擾物影響三聚氰胺的定性和定量，平均加標回收率為109.9%，相對標準偏差為2.3%。說明本方法可用于液態(tài)奶中三聚氰胺的測定。實施例3檢測奶粉樣品配制lmg/mL三聚氰胺標準溶液。將一小包(25g)市售奶粉溶于200mL溫水中，超聲5min，即配制成牛奶樣品。準確量取8mL牛奶樣品，加標組加入16yL三聚氰胺標準溶液(即添加水平為2iig/mL)，空白組不加入，每組平行處理六個樣品。將萃取管浸入到正辛醇中超聲IO秒，取出后用擦鏡紙吸掉多余的正辛醇。把萃取管插入樣品瓶內(nèi)，用微量進樣器吸取20yL蒸餾水(接收相)注入薄膜內(nèi)，用封口膜封閉管口。把萃取裝置放入振蕩器，室溫下以600r/min的轉(zhuǎn)速振蕩萃取90min。萃取后吸取全部接收相，轉(zhuǎn)移至進樣小瓶中，待HPLC測。稱取1.Olg庚烷磺酸鈉和1.05g擰檬酸，加水溶解并定容至500mL，制得離子對試劑。HPLC型號為島津LC-20A，檢測器為二極管陣列檢測器SPD-M20A。色譜柱為DiamonsilTM(鉆石二代)C18色譜柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5ym。流動相條件為乙腈/離子對試劑(10/90，V/V)，流速1.2mL/min，柱溫30。C，檢測波長240nm。以其在色譜上的響應峰面積和保留時間作圖。檢測結(jié)果如表4所示表4奶粉基質(zhì)空白和加標實驗測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>注RSD為峰面積的相對標準偏差。由結(jié)果可知，在該色譜條件下，奶粉基質(zhì)無干擾物影響三聚氰胺的定性和定量，平均加標回收率為75.6%，相對標準偏差為12.1%。說明本方法可用于奶粉中三聚氰胺的測定。實施例4檢測液態(tài)奶樣品配制lmg/mL三聚氰胺標準溶液。準確量取8mL液態(tài)奶樣品，加標組分別加入三聚氰胺標準溶液16iiL、4iiL、0.8iiL(即添加水平分別為2iig/mL、0.5iig/mL、0.1yg/mL)，每組平行處理三個樣品。將萃取管浸入到正辛醇中超聲IO秒，取出后用擦鏡紙吸掉多余的正辛醇。把萃取管插入樣品瓶內(nèi)，用微量進樣器吸取20iiL蒸餾水(接收相)注入薄膜內(nèi)，用封口膜封閉管口。把萃取裝置放入振蕩器，室溫下以600r/min的轉(zhuǎn)速振蕩萃取90min。萃取后吸取全部接收相，轉(zhuǎn)移至進樣小瓶中，待HPLC測。稱取l.Olg庚烷磺酸鈉和1.05g擰檬酸，加水溶解并定容至500mL，制得離子對試劑。從乳液中萃取所得的液體狀態(tài)如圖7所示。HPLC型號為島津LC-20A，檢測器為二極管陣列檢測器SPD-M20A。色譜柱為DiamonsilTM(鉆石二代)C18色譜柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5ym。流動相條件為乙月青/離子對試劑(10/90，V/V)，流速1.2mL/min，柱溫30。C，檢測波長240nm。以其在色譜上的響應峰面積和保留時間作圖。實驗結(jié)果如表5所示表5不同添加水平實驗測定結(jié)果<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>注RSD為峰面積的相對標準偏差。如圖7所示，從渾濁的乳液中萃取得到澄清透明的樣品溶液，可直接應用到HPLC檢測，無需進一步的0.45iim濾膜凈化。由表5的結(jié)果表明在添加濃度O.liig/mL2iig/mL濃度范圍內(nèi)，方法回收率在72.10%100.5%之間，相對標準偏差小于5%。說明本方法回收率高且穩(wěn)定，重復性強，精密度高。本方法在0.1iig/mL(即0.l卯m)添加水平下，目標物三聚氰胺仍有較高的響應值?，F(xiàn)有的國家標準方法(GB/T22388-2008)中，高效液相色譜法的定量限為2mg/kg，即2ppm。說明本方法通過液相微萃取方法進行樣品前處理，能達到富集目標物和去除干擾物的作用，與一般的高效液相色譜檢測方法相比，能達到更低的檢測限。說明本方法具有靈敏度高，檢測限低的優(yōu)點。實施例5液態(tài)奶檢測的定量限測定配制0.lmg/mL三聚氰胺標準溶液。準確量取8mL液態(tài)奶樣品，加標組加入三聚氰胺標準溶液4L(即添加水平分別為0.05g/mL)，空白組不加標，每組平行處理三個樣品。將萃取管浸入到正辛醇中超聲IO秒，取出后用擦鏡紙吸掉多余的正辛醇。把萃取管插入樣品瓶內(nèi)，用微量進樣器吸取20yL蒸餾水(接收相)注入薄膜內(nèi)，用封口膜封閉管口。把萃取裝置放入振蕩器，室溫下以600r/min的轉(zhuǎn)速振蕩萃取90min。萃取后吸取全部接收相，轉(zhuǎn)移至進樣小瓶中，待HPLC測。稱取1.Olg庚烷磺酸鈉和1.05g檸檬酸，加水溶解并定容至500mL，制得離子對試劑。HPLC型號為島津LC-20A，檢測器為二極管陣列檢測器SPD-M20A。色譜柱為DiamonsilTM(鉆石二代)C18色譜柱，柱長250mm，內(nèi)徑4.6mm，粒徑5ym。流動相條件為乙腈/離子對試劑(10/90，V/V)，流速1.2mL/min，柱溫30。C，檢測波長240nm。以其在色譜上的響應峰面積和保留時間作圖。實驗結(jié)果如表6所示表6定量限實驗測定結(jié)果10<table>tableseeoriginaldocumentpage11</column></row><table>注RSD為峰面積的相對標準偏差。結(jié)果顯示，本方法的定量限為0.05ug/mL。權(quán)利要求一種檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，包括樣品前處理及高效液相色譜檢測，其特征在于所述的樣品前處理是采用中空纖維膜三相液相微萃取進行的。2.如權(quán)利要求1所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的中空纖維膜三相液相微萃取是在將含有有機相和水相的纖維膜包覆物置于待測樣品溶液中進行萃取；所述的有機相吸附于纖維膜的孔壁中，所述的水相包覆于纖維膜的內(nèi)部。3.如權(quán)利要求2所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的有機相為正辛醇或甲苯；所述的纖維膜為聚偏氟乙烯纖維膜、聚乙烯纖維膜或聚丙烯膜纖維膜。4.如權(quán)利要求2所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的纖維膜包覆物為細管形狀，其壁厚100300iim，內(nèi)徑1.210mm，孔徑0.10.3ym。5.如權(quán)利要求2所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的萃取時間為30120min。6.如權(quán)利要求2所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的萃取過程是在5001200rpm的轉(zhuǎn)速下進行的。7.如權(quán)利要求1或2所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的原料乳和乳制品為液態(tài)奶、奶粉、奶酪、奶油或巧克力類含乳制品。8.如權(quán)利要求7所述的檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，其特征在于所述的奶粉通過溶解成為待測樣品；奶酪、奶油或巧克力類含乳制品通過研磨成粉后再經(jīng)溶解成為待測樣品。9.一種用于如權(quán)利要求1所述方法的樣品前處理裝置，包括裝有待測樣品溶液的帶蓋瓶子，其特征在于蓋子下方懸掛有含有有機相和水相的纖維膜包覆物，其中的有機相吸附于纖維膜的孔壁；所述的包覆物至少一部分浸泡于樣品溶液中。10.—種如權(quán)利要求9所述的樣品前處理裝置的制備方法，其特征在于包括以下步驟(1)將由中空纖維膜構(gòu)成的一端捏緊密封，另一端與吸頭相連，成為萃取管，中空纖維膜端為萃取管底部，塑料吸頭端為萃取管頂部；(2)將萃取管浸入有機相溶液中，超聲后取出；(3)將步驟(2)所得的萃取管的頂部固定于樣品瓶的瓶蓋，當蓋上瓶蓋時，纖維膜的至少一部分將浸泡于樣品瓶中的樣品溶液；而纖維膜與吸頭的接口處位于樣品溶液之上。(4)從萃取管頂部往萃取管中注入水，使其充滿或部分充滿中空纖維膜部分，再封住萃取管頂部。全文摘要本發(fā)明公開了一種檢測原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法，采用高效液相色譜法進行測定，其原料乳和乳制品的樣品前處理是采用中空纖維膜三相液相微萃取進行的，纖維膜的孔壁上吸附有機相，而水相作為接收相存在于纖維膜內(nèi)部，通過浸泡入待測樣品溶液中進行萃取后，可直接進入HPLC進行檢測。同時，本發(fā)明還公開了應用于該方法的樣品前處理裝置及其制備方法。本發(fā)明所提供的測定原料乳和乳制品中三聚氰胺的方法靈敏可靠，測定方法操作簡便，節(jié)省成本且對環(huán)境友好。文檔編號G01N30/08GK101776664SQ20101010998公開日2010年7月14日申請日期2010年2月5日優(yōu)先權(quán)日2010年2月5日發(fā)明者何建國,朱芳,歐陽鋼鋒,王錄才,阮靜雯,魯統(tǒng)部申請人:中山大學