專利名稱：酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種酶及微生物的傳感測量技術(shù)中使用的壓電傳感介體的光固定化方法。
壓電石英晶體化學(xué)及生物傳感技術(shù)是近年發(fā)展起來的一種十分有前景的傳感技術(shù)，在分析化學(xué)、生命科學(xué)、生物工程、環(huán)境科學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有十分廣闊的應(yīng)用前景。這種傳感檢測技術(shù)的核心部分是壓電石英晶體傳感介體的制備，尤其是如何對酶及微生物進(jìn)行適當(dāng)固定化。現(xiàn)有的固定化技術(shù)最主要的缺陷是酶及微生物活性損失較多、使用壽命短、穩(wěn)定性、重現(xiàn)性不好。
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)之不足，提供一種使酶及微生物活性損失小，使用壽命長，測量的穩(wěn)定性、重現(xiàn)性好的酶及微生物壓電傳感介體的紫外光固定化方法。
本發(fā)明的方法包括以下步驟(1)特種光固化涂料的制備A.光固化涂料由以下組分及重量百分比組成酶或微生物1～8，丙烯酸環(huán)氧酯20～40，丙烯酸聚酯10～20，三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15～25,1,6-己二醇二丙烯酸酯10～15，可由光引發(fā)自由基聚合的光引發(fā)劑3～5，有機(jī)硅附著力促進(jìn)劑＜1，鹽類成孔劑3～13,聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑0.5～1；B.制備方法如下在室溫條件下，依次加入丙烯酸環(huán)氧酯、丙烯酸聚酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂、1,6-己二醇二丙烯酸酯、光引發(fā)劑，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后依次加入鹽類成孔劑，聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑，有機(jī)硅附著力促進(jìn)劑，準(zhǔn)備涂布前加入冰箱中保存的酶或微生物菌種，慢速攪拌均勻即得特種光固化涂料，低溫密閉干燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，根據(jù)需要，單面或雙面真空噴涂或化學(xué)鍍上惰性金屬銀或金等，機(jī)械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗干凈，干燥；(3)涂膜將特種光固化涂料，涂在干燥后的壓電石英晶體表面上，膜厚0.1～1mm；(4)光固定化處理將涂膜用350納米紫外線照射10～30秒固定化。
本發(fā)明由于將酶及微生物配入到特種光固化涂料中，并用紫外線固定化，固化速度快，固化后膜附著牢固，耐候性、耐濕性均好，可有效固定酶或微生物，而對其活性影響很小，從而大大降低了酶及微生物的活性損失，使介體使用壽命長，穩(wěn)定性好，方法簡單。
實施例一(1)特種光固化涂料的制備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環(huán)氧酯40克，丙烯酸聚酯20克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15克、1,6-己二醇二丙烯酸酯15克，1-羥基環(huán)已基苯基酮光引發(fā)劑5克，充分?jǐn)嚢杈鶆颍缓笠来渭尤氪姿徕c成孔劑3克，聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑0.95克，環(huán)氧基硅烷附著力促進(jìn)劑0.05克，準(zhǔn)備涂布前加入冰箱中保存的淀粉酶1克，慢速攪拌均勻即得特種光固化涂料，低溫密閉干燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，單面真空噴涂銀，機(jī)械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗干凈，干燥；(3)涂膜將特種光固化涂料，涂在干燥后的壓電石英晶體表面上，膜厚0.5mm；(4)光固定化處理將涂膜在350納米紫外線照射10秒固定化。
該壓電傳感介體用于淀粉的測定，固化后膜附著牢固，耐候性、耐濕性均好，介體使用壽命長，穩(wěn)定性好。
實施例二(1)特種光固化涂料的制備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環(huán)氧酯37.5克，丙烯酸聚酯15克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂20克、1，6-己二醇二丙烯酸酯10克，1-羥基環(huán)己基苯基酮光引發(fā)劑5克，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后依次加入氯化鈉成孔劑6克，聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑1克，環(huán)氧基硅烷附著力促進(jìn)劑0.5克，準(zhǔn)備涂布前加入冰箱中保存的微生物菌種5克，慢速攪拌均勻即得特種光固化涂料，低溫密閉干燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，雙面真空噴涂銀，機(jī)械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗干凈，干燥；(3)涂膜將特種光固化涂料，涂在干燥后的壓電石英晶體表面上，膜厚0.6mm；(4)光固定化處理將涂膜在350納米紫外線照射下20秒固定化。
該壓電傳感介體用于微生物的培養(yǎng)，固化后膜附著牢固，耐候性、耐濕性均好，故對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩(wěn)定性好。
實施例三(1)特種光固化涂料的制備在室溫條件下，依次加入丙烯酸環(huán)氧酯20克，丙烯酸聚酯14克、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂25克、1,6-己二醇二丙烯酸酯15克，光引發(fā)劑3克，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后依次加入硫酸鈉成孔劑13克，穩(wěn)定劑1克，附著力促進(jìn)劑1克，準(zhǔn)備涂布前加入冰箱中保存的蛋白酶8克，慢速攪拌均勻即得特種光固化涂料，低溫密閉干燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，單面真空噴涂銀，機(jī)械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗干凈，干燥；(3)涂膜將特種光固化涂料，涂在干燥后的壓電石英晶體表面上，膜厚0.8mm；(4)光固定化處理將涂膜在350納米紫外線照射下10秒固定化。
該壓電傳感介體用于蛋白質(zhì)的測定，固化后膜附著牢固，耐候性、耐濕性均好，故對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩(wěn)定性好。
權(quán)利要求
1.本發(fā)明為酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法，其特征在于包括以下步驟(1)特種光固化涂料的制備A.光固化涂料由以下組分及重量百分比組成酶或微生物1～8，丙烯酸環(huán)氧酯20～40，丙烯酸聚酯10～20，三羥甲基丙烷三丙烯酸脂15～25,1,6-己二醇二丙烯酸酯10～15，可由光引發(fā)自由基聚合的光引發(fā)劑3～5，有機(jī)硅附著力促進(jìn)劑＜1，無機(jī)鹽類成孔劑3～13，聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑0.5～1；B.制備方法如下在室溫條件下，依次加入丙烯酸環(huán)氧酯、丙烯酸聚酯、三羥甲基丙烷三丙烯酸脂、1,6-己二醇二丙烯酸酯、光引發(fā)劑，充分?jǐn)嚢杈鶆?，然后依次加入鹽類成孔劑，聚氧乙烯烷基酚穩(wěn)定劑，有機(jī)硅附著力促進(jìn)劑，準(zhǔn)備涂布前加入冰箱中保存的酶或微生物菌種，慢速攪拌均勻即得特種光固化涂料，低溫密閉干燥保存；(2)壓電石英晶體表面處理選用AT切割的壓電石英晶體，根據(jù)需要，單面或雙面真空噴涂或化學(xué)鍍上惰性金屬銀或金等，機(jī)械拋光，依次用丙酮、乙醇、蒸餾水清洗干凈，干燥；(3)涂膜將特種光固化涂料，涂在干燥后的壓電石英晶體表面上，膜厚0.1～1mm；(4)光固定化處理將涂膜用350納米紫外線照射10～30秒固定化。
全文摘要
本發(fā)明公開了酶及微生物壓電傳感介體的光固定化方法，是以壓電石英晶體為載體，在其上涂布包含酶及微生物的特種光固化涂料，涂布后經(jīng)紫外光固化即得光固定化酶及微生物壓電傳感介體。本發(fā)明能有效固定酶或微生物，對其活性影響很小，介體使用壽命長，穩(wěn)定性好。
文檔編號G01N27/26GK1317574SQ0110683
公開日2001年10月17日 申請日期2001年1月15日 優(yōu)先權(quán)日2001年1月15日
發(fā)明者魏萬之 申請人:湖南大學(xué)