氨基二醇親水色譜固定相及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及液相色譜固定相技術(shù)領(lǐng)域，具體的說，是一種使用"鏈接化學(xué)"（click chemistry)作為鍵合方法制備的氨基二醇親水色譜固定相以及所述氨基二醇親水色譜固 定相的制備方法。 技術(shù)背景
[0002] 親水作用色譜(英文簡稱HILIC)，是近年來發(fā)展起來的用于分離強(qiáng)極性組分的色 譜技術(shù)，是一種以極性固定相（如硅膠或衍生硅膠）及含高濃度極性有機(jī)溶劑和低濃度水溶 液為流動相的色譜模式。所述親水作用色譜解決了傳統(tǒng)反相色譜疏水性固定相(如C18、C8 等對強(qiáng)極性化合物一一如核苷、頭孢、培南等)保留很弱、甚至無保留的問題。將親水作用色 譜用于分離極性化合物，如氨基酸、肽和糖等已有文獻(xiàn)報(bào)道。其中，親水作用色譜的固定相 依然是使用正相固定相：主要是直接使用硅膠、氨基、酰胺基、二醇基、糖類等作為固定相。 但是，不同類型的固定相存在著不同的保留機(jī)制和分離性能，有些類型的固定相會存在一 些比較大的缺點(diǎn)，例如：硅膠柱容易發(fā)生不可逆吸附現(xiàn)象；氨基柱會與糖類生成SchifT堿； 從而影響分離。目前，為親水作用色譜開發(fā)專門固定相的工作還在剛剛起步，親水作用色譜 商品化的固定相種類非常少，因此，為親水作用色譜開發(fā)專門固定相的工作必須要有進(jìn)一 步的發(fā)展。
[0003] "鏈接化學(xué)"（click chemistry)亦稱"點(diǎn)擊化學(xué)"，是由貝瑞?夏普利斯（K. Barry Sharpless)等人提出的，其核心內(nèi)容是：用少量簡單可靠及高選擇性的化學(xué)轉(zhuǎn)變來獲得 更廣泛的分子多樣性。"鏈接化學(xué)"開創(chuàng)了快速、有效、甚至是100%可靠的、高選擇性地制 造各類新化合物的合成化學(xué)新領(lǐng)域，其中，最為廣泛應(yīng)用的反應(yīng)是Huisgen 1，3-diploar cycloaddition反應(yīng)，它在色譜固定相的合成上發(fā)揮了很重要的作用。Huisgen I, 3-diploar cycloaddition 的反應(yīng)式為：
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種氨基二醇親水色譜固定相，其特征在于，其結(jié)構(gòu)為：
2. -種氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，使用"鏈接化學(xué)"作為鍵合方法鍵合氨基 二醇分子，包括以下具體步驟： (1) 制備末端炔基硅膠 ① 在有機(jī)溶劑中加入硅烷偶聯(lián)劑和丙炔胺，于60~150°C條件下反應(yīng)6~36小時(shí)；所 述硅烷偶聯(lián)劑與丙炔胺的摩爾比為1~5:1. 2~5 ; ② 加入活化的微球型硅膠，每克微球型硅膠所需的硅烷偶聯(lián)劑為1~IOmmol ; ③ 在80~120°C條件下反應(yīng)12~48小時(shí)，爾后用砂芯漏斗過濾，依次用二氯甲烷、甲 醇和丙酮洗滌，得到固體物； ④ 將步驟（1)③得到的固體物置于真空干燥箱中在40~80°C條件下干燥6~12小 時(shí)，得到末端炔基硅膠； 其特征在于： (2) 利用"鏈接化學(xué)"制備氨基二醇親水色譜固定相 ① 將步驟（1)④制備的末端炔基硅膠加入體積比為2~10:1的水與甲醇的混合溶劑 中，每克末端炔基硅膠所需水與甲醇的混合溶劑的量為20~50mL，得到硅膠上炔基； ② 在步驟（2)①得到的硅膠上炔基內(nèi)加入修飾有疊氮基團(tuán)的氨基二醇及催化劑：所述 修飾有疊氮基團(tuán)的氨基二醇加入的摩爾劑量為所述硅膠上炔基摩爾劑量的1~15倍；所述 催化劑為二價(jià)銅和抗壞血酸鈉，所述二價(jià)銅加入的摩爾劑量為所述硅膠上炔基摩爾劑量的 1~10%，所述抗壞血酸鈉加入的摩爾劑量為所述硅膠上炔基摩爾劑量的2~40% ; ③ 在10~80°C條件下反應(yīng)72~200小時(shí)，爾后用砂芯漏斗過濾，依次用水、重量濃度 為2~20%的EDTA二鈉水溶液、水、甲醇、丙酮洗絳，得到固體物； ④ 將步驟（2)③得到的固體物置于真空干燥箱中在40~80°C條件下干燥6~12小 時(shí)，得到氨基二醇親水色譜固定相； 步驟（2)的反應(yīng)通式為：
式中，R的結(jié)構(gòu)為：
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，其特征在于，步驟（I) ①采用的有機(jī)溶劑為N，N-二甲基甲酰胺，每克硅膠所需有機(jī)溶劑的量為5~30mL。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，其特征在于，步驟（1) ① 采用的硅烷偶聯(lián)劑的結(jié)構(gòu)為：
5. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，其特征在于，步驟（1) ② 采用的微球型硅膠為粒徑與孔徑均勻的全多孔硅膠球狀體，其粒徑為5~40 μ m，孔徑為 60 ~300 A。
6. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，其特征在于，步驟（2) ②采用的修飾有疊氮基團(tuán)的氨基二醇的結(jié)構(gòu)為：
7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的氨基二醇親水色譜固定相的制備方法，其特征在于，步驟（2) ②修飾有疊氮基團(tuán)的氨基二醇的合成步驟為：
【專利摘要】本發(fā)明氨基二醇親水色譜固定相，其結(jié)構(gòu)為：；本發(fā)明的制備方法包括以下步驟：⑴制備末端炔基硅膠：①在有機(jī)溶劑中加入硅烷偶聯(lián)劑和丙炔胺；②加入活化的微球型硅膠；③反應(yīng)、洗滌得到固體物；④真空干燥得到末端炔基硅膠；⑵利用“鏈接化學(xué)”制備氨基二醇親水色譜固定相：①制備硅膠上炔基；②加入修飾有疊氮基團(tuán)的氨基二醇及催化劑；③反應(yīng)、洗滌得到固體物；④真空干燥得到氨基二醇親水色譜固定相。本發(fā)明采用氨基二醇作為極性功能基團(tuán)，在親水作用液相色譜模式下能實(shí)現(xiàn)對強(qiáng)極性化合物的高效分離；氨基二醇表面結(jié)構(gòu)不會因pH的變化而變化，也不易與溶質(zhì)分子發(fā)生反應(yīng)；本發(fā)明的制備方法能在溫和的條件下實(shí)現(xiàn)高選擇性和高轉(zhuǎn)化率的固載。
【IPC分類】B01J20-30, B01J20-286, B01D15-08
【公開號】CN104826618
【申請?zhí)枴緾N201510188914
【發(fā)明人】褚長虎, 殷偉, 郭瑞強(qiáng), 李妍哲, 朱傳雷, 盛哲
【申請人】華東理工大學(xué)
【公開日】2015年8月12日
【申請日】2015年4月20日