本發(fā)明屬于食品領(lǐng)域，具體涉及一種魔芋葡甘露聚糖微球的制備方法。
背景技術(shù)：
食品天然產(chǎn)物活性因子往往具有增強(qiáng)機(jī)體免疫力、抗氧化和防止多種癌癥等重要生理功能，但因食品活性因子存在穩(wěn)定性差的問題，限制了其應(yīng)用和人體營養(yǎng)吸收。而載體可以用來保護(hù)食品活性因子，維持其穩(wěn)定性，并能提高其分散性，進(jìn)而提高生物利用度。天然高分子具有可再生、生物兼容性和降解性等優(yōu)點，成為制備活性因子載體的最佳材料。目前運用于裝載活性因子的天然高分子有淀粉、糊精類川、蛋白、海藻酸鈉等。
魔芋葡甘露聚糖(KGM)主要成分為葡萄糖和甘露糖，二者通過β-1,4或者β-1,3-糖苷鍵連接。KGM分子質(zhì)量在500～2000kD之間，在水中的溶解度為1％左右，吸水膨脹后體積約為干狀態(tài)的80倍。它具有良好的增稠性、凝膠性、成膜性和一些特殊的生理功能，目前已被用于減肥、降脂以及食品添加劑領(lǐng)域。但由于KGM分子質(zhì)量高，溶解度低，溶膠黏度大以及穩(wěn)定性差，限制了KGM進(jìn)一步的開發(fā)利用。所以，對魔芋葡甘露聚糖進(jìn)行處理具有重要的意義。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明提供魔芋葡甘露聚糖微球的制備方法，是一種通過2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化制備魔芋葡甘露聚糖的方法。
本發(fā)明是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)的。
魔芋葡甘露聚糖微球的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，攪拌溶解，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解溫度為50℃，酶解時間為10 min，將酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴鍋，沸水浴10min滅酶，用乙醇析出固體后進(jìn)行真空冷凍干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）稱取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力攪拌器攪拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=10，向溶液中加入4-7mL pH=10的次氯酸鈉溶液，通過向溶液中加入0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液使溶液的pH值恒定為10，反應(yīng)45min后，加入10mL無水乙醇終止反應(yīng)，1h后用濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH=7并保持該pH值反應(yīng)1 h，然后加入300mL無水乙醇，過濾析出的沉淀，用乙醇洗滌3次，丙酮洗滌3次，將沉淀出來的固體溶于50 mL水中，真空冷凍干燥后得到經(jīng)2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）稱取步驟（2）的產(chǎn)物溶解于水中，使?jié)舛葹?.005g/mL，用0.1mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH=3，取該溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另稱取0.75g司盤80溶解在20g的液體石蠟中制成油相；將水相加入油相中，用磁力攪拌器攪拌形成油包水乳液，向該乳液中通入空氣，制得微球，將微球用正己烷和甲醇分別洗滌3次，離心分離，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。
優(yōu)選地，步驟（1）的攪拌速度為200rpm。
優(yōu)選地，步驟（2）的pH=10的次氯酸鈉溶液加入的體積為5mL。
本發(fā)明的優(yōu)點：
本發(fā)明制備得到的魔芋葡甘露聚糖微球可提高難溶性和敏感活性因子的分散性和穩(wěn)定性，并同時裝載多種活性因子，在食品工業(yè)中具有較好的應(yīng)用前景。
具體實施方式
實施例1
魔芋葡甘露聚糖微球的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，攪拌溶解，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解溫度為50℃，酶解時間為10 min，將酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴鍋，沸水浴10min滅酶，用乙醇析出固體后進(jìn)行真空冷凍干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）稱取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力攪拌器攪拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=10，向溶液中加入4-7mL pH=10的次氯酸鈉溶液，通過向溶液中加入0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液使溶液的pH值恒定為10，反應(yīng)45min后，加入10mL無水乙醇終止反應(yīng)，1h后用濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH=7并保持該pH值反應(yīng)1 h，然后加入300mL無水乙醇，過濾析出的沉淀，用乙醇洗滌3次，丙酮洗滌3次，將沉淀出來的固體溶于50 mL水中，真空冷凍干燥后得到經(jīng)2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）稱取步驟（2）的產(chǎn)物溶解于水中，使?jié)舛葹?.005g/mL，用0.1mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH=3，取該溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另稱取0.75g司盤80溶解在20g的液體石蠟中制成油相；將水相加入油相中，用磁力攪拌器攪拌形成油包水乳液，向該乳液中通入空氣，制得微球，將微球用正己烷和甲醇分別洗滌3次，離心分離，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。
實施例2
魔芋葡甘露聚糖微球的制備方法，包括以下步驟：
（1）稱取20 g 魔芋葡甘露聚糖溶解到2L沸水中，攪拌溶解，攪拌速度為200rpm，向溶液中加入1mg β-甘露聚糖酶，酶解溫度為50℃，酶解時間為10 min，將酶解后的魔芋葡甘露聚糖溶液移入水浴鍋，沸水浴10min滅酶，用乙醇析出固體后進(jìn)行真空冷凍干燥，得到酶解后的魔芋葡甘露聚糖；
（2）稱取8.2g酶解后的魔芋葡甘露聚糖分散在200 mL水中，用磁力攪拌器攪拌并加入0.0648g 2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基，用鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=10，向溶液中加入5mL pH=10的次氯酸鈉溶液，通過向溶液中加入0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液使溶液的pH值恒定為10，反應(yīng)45min后，加入10mL無水乙醇終止反應(yīng)，1h后用濃鹽酸調(diào)節(jié)溶液pH=3，20min后，再用0.5 mol/L的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)溶液的pH=7并保持該pH值反應(yīng)1 h，然后加入300mL無水乙醇，過濾析出的沉淀，用乙醇洗滌3次，丙酮洗滌3次，將沉淀出來的固體溶于50 mL水中，真空冷凍干燥后得到經(jīng)2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧自由基氧化的魔芋葡甘露聚糖；
（3）稱取步驟（2）的產(chǎn)物溶解于水中，使?jié)舛葹?.005g/mL，用0.1mol/L的鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH=3，取該溶液500μL，加入0.05mg的FeSO4·7H2O，制成水相；另稱取0.75g司盤80溶解在20g的液體石蠟中制成油相；將水相加入油相中，用磁力攪拌器攪拌形成油包水乳液，向該乳液中通入空氣，制得微球，將微球用正己烷和甲醇分別洗滌3次，離心分離，真空干燥，即得到魔芋葡甘露聚糖微球。