一種生育三烯酚的分離提純方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種生育三烯酚的分離提純方法，具體包括以下步驟：(1)層析用填料制備；(2)柱層析；(3)分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測合并相同組分洗脫液，經(jīng)濃縮后得到生育三烯酚濃縮液；其中，柱層析填料采用硝酸銀硅膠，在硝酸銀硅膠的制備過程中，調(diào)節(jié)硝酸銀與硅膠比例、加入的水和乙醇的比例、柱層析所采用的上柱量以及烘干時(shí)間等參數(shù)，并采用多種溶劑體系的依次洗脫，使得有效組分的洗脫更加完全，極大的提高了生育三烯酚的收率。該方法工藝簡單、設(shè)備要求低、分離效率高。
【專利說明】 一種生育三烯酚的分離提純方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明屬于化學(xué)工程領(lǐng)域，具體涉及一種生育三烯酚的分離提純方法。

【背景技術(shù)】
[0002]維生素E是生育酚和生育三烯酚以及具有d- α -生育酚生理活性的衍生物(如酯類等)的總稱。目前已經(jīng)從植物資源中分離出4種生育酚(α、β、Υ、δ )和4種生育三烯酚(α、β、Υ、δ )。生育三烯酚與生育酚結(jié)構(gòu)上的主要區(qū)別在于類異戊二烯基側(cè)鏈飽和程度不同。生育三烯酚之所以不受重視有兩方面原因:一是在各種生育酚和生育三烯酚中，α -生育酚的生理活性最高，在人體中優(yōu)先被吸收和利用，而生育三烯酚的生理活性相對較低；二是生育三烯酚的分布不廣，僅存在與單子葉植物(禾本科和棕櫚科)及少數(shù)雙子葉植物中發(fā)現(xiàn)。
[0003]目前，關(guān)于生育三烯酚的提取純化研究報(bào)道很少，其提取分離的難度在于:容易氧化損失；生育酚與生育三烯酚結(jié)構(gòu)及性質(zhì)相近，不易分離。其分離提純技術(shù)包括:皂化以除去植物油中的酯類物質(zhì)，但皂化反應(yīng)需要較高溫度及在堿性條件下進(jìn)行，生育三烯酚極易被氧化損失，因此需要添加抗氧化劑；超臨界CO2萃取，該方法能夠有效克服生育三烯酚分離過程中的易氧化、溶劑殘留等缺點(diǎn)，但是所需設(shè)備成本較高；柱層析色譜分離能夠?qū)ι雍蜕┓舆M(jìn)行粗分離，使大部分生育酚和生育三烯酚進(jìn)行富集，但是無法使生育酚和生育三烯酚兩者有效分離；制備型液相色譜能夠得到高純度的生育三烯酚，但是該方法成本高、設(shè)備要求高、產(chǎn)量小，不適宜工業(yè)化。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]為了克服上述現(xiàn)有技術(shù)之不足，本發(fā)明提供一種生育三烯酚的分離提純方法，該方法工藝簡單、設(shè)備要求低、分離效率高。
[0005]本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為，一種生育三烯酚的分離提純方法，具體包括以下步驟:
[0006](I)層析用填料制備:按娃膠:硝酸銀=2.5?3.5:1 (m/m)的比例混合,加入娃膠質(zhì)量1:1?2 (m/v)蒸餾水及1: 1.5?3 (m/v)乙醇，攪拌混合，減壓蒸餾脫除溶劑，得流動(dòng)樣粉末于100-120°C烘干16?24h ；
[0007](2)柱層析:采用濕法裝柱，將硝酸銀硅膠用非極性溶劑浸泡后一次性轉(zhuǎn)入層析柱，用所述非極性溶劑作為洗脫劑反復(fù)洗脫填料使硝酸銀硅膠沉積壓實(shí)，按硝酸銀硅膠質(zhì)量5 %?30 %的上柱量將樣品轉(zhuǎn)移至硅膠頂端，然后按0.5-lBV(柱體積)非極性溶劑、0.5_1BV(柱體積)5%?10%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、0.5-lBV(柱體積)50%?100%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品；
[0008](3)分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測合并相同組分洗脫液，經(jīng)濃縮后得到生育三烯酚濃縮液。
[0009]優(yōu)選的,步驟⑴中，按娃膠:硝酸銀=2.5:1 (m/m)的比例混合。
[0010]優(yōu)選的，步驟⑵中的非極性溶劑為正己烷、正庚烷或石油醚。
[0011]優(yōu)選的，步驟⑵中的極性溶劑為乙酸乙酯、四氫呋喃或氯仿。
[0012]優(yōu)選的，步驟⑵中的非極性溶劑為正己烷，極性溶劑為乙酸乙酯。
[0013]優(yōu)選的，步驟(2)中按硝酸銀硅膠質(zhì)量5%的上柱量將樣品轉(zhuǎn)移至硅膠頂端。
[0014]優(yōu)選的，步驟(2)中的極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液為乙酸乙酯-正己烷。
[0015]優(yōu)選的，步驟⑵中，按IBV(柱體積)非極性溶劑、1BV(柱體積)10%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、IBV(柱體積)50%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品。
[0016]優(yōu)選的，步驟(3)中的濃縮為分子蒸餾濃縮。
[0017]本發(fā)明分離的樣品來源廣泛，既可以來源于棕櫚油和米糠油，也可以來源于谷物加工的下腳料中含有比較豐富的生育三烯酚，含有一定濃度的生育三烯酚的待分離的樣品均適用本發(fā)明的方法。樣品來源也可以通過購買得到，如馬來西亞Carotech公司生產(chǎn)的生育三烯酚原料(其中混合生育三烯酚含量25.32%，α-生育酚含量6.9%，另外含有其他成分包括角鯊烯、植物留醇、輔酶QlO和混合型類胡蘿卜素等)。
[0018]相比現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明具有如下優(yōu)勢:
[0019]1、柱層析填料采用硝酸銀硅膠，在硝酸銀硅膠的制備過程中，包括硝酸銀與硅膠比例、加入的水和乙醇的比例以及烘干時(shí)間等參數(shù)，都是 申請人:經(jīng)過長期創(chuàng)造性勞動(dòng)摸索出來的最佳配比；柱層析所采用的上柱量以及多種溶劑體系的依次使用，即采用從非極性溶劑到濃度增加的極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液洗脫，使得有效組分的洗脫更加完全，極大的提高了生育三烯酚的收率；
[0020]2、本發(fā)明的方法工藝簡單、設(shè)備要求低、分離效率高，適宜于工業(yè)化。

【具體實(shí)施方式】
[0021]下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步描述:
[0022]實(shí)施例1
[0023](I)層析用填料制備:取硅膠100g，硝酸銀40g，加入10ml蒸餾水及150ml乙醇，攪拌混合，減壓蒸餾脫除溶劑，得流動(dòng)樣粉末于120°C烘干20h ；
[0024](2)柱層析:采用濕法裝柱，將硝酸銀硅膠用正己烷浸泡后一次性轉(zhuǎn)入層析柱，用正己烷作為洗脫劑反復(fù)洗脫填料使硝酸銀硅膠沉積壓實(shí)，取7g樣品轉(zhuǎn)移至硅膠頂端，然后按正己烷1BV、10%乙酸乙酯-正己烷1BV、50%乙酸乙酯-正己烷IBV的洗脫劑順序洗脫樣品；樣品來源通過購買得到，馬來西亞Carotech公司生產(chǎn)的生育三烯酚原料(其中混合生育三烯酚含量25.32%，α -生育酚含量6.9% )；
[0025](3)分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測合并相同組分洗脫液，經(jīng)濃縮后得到生育三烯酚濃縮液1.99g，其中生育三烯酚含量85.57%，收率81.0%。
[0026]以上實(shí)施例顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征和本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍，在不脫離本發(fā)明范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的范圍內(nèi)。
【權(quán)利要求】
1.一種生育三烯酚的分離提純方法，具體包括以下步驟: (1)層析用填料制備:按娃膠:硝酸銀=2.5?3.5:1 (m/m)的比例混合,加入娃膠質(zhì)量1:1?2 (m/v)蒸餾水及1: 1.5?3 (m/v)乙醇，攪拌混合，減壓蒸餾脫除溶劑，得流動(dòng)樣粉末于 100-120°C烘干 16 ?24h ； (2)柱層析:采用濕法裝柱，將硝酸銀硅膠用非極性溶劑浸泡后一次性轉(zhuǎn)入層析柱，用所述非極性溶劑作為洗脫劑反復(fù)洗脫填料使硝酸銀硅膠沉積壓實(shí)，按硝酸銀硅膠質(zhì)量5 %?30 %的上柱量將樣品轉(zhuǎn)移至硅膠頂端，然后按0.5_1BV(柱體積)非極性溶劑、0.5-lBV(柱體積)5%?10%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、0.5-lBV(柱體積)50%?100%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品； (3)分段收集洗脫液，根據(jù)TLC檢測合并相同組分洗脫液，經(jīng)濃縮后得到生育三烯酚濃縮液。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(I)中，按娃膠:硝酸銀=2.5:1 (m/m)的比例混合。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(2)中的非極性溶劑為正己烷、正庚烷或石油醚。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(2)中的極性溶劑為乙酸乙酯、四氫呋喃或氯仿。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(2)中的非極性溶劑為正己烷，極性溶劑為乙酸乙酯。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(2)中按硝酸銀硅膠質(zhì)量5%的上柱量將樣品轉(zhuǎn)移至硅膠頂端。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(2)中，按IBV(柱體積)非極性溶劑、IBV(柱體積)10%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液、IBV (柱體積)50%極性溶劑-非極性溶劑的混合洗脫液的順序洗脫樣品。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種生育三烯酚的分離提純方法，其特征在于，步驟(3)中的濃縮為分子蒸餾濃縮。
【文檔編號(hào)】B01D15/20GK104262315SQ201410453257
【公開日】2015年1月7日 申請日期:2014年9月5日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月5日
【發(fā)明者】張?jiān)慈? 王嘉磊, 甄洪峰, 魏國華 申請人:寧波大紅鷹生物工程股份有限公司